[发明专利]一种生物凝固剂及其制作方法和应用

权利要求书

1.一种生物凝固剂，其特征是以面粉和黄浆水为原料，经80℃糊化，调节pH=6.0～6.4，经灭菌处理得灭菌培养基，每100mL灭菌培养基接种乳酸乳球菌乳酸亚种种子液9～15mL，在35～40℃条件下培养发酵50～70h，当pH变化到3.6时，即得生物凝固剂，面粉和豆腐黄浆水重量比为4～8:100。

2.根据权利要求1所述的一种生物凝固剂，其特征是面粉与黄浆水的重量比为6:100,80℃糊化后调节pH=6.2，灭菌处理后，每100mL灭菌培养基接种乳酸乳球菌乳酸亚种种子液12mL，在37℃培养59h，当pH=3.6时，即得生物凝固剂。

3.按照权利要求1或2所述的一种生物凝固剂的加工方法，其特征是依次按下列步骤加工：

（1）.按比例称取面粉和黄浆水，面粉和黄浆水重量比4～8:100，将面粉加入到黄浆水中，调匀，得面粉和黄浆水混合液；

（2）.将面粉—黄浆水混合液经80℃糊化5min，得糊化液；

（3）.调整糊化液pH=6.0～6.4，得自制培养基；

（4）.将自制培养基在121℃灭菌10～20min，冷却，得灭菌培养基；

（5）.按每100mL灭菌培养基接种乳酸乳球菌乳酸亚种种子液9～15mL，得发酵液；

（6）.发酵液在35～40℃条件下培养发酵59h，pH=3.6，即得生物凝固剂。

4.根据权利要求3所述的一种生物凝固剂的加工方法，其特征是：

  （1）.面粉和黄浆水重量比为6:100；

  （3）.调整糊化液pH=6.2；

  （5）.每100mL灭菌培养基接种乳酸乳球菌乳酸亚种种子液12mL。

5.根据权利要求3或4所述的一种生物凝固剂的加工方法，其特征是乳酸乳球菌乳酸亚种种子液的制备是在100mL黄浆水中加4g葡萄糖，加入6mL经驯化的乳酸乳球菌乳酸亚种菌株，活菌数＞10⁶ CFU/mL，37℃培养24h。

6.根据权利要求5所述的一种生物凝固剂的加工方法，其特征是驯化乳酸乳球菌乳酸亚种菌株的方法依次按下列步骤进行：

①菌种活化：将乳酸乳球菌乳酸亚种标准菌株进行活化复壮，选择MRS肉汤培养基，培养条件为37℃，24h后测活菌数，4次继代培养即达到对数生长期活菌数＞10^６CFU/mL；

②乳酸乳球菌乳酸亚种菌株驯化：将已活化至第四代乳酸乳球菌乳酸亚种菌株，3%接种量接种到含有90%（v/v） MRS肉汤培养基、10%（ v/v）自制培养基的灭菌混合液中，37℃培养24h；观察在含有10%自制培养基中菌株的生长情况，并继续驯化；依次增加20%的自制培养基比例，最终使乳酸乳球菌乳酸亚种在100%自制培养基中24h达到对数生长期，活菌数＞10^６  CFU/mL。

7.按照权利要求1所述的一种生物凝固剂的应用，其特征是用本发明的生物凝固剂点浆制作豆腐。

8.根据权利要求1或3所述的一种生物凝固剂及其加工方法，其特征是用0.1mol/L盐酸溶液或0.1mol/L氢氧化钠溶液调整培养基的pH。