[发明专利]一种长白山东方蜜蜂SSR标记引物组、PCR鉴定方法以及应用有效
申请号: | 202110358525.2 | 申请日: | 2021-04-01 |
公开(公告)号: | CN113151493B | 公开(公告)日: | 2023-09-15 |
发明(设计)人: | 刘楠楠;牛庆生;王志;张发;高寿增;兰凤明;宋延明;何金明;郝京玉;王琦 | 申请(专利权)人: | 吉林省养蜂科学研究所(吉林省蜂产品质量管理监督站;吉林省蜜蜂遗传资源基因保护中心) |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/6858;C12N15/11;G16B20/40;G16B30/00;G16B20/30 |
代理公司: | 北京超凡宏宇知识产权代理有限公司 11463 | 代理人: | 陈秋梦 |
地址: | 132000 吉*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 长白山 东方 蜜蜂 ssr 标记 引物 pcr 鉴定 方法 以及 应用 | ||
1.一种长白山东方蜜蜂SSR标记引物组,其特征在于,所述引物组包括如下引物对:第一引物对的序列如SEQ ID NO.1-2所示,第二引物对的序列如SEQ ID NO.3-4所示,第三引物对的序列如SEQ ID NO.5-6所示,第四引物对的序列如SEQ ID NO.7-8所示,第五引物对的序列如SEQ ID NO.9-10所示,第六引物对的序列如SEQ ID NO.11-12所示,第七引物对的序列如SEQ ID NO.13-14所示,第八引物对的序列如SEQ ID NO.15-16所示,第九引物对的序列如SEQ ID NO.17-18所示,第十引物对的序列如SEQ ID NO.19-20所示和第十一引物对的序列如SEQ ID NO.21-22所示。
2.一种采用权利要求1所述的长白山东方蜜蜂SSR标记引物组进行PCR鉴定的方法,其特征在于,所述PCR鉴定方法包括如下的反应程序:
94-96℃ 1-5min;94-98℃25-30s,58-62℃25-30s,70-72℃25-30s,8-10个循环;94-98℃25-30s,55-62℃25-30s,70-72℃25-30s,25-40个循环;70-72℃5-10min。
3.根据权利要求2所述的采用所述长白山东方蜜蜂SSR标记引物组进行PCR鉴定的方法,其特征在于,所述PCR鉴定的反应体系包括:
模板DNA 20-50ng,上、下游引物分别为0.1-2μl,引物浓度为10-1000μM,dNTP为1-10μl,dNTP的浓度为10-1000μM,10×Taq Buffer 2-2.5μl,1 -10U/μL Taq酶0.1-1μl,余量为水。
4.根据权利要求3所述的采用所述长白山东方蜜蜂SSR标记引物组进行PCR鉴定的方法,其特征在于,所述PCR鉴定为STR-PCR分型检测。
5.一种如权利要求要求1所述的长白山东方蜜蜂SSR标记引物组在长白山东方蜜蜂种质资源遗传图谱的构建中的应用。
6.一种如权利要求要求1所述的长白山东方蜜蜂SSR标记引物组在长白山东方蜜蜂遗传多样性分析中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述遗传多样性分析包括东方蜜蜂种群杂合度分析、香农威纳指数分析、多态信息量分析和遗传分化指数分析中的至少一种。
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