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[发明专利]一种溶解包涵体蛋白的方法-CN201410070556.8有效
发明人：熊思东;齐兴梅 -专利权人：苏州大学
申请日： 2014-02-28 - 公布日： 2014-06-04 - 主分类号： C07K1/14 文献下载
摘要：本发明一种溶解包涵体蛋白的方法，将表达包涵体蛋白的菌体离心收集，离心菌体用PBS重悬，加入溶菌酶室温1-3小时后经超生破碎，然后离心弃掉上清得到包涵体蛋白沉淀；将所述的包涵体蛋白沉淀重悬于IBbuffer中，然后离心，弃掉上清，重复1-6次洗涤包涵体蛋白；用含有尿素的PBS重悬洗涤后的包涵体蛋白；然后将包涵体蛋白悬液冷冻；将冷冻的包涵体蛋白悬液置于室温，缓慢溶解，然后离心，上清即为可溶的包涵体蛋白。本发明的方法操作简单，得到的包涵体蛋白溶液含有较低浓度的变性剂，简化了复性步骤，节约了时间，提高了蛋白复性效率。
一种溶解包涵蛋白方法

[发明专利]与调控蛋白PhaR相关物质的新用途-CN201310126407.4有效
发明人：陈国强;刘明明;马红坤 -专利权人：清华大学
申请日： 2013-04-12 - 公布日： 2013-07-24 - 主分类号： B01F3/08 文献下载
摘要：本发明公开了与调控蛋白PhaR相关物质的新用途。该新用途为与调控蛋白PhaR相关物质在制备油水乳状液中的应用，所述与调控蛋白PhaR相关物质为A1-A6中的任一种：所述A1为由调控蛋白PhaR包涵体、PHA合成酶PhaC包涵体和PHA降解酶PhaZ包涵体组成的产品；所述A2为由所述调控蛋白PhaR包涵体和所述PHA合成酶PhaC包涵体组成的产品；所述A3为所述调控蛋白PhaR包涵体和所述PHA降解酶PhaZ包涵体组成的产品；所述A4为由所述调控蛋白PhaR包涵体；所述A5为由调控蛋白PhaR和PHA合成酶PhaC组成的产品；所述A6为所述调控蛋白PhaR。
调控蛋白 phar 相关物质用途

[发明专利]一种大肠杆菌包涵体复性的方法-CN201010139322.6无效
发明人：王志超 -专利权人：上海瑞基生物科技有限公司
申请日： 2010-04-02 - 公布日： 2010-08-25 - 主分类号： C07K1/14 文献下载
摘要：本发明涉及涉及的是生物工程下游蛋白质纯化领域，具体涉及大肠杆菌蛋白表达形成包涵体的复性方法，其特征在于具体的工艺步骤如下：(1)包涵体蛋白的收集，4℃ 5000rpm/min 6min离心收集菌体，将菌体超声破碎，4℃ 8000rpm/min 30min高速冷冻离心得到P003B蛋白包涵体；(2)包涵体的纯化，重悬包涵体于50mL洗涤缓冲液，溶解杂蛋白及其他杂质从而纯化P003B包涵体；(3)包涵体复性，在4℃，溶解的包涵体通过恒流泵，用复性缓冲液，缓慢稀释至缓冲液pH为8.0，并不断搅拌，本发明与现有技术相比，温和溶解方法保留了在包涵体形成过程中形成的蛋白质二级结构，提高了包涵体复性的效率，简化了复性的步骤，节约了时间，从而大大降低了重组蛋白生产的费用。
一种大肠杆菌包涵复性方法

