[发明专利]一种DNA分子及其在制备糖尿病鼠模型中的应用

权利要求书

1.一种DNA分子，包括表达盒甲和表达盒乙，所述表达盒甲用于表达猪HSD11B1基因，所述表达盒乙用于表达CHOP基因和hIAPP基因；所述猪HSD11B1基因编码序列表的序列3所示的蛋白质；所述CHOP基因表达序列表的序列4所示的蛋白质；所述hIAPP基因编码序列表的序列5所示的蛋白质。

2.如权利要求1所述的DNA分子，其特征在于：所述猪HSD11B1基因如序列表的序列1自5’末端第3327-4205位核苷酸所示；所述CHOP基因如序列表的序列1自5’末端第7592-8095位核苷酸所示；所述hIAPP基因如序列表的序列1自5’末端第8180-8449位核苷酸所示。

3.如权利要求1或2所述的DNA分子，其特征在于：所述表达盒甲中，由PAPOE启动子启动所述猪HSD11B1基因的表达；所述表达盒乙中，由PIP启动子启动所述CHOP基因和所述hIAPP基因的表达。

4.如权利要求3所述的DNA分子，其特征在于：所述PAPOE启动子如序列表的序列1自5’末端第1675-3311位核苷酸所示；所述PIP启动子如序列表的序列1自5’末端第6102-7591位核苷酸所示。

5.如权利要求3所述的DNA分子，其特征在于：所述DNA分子自上游至下游依次包括如下元件：绝缘子、所述PAPOE启动子、所述猪HSD11B1基因、BGHpA加尾信号、所述绝缘子、所述PIP启动子、所述CHOP基因、F-2A序列、所述hIAPP基因、所述BGHpA加尾信号；所述绝缘子如序列表的序列1自5’末端第7-1674位核苷酸所示；所述PAPOE启动子如序列表的序列1自5’末端第1675-3311位核苷酸所示；所述BGHpA加尾信号如序列表的序列1自5’末端第4209-4433位核苷酸所示；所述PIP启动子如序列表的序列1自5’末端第6102-7591位核苷酸所示；所述F-2A序列如序列表的序列1自5’末端第8096-8179位核苷酸所示。

6.如权利要求5所示的DNA分子，其特征在于：所述DNA分子为如下(a)或(b)：(a)序列表的序列1自5’末端第7-8674位核苷酸所示的DNA分子；(b)序列表的序列1自5’末端第7-8832位核苷酸所示的DNA分子。

7.含有权利要求1至6中任一所述的DNA分子重组载体、表达盒或转基因细胞系。

8.如权利要求7所述的重组载体，其特征在于：所述重组载体为将pcDNA3.1(+)载体MulⅠ和NotⅠ酶切位点之间的小片段取代为所述DNA分子得到的重组质粒。

9.权利要求1至6中任一所述的DNA分子、权利要求7所述的重组载体或权利要求8所述的重组载体的应用，为如下(1)或(2)或(3)或(4)：

(1)制作糖尿病鼠模型；

(2)诱发小鼠发生胰岛素抵抗；

(3)制备用于制作糖尿病鼠模型的试剂盒；

(4)制备用于诱发小鼠发生胰岛素抵抗的试剂盒。

10.一种试剂，包括权利要求1至6中任一所述的DNA分子、权利要求7所述的重组载体或权利要求8所述的重组载体；所述试剂的用途为如下(1)或(2)或(3)或(4)：

(1)制作糖尿病鼠模型；

(2)诱发小鼠发生胰岛素抵抗；

(3)制备用于制作糖尿病鼠模型的试剂盒；

(4)制备用于诱发小鼠发生胰岛素抵抗的试剂盒。