[发明专利]一种PCR仪校准用标准样品、构建方法以及应用方法在审
申请号: | 201811354947.7 | 申请日: | 2018-11-14 |
公开(公告)号: | CN110055314A | 公开(公告)日: | 2019-07-26 |
发明(设计)人: | 金荣愉;余笑波;孙杨 | 申请(专利权)人: | 杭州博度计量科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/686 | 分类号: | C12Q1/686;C12Q1/6806 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 310000 浙江省杭州市*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 标准样品 校准 制备 假阴性结果 计量特性 交叉污染 克隆载体 酶切位点 校准检测 常规的 核苷酸 假阳性 构建 可用 用时 无毒 保存 监测 试验 应用 安全 | ||
1.一种PCR仪校准用标准样品,其特征在于:所述一种PCR仪校准用标准样品由核苷酸(不仅限于)片段组成,加入常见酶切位点,插入到常规的克隆载体中制备而得,所述一种PCR仪校准用标准样品由特异的动植物及微生物基因序列组成。
2.一种PCR仪校准用标准样品的构建方法,其特征在于:一种PCR仪校准用标准样品的构建方法包括以下步骤:
(1)选取特异的动植物及微生物基因序列进行拼接,获得独一特异的基因序列;
(2)合成核苷酸片段;
(3)设计PCR特异性引物;
(4)PCR扩增;
(5)目标序列获取,并通过测序进行验证;
(6)将目标片段插入克隆载体中;
(7)通过PCR、酶切、测序等验证标准样品的准确性;
(8)对标准样品进行特异性、稳定性、均匀性进行检测;
(9)对标准样品进行特异性、稳定性、均匀性检测的结果进行分析。
3.一种PCR仪校准用标准样品的应用方法,其特征在于:一种PCR仪校准用标准样品的应用方法包括特异性引物探针序列、PCR反应体系、PCR反应程序。
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