[发明专利]氯吡嘧磺隆的半抗原、完全抗原及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了氯吡嘧磺隆的半抗原、完全抗原及其制备方法和应用，涉及氯吡嘧磺隆检测技术领域。本发明公开的氯吡嘧磺隆半抗原，结构式如下：。本发明的半抗原能够方便、快捷地获得，合成成本低，效果好；且由本发明完全抗原免疫得到的抗血清效价好，特异性高，能够有效用于抗氯吡嘧磺隆抗体的制备，具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明涉及氯吡嘧磺隆检测技术领域，具体而言，涉及氯吡嘧磺隆的半抗原、完全抗原及其制备方法和应用。

背景技术

氯吡嘧磺隆英文名称为halosulfuron-methyl，化学名为3-（4,6-二甲氧基嘧啶-2-基）-1-（1-甲基-3-氯-4-甲氧基甲酰基吡唑-5-基）磺酰脲。商品名称：氯吡嘧磺隆，CAS登记号:100784-20-1，分子式为：C₁₃H₁₅ClN₆O₇S，相对分子量为：434.81。

氯吡嘧磺隆通过抑制植物体内支链氨基酸亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸的生物合成，从而抑制植物根系的生长，主要用于防除阔叶杂草和莎科杂草，如仓耳、曼佗罗、豚草、反枝苋、野西瓜苗、蓼、马齿苋、龙葵、决明、牵牛、香附子等。氯吡嘧磺隆在中国共登记21个，其中1个原药、8个单剂、12个混剂，包括水分散粒剂、可湿性粉剂、可分散油悬浮剂和泡腾剂片。主要登记在冬小麦田、番茄田、甘蔗田、高粱田、水稻旱直播田、水稻田（直播）、水稻移栽田、夏玉米田、小麦田和玉米田共10个作物中。易造成农产品、土壤和水体中的残留，对其残留进行检测分析十分必要。

目前，氯吡嘧磺隆的分析方法主要为色谱法和色谱-质谱联用法。但此类仪器检测方法需要使用昂贵的仪器设备，检测费用高，耗时长，不适于农药残留现场快速检测。与仪器分析方法相比，免疫分析法具有快速、简便、实时、易于进行现场检测、样品前处理简单、灵敏度高、选择性强、适合于高通量分析等优点，而且能大幅度降低检测成本。

但是目前，缺乏针对氯吡嘧磺隆的半抗原和完全抗原以及免疫检测数据。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供氯吡嘧磺隆的半抗原、完全够抗原及其制备方法和应用。本发明的半抗原能够方便、快捷地获得，合成成本低，效果好；且由本发明完全抗原免疫得到的抗血清效价好，特异性高，免疫得到的宿主动物脾细胞能够有效用于杂交瘤细胞的融合和抗氯吡嘧磺隆抗体的制备，具有广阔的应用前景。

本发明是这样实现的：

一方面，本发明提供一种氯吡嘧磺隆的半抗原，其结构如式（I）所示：

式（I）；

其中，R1为连接基团，其能够与载体蛋白偶联以使所述半抗原形成完全抗原。

现有技术中，氯吡嘧磺隆活性成分主要由吡唑基磺胺、磺酰脲桥和嘧啶胺三个部分组成。当溶剂pH为酸性或中性时，氯吡嘧磺隆化合物容易发生降解，分解为吡唑基磺胺和嘧啶胺两个部分；当溶液pH为碱性时，氯吡嘧磺隆化合物由于吡唑环亲电子基团的存在，容易发生桥式收缩，产生分子重排，吡唑环上的-Cl取代基增强了其亲电性，从而增强了氯吡嘧磺隆的桥式收缩。收缩后的产物稳定性低、易降解为嘧啶胺等化合物。氯吡嘧磺隆稳定性低，因其磺酰脲桥易在酸性和碱性条件下容易降解和收缩等特点，导致合成完整氯吡嘧磺隆分子的半抗原成本高，成功率低。这是目前市场上缺乏检测氯吡嘧磺隆抗体的重要原因。针对这一问题，本发明通过研究发现，在保留氯吡嘧磺隆部分活性位点1-甲基-3-氯-4-甲氧羰基吡唑-5-磺酰胺的基础上，在磺酰氨基团上引入能够与载体蛋白偶联的碳连接臂，即R1连接基团，得到的结构即式（I）具有抗原性；将该结构与载体蛋白偶联进行免疫得到的抗血清或抗体，能够识别并特异性结合氯吡嘧磺隆。该结构部分，与其他磺酰脲类除草剂相似度低，制备的完全抗原免疫宿主动物后，能够刺激机体产生特异性高的抗体。