[发明专利]一种氨氯地平半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种氨氯地平半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法和应用，本发明先制备得到了氨氯地平半抗原AN‑SSA，应用该半抗原得到了氨氯地平人工完全抗原和氨氯地平多克隆抗体，该抗体对氨氯地平具有高灵敏度和高特异性的识别能力，半抑制浓度为0.31μg/kg，定量检测范围为0.04758～2.078μg/kg，检测限为0.085.μg/kg，对非洛地平、尼群地平的交叉反应率均低于1％。另外，本发明利用氨氯地平抗体建立了胶体金免疫层析技术，具有较宽的检测范围和较高的灵敏度，能够特异性识别氨氯地平的检测，可视检测线为20ng/mL，在保健食品中氨氯地平的免疫快速检测中具有较大应用前景。

技术领域

本发明涉及食品安全检测技术领域，更具体地，涉及一种氨氯地平半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法和应用。

背景技术

氨氯地平是目前最常见的一种降血压药物，氨氯地平是第三代二氢吡啶钙通道阻滞剂。氨氯地平的作用机制是使动脉壁的平滑肌松弛，降低总外周阻力，从而降低血压。不法商家为了提高销量、牟取暴利，将氨氯地平等药物添加于保健食品中，以降血压达到良好的效果来吸引广大消费者，这种做法不但违反了我国《食品安全法》，而且这也严重损害消费者的权益和身心健康。2019年国务院食品安全办、公安部、市场监管总局联合公布了8起食品保健食品整治欺诈和虚假宣传重大案件，其中就涉及保健食品中非法添加氨氯地平药物。针对以上情况，加强保健食品中非法药物添加的检测亟不可待。

研究表明，氨氯地平服用过量时往往会引起-腿或脚踝肿胀，身体疲倦，胃痛，恶心，头晕等一系列副作用。由于饮食不科学，我国高血压人数增长较快，因此，我国高血压病人的OTC保健食品市场种类繁多。其中不免鱼龙混杂，其中纯食品中添加西药最为常见。保健食品中是禁止添加药物。氨氯地平在保健食品中是违禁药物。因此，建立一种可靠快速检测氨氯地平的检测方法对于监测保健食品中非法添加具有重要的意义。

目前，氨氯地平的主要检测方法有分光光度法，高效液相色谱(HPLC)，气相色谱(GC)等。例如中国专利CN111579539A公开了利用氨氯地平在酸性条件下与亚硝酸钠反应生成重氮盐，然后与N,N-二甲基-1-萘胺反应生成强荧光性衍生物，直接通过荧光法测定该衍生物；中国专利CN108051534A开了保健品中氨氯地平高效液相色谱-串联质谱检测；这些方法虽然结果可靠，准确度高，但仪器设备昂贵、样品前处理复杂繁琐、检测成本高且需要专业人员操作，不符合现场检测“低成本、快速、准确和大批量检测”的要求，而免疫检测方法具备快速、灵敏、准确、操作简便等特点，且对样品纯度要求不高，特别适用于大批量样品的检测，比起这些已有方法在现场检测氨氯地平方面具有更大优势。因此，迫切需要建立一种高灵敏、能检测氨氯地平的免疫检测方法。而上述方法建立的关键在于设计出合适的氨氯地平半抗原并获得灵敏度高、特异性强的抗体，但是现有技术中还未见有关于氨氯地平半抗原、人工抗原、抗体的相关报道。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中存在的上述缺陷和不足，提供一种氨氯地平半抗原。

本发明的第二个目的是提供一种氨氯地平人工完全抗原。

本发明的第三个目的是提供一种氨氯地平多克隆抗体。

本发明的第四个目的在于提供所述氨氯地平人工抗原、多克隆抗体的应用。

本发明的上述目的是通过以下技术方案给予实现的：

一种氨氯地平半抗原，其结构式如式(I)所示：

所述氨氯地平半抗原采用系统命名法命名为：