[发明专利]人类BCR-ABL基因T315I突变检测与分析

说明书

本发明提供了一种用于用于人类BCR/ABLT315I突变的试剂盒及其制备方法和用途。所述试剂盒的应用，对CML和Ph+ALL耐药性的筛查及临床科学用药具有指导意义，其中BCR‑ABL融合基因的ABL T315I突变在临床上被用作CML和Ph+ALL药物治疗指导的主要指针。

技术领域

本发明涉及分子生物学领域的基因检测技术，尤其涉及人类BCR-ABL基因T315I突变检测与分析，提供了用于人类BCR/ABLT315I突变的试剂盒。

背景技术

费城染色体是由9号和22号染色体相互易位形成t(9；22)(q34；q11)，其编码一种异常蛋白质“BCR-ABL”融合蛋白。由于9号染色体ABL断裂点不同，产生三种融合基因，编码三种不同分子量的融合蛋白P190，P210，P230。其中，95％的慢性髓细胞白血病(chronicmyelogenous leukemia，CML)和20％～40％急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblasticleukemia,ALL)都可检测到特征性的Ph染色体及其分子标志BCR-ABL融合基因。

CML是一种造血系统的恶性增殖性疾病，其全球发病率是1.6/10万人，我国的发病率为0.39-0.55/10万人，本病可见于各年龄组，我国CML的患者较西方更为年轻化，西方国家的中位发病年龄是67岁，国内的几个地区的流行病调查显示CML的中位发病年龄是45～50岁。男性高于女性，男女之比为3：2。

ALL是一种起源于淋巴细胞的B系或T系细胞在骨髓内异常增生的恶性肿瘤性疾病，其发病率约为0.67/10万。在油田、污染区发病率明显高于全国发病率。ALL儿童期(0～9岁)为发病高峰，可占儿童白血病的70％以上。ALL在成人中占成人白血病的20％左右。

伊马替尼(Imatinib)为代表的BCR-ABL抑制剂是治疗慢性髓细胞性白血病(CML)和Ph染色体阳性急性淋巴细胞白血病(Ph+ALL)的一线靶向药物，伊马替尼靶向治疗之后，中位生存期由原来3-4年延长到10年(见表1)。但如果治疗中BCR-ABL融合基因发生突变，则表现出治疗抗性。在TKI耐药或复发的患者中发现100多种BCR-ABL基因的突变，不同基因位点的突变所导致的耐药程度不同。当TKI的剂量增加或者更换第二代TKI时，临床上大多数的突变型患者对上述改变有效，但具有BCR/ABLT315I突变的患者对上述药物均无效。仅第三代Bcr-Abl激酶靶向抑制剂Ponatinib，对T315I突变型Bcr-Abl激酶具有高效特异性抑制作用。

以上事实表明，本项目将利用人类基因、遗传学及基因组学最新研究成果和当代生物技术的最新手段及仪器设备，开发一个用于检测与分析BCR/ABLT315I基因突变的试剂盒，对CML和Ph+ALL耐药性的筛查及临床科学用药具有重要的指导意义。

表1不同治疗手段进行比较

发明内容

本发明提供了人类BCR-ABL基因T315I突变检测与分析，提供了一种用于检测人类BCR-ABL基因T315I突变的试剂盒。

所述用于检测人类BCR-ABL基因T315I突变的试剂盒包括：

表2、试剂盒盒组成成分表