[发明专利]一种黑曲霉二糖磷酸化酶及其在黑曲霉二糖制备中的应用在审
| 申请号： | 202110264847.0 | 申请日： | 2021-03-05 |
| 公开（公告）号： | CN112980762A | 公开（公告）日： | 2021-06-18 |
| 发明（设计）人： | 吴敬;夏伟;毕然;黄燕 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12P19/18;C12P19/12;C12R1/125 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 林娟 |
| 地址： | 214000 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 曲霉 磷酸化酶 及其 制备 中的 应用 | ||
1.一种重组菌，其特征在于，表达来源于Anaerosporobacter mobilis DSM 15930的黑曲霉二糖磷酸化酶。
2.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于，编码所述黑曲霉二糖磷酸化酶的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
3.根据权利要求2所述的重组菌，其特征在于，以枯草芽孢杆菌为出发菌株。
4.根据权利要求3所述的重组菌，其特征在于，以pBSMμL3为表达载体。
5.一种制备黑曲霉二糖的方法，其特征在于，以麦芽糖、或麦芽糖和葡萄糖的混合物为底物，将麦芽糖磷酸化酶和利用权利要求1-4任一项所述重组菌表达的黑曲霉二糖磷酸化酶、或氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的黑曲霉二糖磷酸化酶共同转化生产黑曲霉二糖。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，麦芽糖磷酸化酶和黑曲霉二糖磷酸化酶的加酶量比例为(1～2.5):(1～2.5)。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述麦芽糖磷酸化酶的加酶量为0.6～1.0U/mL。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，反应体系中的磷酸盐浓度为10-25mM。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，以麦芽糖为底物时，麦芽糖的浓度为200-500g/L；以麦芽糖和葡萄糖的混合物为底物时，麦芽糖浓度为200g/L，葡萄糖浓度为50-100g/L。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，在pH5.0-7.0、30-40℃下反应，反应时间不低于24h。
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