[发明专利]一种黑木耳液体菌种培养基及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及食用菌生产技术领域，尤指一种黑木耳液体菌种培养基及其制备方法。 

背景技术

目前市场已有两代食用菌发酵罐。第一代发酵设备为气升式发酵罐，可以在位灭菌，但管道、阀门等易存在死角，可靠性差，污染率高。第二代发酵设备则是以韩国、日本为代表的整体灭菌发酵罐，可靠性高，灭菌较彻底、杂菌污染率较低，但其操作麻烦，并且需要专用的大型灭菌设备，成本高，对环境条件要求也高。 

发酵罐的不断改进主要是解决两个难题，一是操作简便省事，且成本低，便于推广；二是灭菌更彻底，降低污染率。 

液体菌种不仅需要可靠性高、污染率低的发酵罐来做设施保障，同时还需要从自身基础——培养基方面下工夫来缩短培养时间，提高菌丝活性，降低风险成本。目前市场上主要采取一次投料法、高浓度的培养基来进行培养，3-5天才培养结束。而培养基浓度过高或过低都不利于菌丝体的生长，且培养时间越长污染几率越高，风险成本也越高。 

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供一种既灭菌彻底，又操作简便，同时只 需24-36小时即可培养结束的一种黑木耳液体菌种培养基及其制备方法。 

本发明是一种黑木耳液体菌种培养基，包括无菌水和营养液，所述营养液的成分和含量为每升培养基水溶液中含：土豆30g、麸皮5g、红糖12g、白糖8g、KH₂PO₄2g、MgSO₄1g、蛋白胨1g、VB₁0.1g、泡敌0.04ml。 

本发明是一种黑木耳液体菌种培养基的制备方法，包括以下步骤： 

(1)向灭好菌的发酵罐内加入占培养基量90％的清水，制作无菌水； 

(2)按照权利要求1所述的组份配比，制作营养液，分装到适量的三角瓶中再放入高压灭菌器中灭菌； 

(3)营养液分批量添加，将分装到三角瓶中的营养液分批量添加到无菌水中。 

本发明一种黑木耳液体菌种培养基的制备方法，所述步骤(1)无菌水的制作方法为：使压力达到0.12Mpa时，维持30分钟，然后关闭排气阀，闷罐20分钟，再通过冷却使无菌水降至30℃以下，并通过通入无菌气体使罐体保持正压0.02-0.06Mpa。 

本发明一种黑木耳液体菌种培养基的制备方法，所述步骤(2)营养液的制作方法包括以下步骤： 

步骤1：制作土豆汁液； 

步骤2：选取无霉变且能通过40目筛网的细麸皮或者将麸皮直接再粉碎使用，标准是能通过40目筛网； 

步骤3：按照培养基量120ml/L的比例取水，将称好的麸皮加入水中大火加热，开锅后，文火煮10分钟，再将榨好的土豆汁液边搅拌边加入麸皮水中，待溶液再次开锅后，文火煮3-5分钟，然后分装到三角瓶中，按培养基量0.04ml/L的比例滴加泡敌，并用棉塞封口，用牛皮纸和绳包裹好瓶口； 

步骤4：红糖、白糖均按培养基量的10ml/L的比例取水融化，然后分装到三角瓶中，按培养基量0.008ml/L的比例滴加泡敌，然后用棉塞封口，并用牛皮纸和绳包裹好瓶口； 

步骤5：蛋白胨按培养基量的4ml/L的比例量取水融化，并将VB₁溶解于蛋白胨水溶液中，再分装到三角瓶中，按培养基量0.002ml/L的比例滴加泡敌，然后用棉塞封口，并用牛皮纸和绳包裹好瓶口； 

步骤6：KH₂PO₄、MgSO₄按每升培养基6ml/L的比例取水融化，然后分装到三角瓶中，用棉塞封口，并用牛皮纸和绳包裹好瓶口； 

步骤7：将上述步骤3-步骤6分装好的营养液放入高压灭菌器中灭菌，当压力达到0.12Mpa时，维持60分钟，停止加热让高压灭菌锅自然冷却，直到包裹三角瓶的牛皮纸干时拿出，然后放入无菌室内自然冷却至常温。 

本发明一种黑木耳液体菌种培养基的制备方法，所述步骤(3)营养液分批量添加的方法包括如下步骤： 

步骤1：首先将灭好菌的营养液的50％加入到已制好的无菌水中，并加入占培养基量1％的摇瓶母钟，菌种则进入培养状态，恒温24-26℃； 

步骤2：培养18小时时则向培养罐中加入剩余的50％的营养液，继续进入恒温24-26℃培养状态。 

本发明一种黑木耳液体菌种培养基的制备方法，所述步骤(3)营养液分批量添加的方法：设置成输液形式在整个培养过程中即时向无菌水中添加。