[发明专利]BRCA1/2突变检测组合物、试剂盒及文库构建方法有效
| 申请号： | 202010086603.3 | 申请日： | 2020-02-11 |
| 公开（公告）号： | CN111269980B | 公开（公告）日： | 2023-06-16 |
| 发明（设计）人： | 陈明;左中和;郭鑫武;曾敏;李金良;刘让蛟;戴立忠 | 申请（专利权）人： | 圣湘生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6886 | 分类号： | C12Q1/6886;C12N15/11;C40B50/06;C40B40/08 |
| 代理公司： | 北京派特恩知识产权代理有限公司 11270 | 代理人： | 任晓;张颖玲 |
| 地址： | 410205 湖南省长沙*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | brca1 突变 检测 组合 试剂盒 文库 构建 方法 | ||
1.一种BRCA1/2基因突变检测的组合物，所述组合物包括：
如SEQ ID NO:1~92所示的寡核苷酸，其中，SEQ ID NO:1~46所示的寡核苷酸用于检测BRCA2基因，SEQ ID NO:47~92所示的寡核苷酸用于检测BRCA1基因。
2.根据权利要求1所述的组合物，其中，进一步包括根据测序接头设计的引物对。
3.使用如权利要求1或2所述的组合物在制备BRCA1/2基因突变检测的试剂盒中的用途。
4.一种BRCA1/2基因突变检测的试剂盒，包括：如权利要求1或2所述的组合物。
5.根据权利要求4所述的试剂盒，其中，进一步包括片段化所需试剂。
6.根据权利要求5所述的试剂盒，其中，所述片段化所需试剂为DNA片段化酶。
7.根据权利要求4所述的试剂盒，其中，进一步包括选择片段试剂。
8.根据权利要求7所述的试剂盒，其中，所述选择片段试剂为磁珠。
9.一种BRCA1/2基因文库的构建方法，所述方法包括：
1）使用权利要求1或2所述的组合物扩增样品中的BRCA1/2基因，得到扩增子；
2）将所述扩增子片段化；
3）选择片段，并进行末端修复和加腺苷酸；
4）连接接头；以及
5）第二轮PCR扩增。
10.根据权利要求9所述的方法，其中，步骤2）中所述片段化为化学片段化或物理片段化。
11.根据权利要求9或10所述的方法，在步骤2）中将所述文库片段化为主峰在300bp，范围在200~400bp的片段。
12.根据权利要求9所述的方法，步骤3）中的选择片段通过调整磁珠液的用量进行。
13.根据权利要求9~12中任一项所述的方法获得的BRCA基因文库。
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