[发明专利]DNA标签、PCR引物及其应用

权利要求书

1.一组DNA标签，其包括SEQ ID NO：1-95所示的核苷酸。

2.一组PCR引物，其包括SEQ ID NO：96-119所示的核苷酸。

3.一组标签PCR引物，其是通过将权利要求1所述的一组DNA标签连接至权利要求2所述的一组PCR引物中的任意一种的5’末端而获得的。

4.一种构建核酸测序文库的方法，其特征在于，包括以下步骤：

将DNA样品进行多重PCR扩增，以便获得PCR扩增产物，其中所述多重PCR扩增采用权利要求3所述的一组标签PCR引物进行；以及

纯化回收所述PCR扩增产物，所述PCR扩增产物构成所述核酸测序文库。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，进一步包括：将所述核酸测序文库依次进行末端修复、3’末端添加碱基A、连接测序接头以及纯化回收连接产物的步骤。

6.一种用于确定DNA样品耳聋基因是否存在突变的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：

一组DNA标签，所述DNA标签包括SEQ ID NO：1-95所示的核苷酸；以及

一组PCR引物，所述PCR引物选自SEQ ID NO：96-119所示的核苷酸。

7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述耳聋基因为GJB2、GJB3、SLC26A4和12S rRNA的至少一种。

8.一种用于确定DNA样品耳聋基因是否存在突变的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒设置有权利要求3所述的一组标签PCR引物。

9.一种确定DNA样品耳聋基因是否存在突变的系统，其特征在于，包括：

文库构建装置，所述文库构建装置用于根据权利要求4所述的方法构建所述DNA样品的核酸测序文库；

测序装置，所述测序装置与所述文库构建装置相连，用于对所述核酸测序文库进行测序，以便获得测序结果；

分析装置，所述分析装置与所述测序装置相连，用于基于所述测序结果确定所述DNA样品耳聋基因是否存在突变；

其中，所述测序结果包括所述DNA样品的核酸测序文库的序列信息。

10.根据权利要求9所述的系统，其特征在于，所述测序装置选自Solexa、SOLID、单分子和454测序平台的至少一种。

11.根据权利要求9所述的系统，其特征在于，所述耳聋基因为GJB2、GJB3、SLC26A4和12SrRNA的至少一种。

12.根据权利要求9所述的系统，其特征在于，所述分析装置进一步包括比对单元，所述比对单元中设置有参考数据库，用于：

将所述DNA样品的核酸测序文库的序列信息与参考数据库进行比对；以及

基于比对结果，确定所述DNA样品耳聋基因是否存在突变。

13.根据权利要求9所述的系统，其特征在于，当所述DNA样品为多种，所述多种为2-95种时，

所述文库构建装置用于针对所述多种DNA样品的每一种，分别独立地根据权利要求4所述的方法构建所述DNA样品的核酸测序文库，并将所述多种DNA样品的核酸测序文库进行混合，以便获得核酸测序文库混合物，其中，不同的DNA样品采用相互不同的DNA标签；

所述测序装置用于对所述核酸测序文库混合物进行测序，以便获得测序结果，所述测序结果包括多种DNA样品的核酸测序文库的序列信息以及所述DNA标签的序列信息；以及

所述分析装置用于基于所述DNA标签的序列信息对所述多种DNA样品的核酸测序文库的序列信息进行分类，以便确定所述多种DNA样品的每一种的核酸测序文库的序列信息，并基于所述多种DNA样品每一种核酸测序文库的序列信息，分别确定所述多种DNA样品耳聋基因是否存在突变。

14.根据权利要求9所述的系统，所述分析装置进一步包括比对单元，所述比对单元用于：

将多种DNA样品的每一种的核酸测序文库的序列信息，分别与参考数据库进行比对；以及

基于比对结果，分别确定所述多种DNA样品耳聋基因是否存在突变。