[发明专利]一种包涵体蛋白的复性方法及用途-CN202211508289.9在审
发明人：杜新永;刘长太;李纪兆;陈磊;李晓娟 -专利权人：青岛润达生物科技有限公司
申请日： 2022-11-28 - 公布日： 2023-05-30 - 主分类号： C07K1/113 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种包涵体蛋白的复性方法及用途。一种包涵体蛋白的复性方法，包括：将包涵体蛋白溶于NTA Buffer溶液中，超声促进杂蛋白的溶解；用6 M的盐酸胍溶液溶解包涵体蛋白，将溶解的包涵体蛋白用3M的盐酸胍进行2倍体积稀释，逐滴滴入复性液进行复性48 h；利用PEG 20000将复性后的液体进行100倍浓缩即可得到可溶性蛋白。本发明采用蛋白复性的方法将表达量较高的包涵体蛋白进行纯化、溶解和复性，得到纯度较高的可溶性蛋白，能保证抗原的有效性。
一种包涵蛋白复性方法用途

[发明专利]一种重组人IL2包涵体纯化复性方法-CN202211371272.3在审
发明人：李昆鹏;易红飞;高宇;陈颖;陈金林 -专利权人：武汉翌圣生物科技有限公司
申请日： 2022-11-03 - 公布日： 2023-04-04 - 主分类号： C07K14/55 文献下载
摘要：本发明公开了一种重组人IL2包涵体纯化复性方法，其步骤包括：收集大肠杆菌表达的人IL2包涵体蛋白并洗涤；用缓冲液E溶解包涵体蛋白，向溶解的包涵体蛋白中加入缓冲液F稀释包涵体蛋白，离心收集沉淀；用缓冲液G重新溶解包涵体蛋白；人IL2包涵体蛋白柱上复性：用缓冲液H平衡Q柱，将获得的人IL2包涵体蛋白上样；缓冲液H洗杂；100％缓冲液I到100％缓冲液J的浓度梯度过柱复性，缓冲液K进一步柱上复性；100％缓冲液L到100％缓冲液M的浓度梯度线性洗脱；将洗脱后的人IL2复性蛋白透析，超滤浓缩，得到成品。本发明方法可以有效提高人IL2包涵体复性效率，采用本发明的方法，其包涵体复性效率达到60％。
一种重组 il2 包涵纯化复性方法

[发明专利]包涵体蛋白的复性方法-CN202310122826.4在审
发明人：修朝阳;张强;陈英华;高强;郑保富 -专利权人：合肥欧创基因生物科技有限公司
申请日： 2023-02-16 - 公布日： 2023-04-04 - 主分类号： C07K1/16 文献下载
摘要：本发明公开了包涵体蛋白的复性方法，涉及生物医药技术领域。本发明包括如下步骤：S1：获取包涵体，包涵体洗涤、溶解、过滤，获得含有包涵体蛋白的变性液；S2：蛋白纯化；S3：蛋白浓缩；S4：透析；S5：分子筛柱对透析液洗脱纯化，得到复性蛋白。解决现有的包涵体复性方法操作繁琐，易形成无活性聚集体的问题。本发明公开的复性方法针对二硫键小于等于2个的蛋白进行复性，具有复性效率高、适用于大多数的包涵体蛋白的优点。
包涵蛋白复性方法

[发明专利]用于蛋白质重折叠的方法和系统-CN201280068811.4无效
发明人： M.西菲尔特;E.戈梅斯 -专利权人：巴罗福尔德股份有限公司
申请日： 2012-12-03 - 公布日： 2014-10-01 - 主分类号： A23J1/00 文献下载
摘要：本发明提供用于产生重组蛋白，且特别是用于从包涵体产生重组蛋白的方法和系统。例如，在一个方面，所述方法包括提供包含包涵体的蛋白质制剂，制备包涵体分散液，以及在压力容器中使所述蛋白质制剂暴露于高压，以使所述包涵体蛋白解聚并重折叠。
用于蛋白质折叠方法系统

[发明专利]一种利用GEM纯化包涵体的方法-CN201810897135.0在审
发明人：周志江;赵芳坤;杜仁鹏;韩烨;肖华志;宋巧智;曹硕 -专利权人：天津大学
申请日： 2018-08-08 - 公布日： 2019-01-11 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用GEM纯化包涵体的方法，构建重组蛋白与AcmA融合蛋白表达载体，诱导表达得到重组蛋白大部分以包涵体形式存在，利用8M尿素溶解包涵体，利用GEM将溶解的重组蛋白从尿素中吸附分离，然后进行复性该方法可以利用简单易得的GEM从尿素溶解的包涵体中分离纯化带有AcmA的重组蛋白，并且具有良好的蛋白回收效率，同时可以简化包涵体复性过程，简化操作，降低酶活损失。
包涵体重组蛋白尿素溶解包涵体复性表达载体蛋白回收分离纯化融合蛋白诱导表达复性构建酶活吸附尿素溶解

