[发明专利]海兔毒素10类似物及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种海兔毒素10类似物及其制备方法，以苯丙氨酸盐酸盐为原料，分别经过多次重复的脱保护和酰胺缩合反应，得到五肽片段化合物，五肽片段化合物再经甲酯水解、保护基脱除，制备得到所述海兔毒素10类似物。本发明的制备方法成本低，操作方便，效率高。本发明化合物对癌症尤其是HCT‑116人结肠癌细胞具有更好的抑制效果，且具有毒性小，稳定性高的优点，为开发治疗结肠癌或其他类型癌症的抗癌药物提供了广阔的发展空间。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，涉及一类五肽化合物，特别涉及一类具有抗癌活性的海兔毒素10类似物及其制备方法和应用。

背景技术

海兔毒素10(dolastatin 10)是美国亚利桑那州立大学的Pettit教授课题组从印度洋的海洋软体动物Dolabella auricularia里分离提取出来的一种天然线性五肽。海兔毒素10对于多种肿瘤细胞如黑素瘤、小细胞肺癌、卵巢癌等都具有极强的抑制能力。但由于其太强的细胞毒性，在临床研究中出现了各种各样的副反应，故未能通过临床实验。人们通过对海兔毒素10的构效关系研究来进行结构修饰，期望能找到一个毒性更小的抗癌药物。

被称为“Auristatins”的一系列海兔毒素10的类似物相继被设计合成出来，其中，Miyazaki发现可以将海兔毒素10的N-端的甲基移除一个而不影响其活性，该化合物被命名为Auristatin D(MMAD)；Doronina报道了将MMAD结构里C-端的噻唑环用羧基代替，得到的化合物命名为Auristatin F(MMAF)，该化合物被应用到抗体药物偶联物(ADCs)中，目前正处于临床试验阶段。

海兔毒素10的N-端为伯胺时，则更有利于作为ADCs中药物分子与抗体的连接点。目前为止，一系列关于海兔毒素10的N-端结构修饰都只局限于移除其中一个甲基，同时移除两个甲基使得化合物的N-端为伯胺后，会发现其活性大大降低。

发明内容

本发明的目的是在MMAF的结构基础上，对化合物MMAD的N-端进行修饰，提供一系列新的海兔毒素10类似物，所述海兔毒素10类似物具有良好的抗肿瘤活性，尤其对HCT-116人结肠癌细胞具有较好的抑制活性，并且毒性小，稳定性高。本发明还提供了所述海兔毒素10类似物的制备方法，以苯丙氨酸盐酸盐为原料，分别经过四次重复的脱保护和酰胺缩合反应，得到五肽片段化合物，五肽片段化合物再经甲酯水解、保护基脱除，制备得到海兔毒素10类似物。该方法成本低，操作方便，效率高。

本发明提出的海兔毒素10类似物，由五个氨基酸组成，五个氨基酸的N-端氨基酸均为为L-缬氨酸，如L-缬氨酸、L-丝氨酸、L-丙氨酸、L-苯丙氨酸、L-亮氨酸、L-天冬氨酸，其结构如下式(1)所示：

其中，R为C1～C10的烷基，羟甲基、苯基、C1～C10取代的苯基，乙酰氨基、羧基、氨基、氨甲基。

优选地，R为异丙基、羟甲基、甲基、苯甲基、异丁基、乙酰氨基、羧基、氨基、正丁基、苯基、氨甲基。

进一步优选地，R为异丙基、羟甲基、甲基、苯甲基、异丁基、乙酰氨基。

进一步优选地，所述海兔毒素10类似物包括如下结构的化合物1a、1b、1c、1d、1e和1f：

本发明提出的海兔毒素10类似物的制备方法，包括以下步骤：

(1)四肽片段化合物(6)N-Boc-Val-Dil-Dap-Phe-OMe的合成

i)二肽片段化合物(3)N-Boc-Dap-Phe-OMe的合成