[发明专利]一种筛选中等直链淀粉含量水稻的方法及其专用引物无效
申请号: | 201210361030.6 | 申请日: | 2012-09-26 |
公开(公告)号: | CN102912014A | 公开(公告)日: | 2013-02-06 |
发明(设计)人: | 游艾青;周雷;陈志军;马银花;陈少愚;杨国才;李三和;刘凯;胡刚;闸雯俊 | 申请(专利权)人: | 湖北省农业科学院粮食作物研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 武汉荆楚联合知识产权代理有限公司 42215 | 代理人: | 王健 |
地址: | 430064 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 筛选 中等 直链 淀粉 含量 水稻 方法 及其 专用 引物 | ||
1.一种辅助筛选中等直链淀粉含量水稻的引物,包含序列表中的4条核苷酸序列WxMF:CAACCCATACTTCAAAGGAACATC、WxMR:GGCGGTGATGTACTTGTCC、WxH:CTGGAGAAGGTGGAGTC和WxHR:GATCTTGAGATCAATTGTAACTCACGAT。
2.一种辅助筛选中等直链淀粉含量水稻的方法,以待检测水稻的基因组DNA为模板,用序列表中WxMF:CAACCCATACTTCAAAGGAACATC、WxMR:GGCGGTGATGTACTTGTCC、WxHF:CTGGAGAAGGTGGAGTCAT和WxHR:GATCTTGAGATCAATTGTAACTCACGAT的核苷酸序列的4条引物进行PCR扩增,检测扩增产物带型,如该待测水稻的扩增产物中有766bp的条带,则该待测水稻为候选中等直链淀粉含量水稻。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于所述PCR扩增体系为:水稻基因组DNA模板50ng,Taq DNA聚合酶1 U, 1.5μl 10×PCR缓冲液(100Mm Tris-HCl (pH8.3),500Mm KCl),25mM MgCl2 0.9ul,2.5 mmol each dNTPs 0.6ul,四条引物各0.2μΜ,最后用ddH2O补充反应体系至15μl。
4.根据权利要求2或3所述的方法,其特征在于所述PCR反应条件为:先95℃ 5min;随后95℃ 30sec,55℃ 30sec, 72℃ 40sec,共35个循环;然后72℃ 5min。
5.根据权利要求2或3所述的方法,其特征在于:所述检测扩增产物带型的方法是进行1.5%琼脂糖凝胶电泳。
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