[发明专利]一种获取基因重组包涵体粗蛋白的方法-CN201010202204.5无效
发明人：陈显久;张天光;解军;牛勃;赵荣瑞 -专利权人：山西医科大学
申请日： 2010-06-13 - 公布日： 2010-11-10 - 主分类号： C07K1/14 文献下载
摘要：本发明公开了一种获取基因重组包涵体粗蛋白的方法，属于生物化学与分子生物学领域，是为了解决现有包涵体纯化法存在的提纯效率低的问题。包括获取含有基因重组包涵体粗蛋白表达菌的菌体沉淀；超声、裂解缓冲液洗涤；尿素洗涤；脱氧胆酸纳洗涤。本发明利用基因重组包涵体粗蛋白的抗剪切、属于变性蛋白的特性，建立一种获取基因重组包涵体粗蛋白的方法，使用该方法可大量减少其他非目的蛋白的混杂，包涵体粗蛋白纯度由25％左右升高到80％以上，为进一步目的蛋白的纯化奠定基础
一种获取基因重组包涵蛋白方法

[发明专利]一种膜蛋白的制备方法-CN201910590163.2在审
发明人：杜飞 -专利权人：浙江百研生物医药科技有限公司
申请日： 2019-07-02 - 公布日： 2019-10-08 - 主分类号： C07K1/14 文献下载
摘要：本发明提出了一种膜蛋白的制备方法，具体包括以下步骤：S1.用变性剂溶解包涵体，形成膜蛋白包涵体溶液；S2.将膜蛋白包涵体溶液混入脂立方样品，形成含膜蛋白包涵体溶液的脂立方样品；S3.向含膜蛋白包涵体溶液的脂立方样品中加入变性剂，形成水化度为40％的脂立方样品；S4.向脂立方样品中加入膜蛋白洗脱液，形成含有复性膜蛋白的脂立方样品。本发明首次实现了在脂立方样品中直接进行膜蛋白包涵体的复性，无需引入任何去垢剂，使获得的膜蛋白能更大程度地保留天然构象，为此后的晶体学和其他相关研究提供有力支持。
膜蛋白包涵体变性剂复性制备天然构象去垢剂水化度洗脱液混入溶解引入保留研究

[发明专利]一种重组蛋白包涵体复性与纯化的方法-CN202211453847.6在审
发明人：朱克骏;肖文俊;陈京生;王世玲;屈帅杰;来晓东;江秋虹;陶立峰 -专利权人：安徽智飞龙科马生物制药有限公司;重庆智飞生物制品股份有限公司;北京智飞绿竹生物制药有限公司
申请日： 2022-11-18 - 公布日： 2023-03-07 - 主分类号： C07K1/18 文献下载
摘要：本发明涉及一种重组蛋白包涵体复性与纯化的方法，通过在包涵体复性液中添加精氨酸提高复性后蛋白的稳定性，同时，调整稀释复性中的精氨酸浓度、静置时间、浓缩倍数等工艺参数，进一步提升变性包涵体蛋白的复性效果，提高所述方法中变性包涵体蛋白复性得率和最终蛋白得率
一种重组蛋白包涵复性纯化方法

