[发明专利]混源萜penicimeroterpenoids A–C及其制备方法和应用

权利要求书

1.化合物Penicimeroterpenoids A、B、C或其药用盐，其结构式如式（Ⅰ）所示：

式（Ⅰ）。

2.一种权利要求1所述的化合物Penicimeroterpenoids A、B、C的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（a）制备真菌Penicilliumsp.SCSIO41512的发酵产物，发酵产物分离出发酵液和菌丝体；

（b）将步骤（a）得到的发酵液用大孔树脂吸附，接着用水冲洗大孔树脂去掉培养基成分，再用甲醇或乙醇冲洗大孔树脂，浓缩有机相得到甲醇或乙醇提取物；或将步骤（a）得到的发酵液用乙酸乙酯、二氯甲烷或氯仿溶剂萃取，浓缩得到乙酸乙酯提取物、二氯甲烷提取物或氯仿提取物；菌丝体破碎后用丙酮浸泡，提取液减压浓缩除去丙酮，剩余水相用乙酸乙酯、二氯甲烷或氯仿萃取，浓缩得菌丝体的乙酸乙酯、二氯甲烷或氯仿提取物；合并菌丝体和发酵液的提取物，得到总提取物；

（c）将步骤（b）的总提取物经过正相硅胶柱层析，依次用二氯甲烷:甲醇体积比为100:0, 95:5, 90:10, 80:20, 70:30, 60:40, 50:50的溶剂系统梯度洗脱，收集二氯甲烷:甲醇体积比95:5冲洗下来的样品得到组分Fr.2；组分Fr.2通过中压反相ODS柱分离，以甲醇/水/TFA体积比5:95:0.03-100:0:0.03梯度洗脱，其中用甲醇/水/TFA 按体积比65:35:0.03梯度洗脱得到的组分Fr.2-7经过凝胶Sephadex LH-20柱分离，以甲醇为洗脱溶剂，结合TLC，以二氯甲烷：甲醇=v/v 20:1为展开剂，分别收集Rf为0.3的流份为组分Fr.2-7-2，Rf为0.4的流份为Fr.2-7-1，Fr.2-7-1进一步通过半制备型HPLC纯化，以甲醇/水/TFA按体积比70:30:0.03等度洗脱得到化合物Penicimeroterpenoid A，Fr.2-7-2通过半制备型HPLC纯化，以甲醇/水/TFA按体积比65: 35: 0.03等度洗脱得到化合物PenicimeroterpenoidsB和C；

步骤（a）中所述的发酵液和菌丝体是通过以下方法制备：将真菌Penicilliumsp.SCSIO41509在真菌适用的平板培养基中生长，待真菌长出孢子后，将真菌接种到发酵培养基中，于室温静置培养28天，得到发酵液和菌丝体，所述的发酵培养基每升是通过以下方法配制的：用500 mL的纯水煮200 g的马铃薯，煮沸20 min，过滤得马铃薯汁，再加入葡萄糖20 g、海盐30 g，用水补足至1000 mL；

所述的真菌Penicilliumsp.SCSIO 41512，于2020年5月22日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，其保藏编号为GDMCC No：61031。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤（b）中所述的浓缩是采用减压浓缩。

4. 权利要求1所述的化合物Penicimeroterpenoids A、B、C或其药用盐在制备胰蛋白酶抑制剂、人白细胞弹性蛋白酶抑制剂、蛋白酪氨酸磷酸酶CDC25B抑制剂和/或SHP1酶抑制剂中的应用。

5. 一种胰蛋白酶抑制剂、人白细胞弹性蛋白酶抑制剂、蛋白酪氨酸磷酸酶CDC25B抑制剂和/或蛋白酪氨酸磷酸酶SHP1抑制剂，其特征在于，含有权利要求1所述的化合物Penicimeroterpenoids A、B、C中任一化合物或其药用盐作为活性成分。

6. 真菌Penicilliumsp.SCSIO 41512在制备权利要求1中的化合物Penicimeroterpenoids A、B和/或C中的应用，所述的真菌Penicilliumsp.SCSIO 41512，于2020年5月22日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，其保藏编号为GDMCC No：61031。