[发明专利]一种提取高纯度海参多肽的方法

说明书

技术领域

本发明属于天然产物提取分离技术领域，具体涉及一种提取高纯度海参多肽的方法，即利用高速剪切技术、酶切技术和大孔树脂混合模拟移动床技术从海参中提取高纯度海参多肽的方法。

背景技术

海参(Sea cucumber)是棘皮动物门海参纲生物的总称，近年来，随着市场需求的持续升温，海参养殖业发展迅猛，目前，我国海参的年产量约14万吨，主要集中在山东沿海，山东省海参年产量为7万多吨，占全国海参产量的一半以上，养殖年产值即达160亿元，且每年还在以20%的增长速度在发展，海参养殖产业已成为山东省水产养殖支柱产业之一，在当地的水产养殖生产中占有举足轻重的地位。

海参有着悠久的历史，在中国，很多年前就被当作高级滋补品名列八珍之首；在大连，很多老人长久以来就保留着进补海参的习惯；在胶东，众海参商家旌旗飘舞；在内陆，更多的人开始了解海参；在广东，北方的海参供不应求。由于传统的粗加工而成的原生态海参食用起来比较繁琐，而且不易保鲜保质，此外，由于海参的特殊形态，在产品的运输和储藏上也有一定的问题。针对这种状况，海参生产企业推出了“精细加工”的策略：高压即食海参、海参罐头、冻干即食、海参粉胶囊、海参多肽、海参酒等一系列以海参为原料的海参新产品应运而生。在高新技术的支持下，这些新产品目标市场直指外埠。这些海参产品方便消费者食用，有很大的市场需求。就全国市场而言，精细加工的海参产品必将成为未来海参企业的主导方向。

海参含有丰富的蛋白质，是制备多肽的理想原料。海参多肽市场尚处萌芽阶段，目前主要应用于食品、保健品和化妆品等领域，随着研究的不断深入，海参多肽的应用领域不断加大，消费的上升潜力很大，产品价格未来将相对稳定。随着人民生活水平的提高，国内大中城市的高端消费群体对海参多肽产品的需求还在不断增加，海参多肽产品市场短期内尚供不应求。

目前，海参多肽的提取纯化工艺已经开始相关的研究，并取得了一定的研究成果。现阶段而言，海参多肽的提取纯化工艺主要通过膜过滤法，该方法基本工艺为：海参粉碎后，加入适量的酶进行酶解，酶解液进行膜过滤，得到一定分子量范围的物质。该方法优点是工艺简单，得到的多肽分子量区间相对集中，缺点是产品中含杂质太多，纯度不高，而且对滤膜的消耗量太大，成本较高。

海参多肽纯度高低，直接决定了产品的品质和用途。因此，制备高纯度的海参多肽成为本领域目前迫切需要解决的技术难题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种以海参为原料，针对现有技术中存在的缺陷和不足，结合高速剪切技术、酶切技术和大孔树脂混合模拟移动床技术从海参中纯化高纯度海参多肽，从而弥补现有技术的不足。

本发明的方法，包括以下步骤：

1）向处理后的新鲜海参或水发后的海参中加入去离子水粉碎，置入发酵罐中，然后向发酵罐中加入蛋白酶进行酶切，酶切后进行高温灭酶灭菌；

2）将灭酶灭菌后的海参酶解液冷却至室温后，离心，收集上清液，得海参多肽提取液；

3）将海参多肽提取液直接加入大孔吸附树脂柱进行反复多次吸附，流速为5～10BV/h（柱体积，简称BV），收集吸附残液；吸附结束后，用10～40BV的洗脱液进行洗脱，流速为5～10BV/h，收集洗脱液，并与吸附残液合并；将溶液干燥后得到海参多肽产品。

步骤1）中的粉碎方法为高速剪切机、均质机、胶体磨、匀浆机等中的一种或几种。

步骤1）中的蛋白酶为中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、无花果蛋白酶、风味蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、枯草杆菌中性蛋白酶中的一种或几种的复合酶。

步骤3）中大孔吸附树脂与海参多肽提取液的质量比为20:1～10，树脂柱径高比为1:4～1:12；

为了获得更好的分离效果，其中步骤3）中的大孔吸附树脂为混合树脂，其中AB-8：D101：LSA-21的质量比为2:1:1；

步骤3）中的洗脱液中乙酸乙酯：乙醇：水的体积比为0.5:1:98.5。

步骤3）中的干燥方法为喷雾干燥、微波干燥、真空干燥，鼓风干燥中的一种或几种。