[发明专利]制备无融合标签包涵体蛋白纳米颗粒的方法-CN201610529226.X有效
发明人：熊思东;齐兴梅 -专利权人：苏州大学
申请日： 2016-07-07 - 公布日： 2019-12-13 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明涉及一种制备无融合标签包涵体蛋白纳米颗粒的方法，包括以下步骤：将自发断裂蛋白质内含子的C端与目的蛋白基因融合，N端与增强目的蛋白表达的标签蛋白融合，得到融合蛋白编码基因；将融合蛋白编码基因在大肠杆菌中诱导表达，通过自发断裂蛋白质内含子的C端自发断裂，释放所述目的蛋白，形成包涵体蛋白；将大肠杆菌细胞破碎，离心，弃掉上清液，得到无融合标签包涵体蛋白纳米颗粒。本发明解决了在包涵体蛋白颗粒水平上实现标签蛋白的移除，填补了制备无标签包涵体蛋白纳米颗粒的技术空白，并且蛋白质内含子的自发断裂在大肠杆菌体内完成，后处理简单。
制备融合标签包涵蛋白纳米颗粒方法

[发明专利]新型冠状病毒重组蛋白包涵体的复性方法-CN202010243691.3在审
发明人：谢朋辉;贺建望;李明明;吴云;邵月 -专利权人：艾柏森（江苏）生物科技有限公司
申请日： 2020-03-31 - 公布日： 2020-07-17 - 主分类号： C07K1/113 文献下载
摘要：本发明公开一种新型冠状病毒重组蛋白包涵体的复性方法。本发明提供的新型冠状病毒重组蛋白包涵体的复性方法，通过将变性后的包涵体溶解产物过镍螯合柱后使用含变性剂且变性剂浓度梯度降低的复性液在常温下进行梯度洗脱来进行流动复性，不仅降低了成本，还显著缩短了新型冠状病毒重组蛋白包涵体复性所需要的时间，有利于在短时间以较低成本大规模对新型冠状病毒重组蛋白包涵体进行复性，且蛋白的回收率高、纯度高、稳定性强，有助于在短时间以较低成本获得大量高质量的新型冠状病毒蛋白用于新型冠状病毒检测和抗体制备。本发明提供的新型冠状病毒重组蛋白包涵体的复性方法适用于新型冠状病毒RBD重组蛋白包涵体或新型冠状病毒N重组蛋白包涵体的复性。
新型冠状病毒重组蛋白包涵复性方法

[发明专利]一种重组人成纤维细胞生长因子-21包涵体的纯化工艺-CN202010158981.8在审
发明人：郑诗雨;马金航;张铭浩;惠琦;何鑫 -专利权人：温州医科大学
申请日： 2020-03-09 - 公布日： 2020-09-04 - 主分类号： C07K14/50 文献下载
摘要：本发明公开了一种重组人成纤维细胞生长因子‑21包涵体的纯化工艺，包括以下步骤：(1)将菌体悬浮于粗提工作液中，加入溶菌酶进行搅拌和超声破碎，然后进行离心、洗涤沉淀得到包涵体；(2)将步骤(1)得到的包涵体溶解于变性溶液中得到包涵体溶液，然后将复性溶液加入包涵体溶液，搅拌均匀，得到复性后的包涵体溶液；(3)步骤(2)得到包涵体溶液采用Q柱进行分离，得到蛋白溶液；(4)步骤(3)得到的蛋白溶液采用Q柱进行浓缩，得到重组人成纤维细胞生长因子‑21蛋白。该纯化工艺可以获得重组人成纤维细胞生长因子‑21蛋白，并且该蛋白具有较高的纯度和活性。
一种重组纤维细胞生长因子 21 包涵纯化工艺

[发明专利]一种包涵体蛋白稀释透析复性的方法-CN201910237696.2有效
发明人：雍金贵;张伦 -专利权人：安徽环球基因科技有限公司
申请日： 2019-03-27 - 公布日： 2021-04-06 - 主分类号： C07K1/14 文献下载
摘要：本发明公开了一种包涵体蛋白稀释透析复性的方法，采用温和的变性方法溶解包涵体蛋白，保护包涵体蛋白中原有的二级结构不被破坏将大大有利于包涵体蛋白的复性；该方法集合了稀释及透析进行蛋白复性的方法，第一次稀释降低变性剂浓度，促进蛋白复性，第二次稀释降低添加剂浓度，使蛋白更容易适应基础缓冲液的环境，最后进行透析去除各种添加剂，可以得到复性效率高，浓度高的复性后蛋白。
一种包涵蛋白稀释透析复性方法

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