[发明专利]一种特异性蛋白质组合物的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种药品的制备方法，具体说是针对被狂犬或其他疯动物咬伤、抓伤患者的被动免疫及预防破伤风杆菌感染的药品的制备方法。

背景技术

CN 105770890A公开了一种特异性蛋白质组合物，它主要是由人狂犬病免疫球蛋白和人破伤风免疫球蛋白混合组成，其制备方法是：人狂犬病免疫球蛋白和人破伤风免疫球蛋白分别独立制备获取，检定合格后再按规定的比例进行混合，制成特异性蛋白质组合物。该工艺的主要缺陷是，需要两次制备球蛋白的工艺。

发明内容

本发明要解决的技术问题是，提供一种人狂犬病免疫球蛋白和人破伤风免疫球蛋白同步制备的一种特异性蛋白质组合物的制备方法。

本发明的目的是这样实现的：

第一步是制备特异性免疫血浆：采用破伤风疫苗和狂犬病疫苗按各自的基础免疫程序，对同一供血浆者进行多次免疫；最后一次免疫后，待供血浆者产生相对应的特异性抗体后，采集血浆；再进行狂犬病抗体效价和破伤风抗体效价检测，将所有供血浆者的血浆合并后，狂犬病抗体效价不低于10IU/ml，破伤风抗体效价不低于4IU/ml，且狂犬病抗体效价值与破伤风抗体效价值之比是0.6-6：1之间，为特异性免疫血浆；

第二步是制备特异性蛋白质组合物：采用血液制品免疫球蛋白生产方法将第一步获得的特异性免疫血浆，制备成特异性蛋白质组合物；调整特异性蛋白质组合物的浓度，使得人狂犬病免疫球蛋白抗体效价不低于10IU/ml，人破伤风免疫球蛋白抗体效价不低于4IU/ml。

与分别制备人狂犬病免疫球蛋白和人破伤风免疫球蛋白再组合成特异性蛋白质组合物的方法相比，本发明的积极效果是：它将人狂犬病免疫球蛋白和人破伤风免疫球蛋白同步制备，使生产过程更简洁、成本更低廉。

具体实施方式

1.制备本发明

a：免疫用疫苗：符合中国药典要求的人用破伤风疫苗和冻干人用狂犬病疫苗。

b：供血浆者信息：供血浆者系发明者本人，身体健康、乙型肝炎病毒表面抗体阳性、性别：男、特异性免疫接种时，年龄：36周岁。

c：在第一步制备特异性免疫血浆时的特异性免疫接种：

首先用狂犬病疫苗在第1天（当天）、第4天、第8天、第15天和第29天各接种一次的暴露后免疫程序接种供血浆者；狂犬病疫苗免疫的当天再用破伤风疫苗按第1天和第29天各接种一次的免疫程序，对同一供血浆者进行免疫，其中将上述第29天称为最后一次免疫日；在最后一次免疫日后的第15、29、57、91天（含最后一次免疫日，下同），分四次对采集的血浆样品进行狂犬病抗体效价和破伤风抗体效价检测，其中第29天的检测，是优选的基础免疫程序。

当狂犬病抗体效价值与破伤风抗体效价值之比接近或等于2.5：1时，是优选的血浆采集时机。特异性蛋白质组合物的其它质量指标应符合《中国药典》关于特异性免疫球蛋白的规定。

d：特异性蛋白质组合物制备：

最后一次免疫日后的第29天，采集血浆，并采用血液制品免疫球蛋白生产工艺制备成特异性蛋白质组合物。采用低温乙醇蛋白分离法制备，经过纯化、超滤、除菌过滤后，根据原液狂犬病抗体效价值，用注射用水稀释原液至狂犬病抗体效价至100～200 IU/ml，并适当调整pH值及钠离子浓度。

2. 特异性免疫血浆、特异性蛋白质组合物质量检测

按照《中国药典》三部方法对最后一次免疫日的第15、29、57天、91天的血浆样品进行狂犬病抗体效价和破伤风抗体效价检测。，检测结果见下表1：

表1：不同取样时间特异性免疫血浆抗体效价检测结果表

按照《中国药典》三部方法对组合物进行外观、pH值、热稳定性、蛋白质含量、纯度、分子大小分布、抗体效价等关键质量指标进行检测，检测结果见下表2：