[发明专利]乌拉尔甘草、光果甘草、胀果甘草及其杂交品种的快速分子鉴定方法有效
| 申请号： | 201610036218.1 | 申请日： | 2016-01-20 |
| 公开（公告）号： | CN105543373B | 公开（公告）日： | 2018-12-07 |
| 发明（设计）人： | 叶敏;宋玮;冯金;季帅;乔雪;王瑛 | 申请（专利权）人： | 北京大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京万象新悦知识产权代理有限公司 11360 | 代理人： | 贾晓玲 |
| 地址： | 100191*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 乌拉尔 甘草 及其 杂交 品种 快速 分子 鉴定 方法 | ||
1. ndhC-trnV转录间隔区序列中的SNP（single nucleotide polymorphism，单核苷酸多态性）位点在鉴定胀果甘草、光果甘草中的应用，其特征在于：在ITS序列自5’端起第159位为T且第383-385位为CAA的前提下，ndhC-trnV转录间隔区序列自5’端起第487位为A时样品鉴定为光果甘草，自5’端起第487位为T时样品鉴定为胀果甘草；其中所述ITS序列为SEQID No.1/2、所述ndhC-trnV转录间隔区序列为SEQ ID No.3/4。
2.ndhC-trnV转录间隔区序列中的SNP位点在鉴定乌拉尔甘草与胀果甘草的杂交样品中的应用，其特征在于：在ITS序列自5’端起第159位为T和C共存，且第383-385位为CAA和TGC共存的前提下，ndhC-trnV转录间隔区序列自5’端起第487位为T时，样品鉴定为乌拉尔甘草与胀果甘草的杂交样品；其中所述ITS序列为SEQ ID No.1/2、所述ndhC-trnV转录间隔区序列为SEQ ID No.3/4。
3.胀果甘草、光果甘草、乌拉尔甘草与胀果甘草的杂交样品的鉴定方法，包括以下步骤：
1)以合适的方法提取待测样品DNA；
2)以待测样品DNA为模板，通过PCR扩增ITS序列和ndhC-trnV转录间隔区序列，其中所述ITS序列为SEQ ID No.1/2、所述ndhC-trnV转录间隔区序列为SEQ ID No.3/4；
3)对两段扩增产物分别进行测序分析：当ITS序列自5’端起第159位为T、第383-385位CAA，且ndhC-trnV转录间隔区序列自5’端起第487位碱基为A时，样品鉴定为光果甘草，鉴定结束；当ITS序列自5’端起第159位为T、第383-385位CAA，且ndhC-trnV转录间隔区序列自5’端起第487位碱基为T时，样品鉴定为胀果甘草，鉴定结束；当ITS序列自5’端起第159位为T和C共存、第383-385位CAA和TGC共存，且ndhC-trnV转录间隔区序列自5’端起第487位为T时，样品鉴定为乌拉尔甘草与胀果甘草的杂交样品，鉴定结束。
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