[发明专利]一种接种液组合物及利用其构建恶性胸腔积液来源异种移植瘤动物模型的方法

权利要求书

1.一种无菌接种液组合物在构建恶性胸腔积液来源异种移植瘤动物模型中的应用，所述无菌接种液组合物包含以下组分：Hank's平衡盐缓冲液，胎牛血清，基底膜基质胶，和ROCK蛋白抑制剂，其中所述基底膜基质胶选自Matrigel胶或Cultrex BME胶；所述ROCK蛋白抑制剂选自Thiazovivin、Y-27632、吡那地尔(Pinacidil)、法舒地尔(Fasudil)、Ripasudil、RKI-1447、GSK429286A，或它们的任意组合，并且其中所述Hank's平衡盐缓冲液为35-55体积份，胎牛血清为3-10体积份，基底膜基质胶为40-60体积份，并且ROCK蛋白抑制剂在所述接种液组合物中的终浓度为5-20uM；其中，所述恶性胸腔积液采集自临床患者。

2.一种构建恶性胸腔积液来源异种移植瘤动物模型的方法，包括以下步骤：

(a)采集临床恶性胸腔积液样本；

(b)富集所述恶性胸腔积液样本中的肿瘤细胞；

(c)使用无菌接种液组合物悬浮步骤(b)中富集的肿瘤细胞，所述无菌接种液组合物包含以下组分：Hank's平衡盐缓冲液，胎牛血清，基底膜基质胶，和ROCK蛋白抑制剂，其中所述基底膜基质胶选自Matrigel胶或Cultrex BME胶；所述ROCK蛋白抑制剂选自Thiazovivin、Y-27632、吡那地尔(Pinacidil)、法舒地尔(Fasudil)、Ripasudil、RKI-1447、GSK429286A，或它们的任意组合，并且其中所述Hank's平衡盐缓冲液为35-55体积份，胎牛血清为3-10体积份，基底膜基质胶为40-60体积份，并且ROCK蛋白抑制剂在所述接种液组合物中的终浓度为5-20uM；以及

(d)将如步骤(c)所述悬浮于无菌接种液组合物中的肿瘤细胞接种至实验动物，饲养动物至肿瘤形成，从而获得恶性胸腔积液来源的异种移植瘤动物模型。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤(b)中使用FX系统进行细胞富集。

4.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述实验动物为重症联合免疫缺陷(SCID)小鼠。

5.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述恶性胸腔积液样本来自肺癌、乳腺癌、淋巴瘤、或卵巢癌。

6.根据权利要求2-5任一项所述方法构建的动物模型在科研研究中的应用。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，所述应用选自药物筛选研究、药效学研究、药理学研究、患者响应性研究、基因特异性研究、生物标志物研究、和/或生物学机制研究。

8.如权利要求6所述的应用，其特征在于，所述动物模型在科研研究中的应用包括用于研究选自以下的基因型：EGFR20号外显子T790M突变、EGFR 21号外显子L858R突变、和/或ALK融合基因突变。