[发明专利]一种文蛤鲜味肽及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种文蛤鲜味肽，其特征在于，包含氨基酸序列为GLLPDGTPR、RPNPFENR、STMLLESER、ANPGPVRDLR、QVAIAHRDAK、VLPTDQNFILR、VTADESQQDVLK中的任意一种或几种多肽。

2.根据权利要求1所述的文蛤鲜味肽，其特征在于，所述鲜味肽具有鲜味和咸味增强效果，其呈鲜阈值为0.125mg/mL。

3.根据权利要求1所述文蛤鲜味肽，其特征在于，所述鲜味肽基于分子模拟可以与鲜味受体T1R1/T1R3对接，主要结合位点为位于T1R3亚基上的氨基酸残基Asp196、Glu128、His125、His368、Glu281和Arg34。

4.根据权利要求1所述一种文蛤鲜味肽，其特征在于，所述多肽的制备方法包括以下步骤：

(1)水煮液冻干粉的制备，将鲜活文蛤去壳取肉，洗净沥干水分后称重，按比例加入去离子水匀浆，加热煮制后滤布过滤，滤液离心后取上清液，冷冻干燥，得水煮液冻干粉；

(2)超滤分离，将上述水煮液冻干粉复溶于超纯水中，配置成浓度为10mg/mL的溶液，过超滤膜，收集过滤液，冷冻干燥，得超滤液冻干粉；

(3)凝胶色谱纯化，上述超滤液冻干粉用超纯水复溶，制成浓度为10mg/mL溶液，上Sephadex G-15凝胶色谱柱，超纯水洗脱，收集第5峰组分F5，冷冻干燥，得F5冻干粉；

(4)RP-HPLC纯化，将上述F5冻干粉溶于超纯水，制成浓度10mg/mL溶液，进一步用反相高效液相色谱分离纯化，收集第1个主峰组分F5-Ⅰ，冷冻干燥，得文蛤鲜味肽冻干粉。

5.根据权利要求4所述文蛤鲜味肽的制备方法，其特征在于，步骤(1)中文蛤肉与去离子水的比例为1:3(w/v)；煮制时中心温度达到95～100℃后保持20～30min；采用5000r/min的转速对水煮液离心20～30min。

6.根据权利要求4所述文蛤鲜味肽的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述超滤膜截留分子量为3000Da，在4℃低温下进行超滤分离。

7.根据权利要求4所述文蛤鲜味肽的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述SephadexG-15凝胶色谱柱，洗脱条件为：上样量2mL，流速1mL/min，紫外检测波长220nm。

8.根据权利要求4所述文蛤鲜味肽的制备方法，其特征在于，步骤(4)中所述将F5冻干粉进一步用反相高效液相色谱分离纯化，色谱条件为：色谱柱YMC-Pack ODS-AQ C18(250×10mm，5μm)，流速1mL/min，检测波长220nm，上样量100μL，流动相：A：乙腈(0.05％TFA)，B：超纯水(0.05％TFA)，等度洗脱：10％A，90％B，洗脱时间40min。

9.权利要求1所述文蛤鲜味肽在制备调味品、食品及保健品中的应用。

10.根据权利要求9所述的调味品，其特征在于，所述调味品包括味精、鸡精、鸡粉、酱油、汤块。