[发明专利]琼脂培养基及其制作方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种琼脂培养技术领域，尤其是一种用于肠道致病菌的分离培养的琼脂培养基及其制作方法。

背景技术

市场上该产品使用的状况为目标菌菌落太小不利于观察，容易造成漏检现象。

发明内容

本发明的目的就是提供一种琼脂培养基及其制作方法，通过增加产品的营养物质，提高目标菌的检出率，解决目标菌菌落小的现象。

为了达到上述设计目的，本发明采用的技术方案如下：

一种琼脂培养基，其组成成分及质量数为：每1000ml营养液中：蛋白胨8-12g、乳糖9-11g、牛肉浸粉4-6g、琼脂13-17g、氯化钠4-6g、中国蓝0.025-0.035g、玫瑰红酸0.025-0.035g。

优选地，其组成成分及质量数为：每1000ml营养液中：蛋白胨10g、乳糖10g、牛肉浸粉5g、琼脂15g、氯化钠5g、中国蓝0.03g、玫瑰红酸0.03g。

优选地，所述营养液的主要成分为氨基酸、维生素、生长因子。

一种琼脂培养基的制作方法，包括以下步骤：

1)将蛋白胨10g、乳糖10g、牛肉浸粉5g、琼脂15g、氯化钠5g溶解在1000ml营养液中；

2)混匀后，加热煮沸充分溶解；

3)调节pH至7.3±0.1，加入中国蓝0.03g、玫瑰红酸0.03g。

4)加热至115℃，并保持15min，冷却至50℃左右，倾注到一次性无菌塑料平皿中；

5)无菌检验后在2℃-8℃环境中冷藏备用。

优选地，用1N-10N氢氧化钠或1N-10N盐酸溶液调节pH至7.3±0.1。

其原理为：工作原理：牛肉浸粉与蛋白胨在培养基中作为基础营养物质提供细菌生长所需的碳源和氮源，氯化钠维持体系渗透压平衡，乳糖为可发酵碳源，中国蓝和玫瑰红酸为指示剂，琼脂为凝固剂。

能分解乳糖的细菌在上面生长产酸使得其菌落的颜色呈蓝色，该培养基的选择性主要表现在细菌是否能利用乳糖产酸而使指示剂颜色发生改变，沙门氏菌和志贺氏菌属的细菌不能发酵乳糖，因此其菌落的颜色和培养基本色一致，呈半透明状，大肠菌群类的细菌能利用乳糖产酸，使得其菌落颜色呈蓝色。

本发明所述的琼脂培养基及其制作方法的有益效果是：目标菌的单个菌落大小得到了改善，同比国内外同类产品，单个菌落的大小比同类产品的大50％，使目标菌更加容易观察，解决了漏检的问题。菌落大小优胜于国内外同类产品；标本判读结果的时间比同类产品更短。

具体实施方式

实施例1、

一种琼脂培养基，其组成成分及质量数为：每1000ml营养液中：蛋白胨8g、乳糖9g、牛肉浸粉4g、琼脂17g、氯化钠6g、中国蓝0.035g、玫瑰红酸0.035g。

实施例2

一种琼脂培养基，其组成成分及质量数为：每1000ml营养液中：蛋白胨12g、乳糖11g、牛肉浸粉6g、琼脂13g、氯化钠4g、中国蓝0.025g、玫瑰红酸0.025g。

实施例3

一种琼脂培养基，其组成成分及质量数为：每1000ml营养液中：蛋白胨10g、乳糖10g、牛肉浸粉5g、琼脂15g、氯化钠5g、中国蓝0.03g、玫瑰红酸0.03g。

上述实施例中，所述营养液的主要成分为氨基酸、维生素、生长因子。

实施例4

一种琼脂培养基的制作方法，包括以下步骤：

1)将蛋白胨12g、乳糖11g、牛肉浸粉6g、琼脂13g、氯化钠4g溶解在1000ml营养液中；

2)混匀后，加热煮沸充分溶解；

3)调节pH至7.3±0.1，加入中国蓝0.035g、玫瑰红酸0.035g。

4)加热至115℃，并保持15min，冷却至50℃左右，倾注到一次性无菌塑料平皿中；

5)无菌检验后在2℃-8℃环境中冷藏备用。

实施例5

一种琼脂培养基的制作方法，包括以下步骤：

1)将蛋白胨8g、乳糖9g、牛肉浸粉4g、琼脂17g、氯化钠6g溶解在1000ml营养液中；

2)混匀后，加热煮沸充分溶解；

3)调节pH至7.3±0.1，加入中国蓝0.025g、玫瑰红酸0.025g。

4)加热至115℃，并保持15min，冷却至50℃左右，倾注到一次性无菌塑料平皿中；

5)无菌检验后在2℃-8℃环境中冷藏备用。

实施例6

一种琼脂培养基的制作方法，包括以下步骤：