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[发明专利]一种提高原核包涵体表达复性率的复性液及其制备方法和应用-CN201610498793.3有效
发明人：彭延杰;曹强庚;庞广礼;李锋;梁邦领;林童俊 -专利权人：山东省妇幼保健院
申请日： 2016-06-29 - 公布日： 2019-08-23 - 主分类号： C07K7/06 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体为一种提高原核包涵体表达复性率的复性液及其制备方法和应用。本发明提供了一种优化后的复性液，该复性液可以使粗制品半抑制率比原来提高近一倍，显著提升了科研单位及生产企业的重组蛋白制品的制备效率与利润收益，该复性液的制备方法简单，适合规模化工业生产的需要。通过对HER2阳性乳腺癌靶向药物使用本发明的复性液及变复性方法进行生产，有效解决了TP25包涵体表达中复性效率低下问题，提高了复性液中活性蛋白的回收率。
一种提高包涵体表复性及其制备方法应用

[发明专利]一种产L-谷氨酸氧化酶重组菌株的构建方法及其应用-CN201310309739.6无效
发明人：刘立明;牛盼清;董晓翔 -专利权人：江南大学
申请日： 2013-07-23 - 公布日： 2013-11-13 - 主分类号： C12N15/76 文献下载
摘要：本发明阐述了一种产L-谷氨酸氧化酶重组菌株的构建方法及其应用，属于基因工程与酶学品领域，将重组产生的谷氨酸氧化酶包涵体进行蛋白变性、复性和浓缩，使30％的蛋白包涵体恢复活性，通过对重组酶的酶学性质研究，
一种谷氨酸氧化酶重组菌株构建方法及其应用

[发明专利]合成的人γ－干扰素基因（ｃＤＮＡ）在大肠杆菌中的高效表达-CN94112091.0无效
发明人：刘新垣 -专利权人：中国科学院上海生物化学研究所
申请日： 1994-03-29 - 公布日： 2001-01-17 - 主分类号： C12N15/23 文献下载
摘要：包含此种表达质粒的工程菌所产生的γ型干扰素可达到细菌可溶蛋白总量的６０—８０％。所产生的γ型干扰素浓集于包涵体中，分离包涵体，ＩＦＨ－γ纯度可达９０％。以后只经一步分子筛柱层析即可将ＩＦＨ－γ纯化到９６％以上纯度，比活数为２×１０7国际单位／ｍｇ蛋白。具有极高的生产价值。$#!
合成干扰素基因 cdna 大肠杆菌中的高效表达

[发明专利]可溶性牙鲆NPY重组蛋白获得方法-CN201510981570.8有效
发明人：谭训刚;李美洁;王倩;隋玉嫘;焦爽;吴志昊;尤锋 -专利权人：中国科学院海洋研究所
申请日： 2015-12-24 - 公布日： 2020-02-21 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明涉及可溶性牙鲆NPY重组蛋白，具体的说是一种可溶性牙鲆NPY重组蛋白获得方法。具体，构建NPY表达载体，表达载体重组表达，再经蛋白纯化、去内毒素、脱盐，而后于缓冲体系内，得可溶性的牙鲆重组NPY蛋白。本发明是大肠杆菌获得重组蛋白是可溶性的，避免了包涵体蛋白变性、复性过程，保证了蛋白的活性，优化了蛋白保存缓冲液，避免了纯化、去内毒素、脱盐后蛋白变性沉淀，维持了其可溶的状态，从而维持了其活性。
可溶性 npy 重组蛋白获得方法

[发明专利]一种α-淀粉酶AmyASS及其在生淀粉降解中的应用-CN201410005765.4有效
发明人：彭惠;王敏;陈茂娇;郑昀昀;高毅 -专利权人：安徽大学
申请日： 2014-01-06 - 公布日： 2014-04-09 - 主分类号： C12N9/28 文献下载
摘要：本发明公开了一种α-淀粉酶，该酶的基因序列如SEQ ID NO:2所示；该基因序列编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；该基因序列SEQ ID NO:2能够在大肠杆菌中成功的表达出包涵体形式的α通过本发明包涵体复性方法获得的α-淀粉酶，蛋白纯度达到85%以上，复性率达到50%以上；本发明α-淀粉酶可用于快速降解生淀粉，尤其适用于降解大米生淀粉。
一种淀粉酶 amyass 及其淀粉降解中的应用

[发明专利]可溶性人程序性死亡蛋白－1－IgV及其制备方法-CN200810017236.0有效
发明人：张英起;吴守振;王伟华;韩苇;包春杰;薛晓畅;李萌;秦鑫 -专利权人：中国人民解放军第四军医大学
申请日： 2008-01-04 - 公布日： 2008-07-09 - 主分类号： C07K14/705 文献下载
摘要：本发明公开了可溶性人程序性死亡蛋白－1－IgV及其制备方法，可溶性人程序性死亡蛋白－1－IgV的蛋白序列如下：PPTFFPAL LVVTEGDNAT FTCSFSNTSE SFVLNWYRMS PSNQTDKLAA本发明根据人PD－1的结构，应用人工合成的方法获得了hPD－1－IgV的基因，目的基因克隆入pQE－30原核表达载体，转化大肠杆菌，在大肠杆菌中高效表达，裂菌显示目的蛋白以包涵体形式存在，经包涵体洗涤、亲和层析、凝胶柱层析和透析复性，即可获得纯化的可溶性人程序性死亡蛋白－1－IgV。该可溶性人程序性死亡蛋白－1－IgV在体外shPD－1IgV在细胞水平和分子水平上可分别与mPD－L1/Fc和hPD－L1/Fc结合。在体内shPD－1IgV具有一定的抑瘤效果。
可溶性程序性死亡蛋白 igv 及其制备方法

[发明专利]一种固定化酶连续制备[14/15-CN202010327490.1有效
发明人：黄钢;李斌 -专利权人：上海健康医学院
申请日： 2020-04-23 - 公布日： 2023-05-23 - 主分类号： C12P13/10 文献下载
摘要：其方法是将包含固定化酶的融合蛋白悬浮于填充床反应器；再将包含[14/15N]‑L‑精氨酸的溶液在20‑55℃条件下，以流速0.3‑0.5BV/h流经填充床反应器进行反应本发明的技术构思是采用cipA固定化融合蛋白为载体将精氨酸脱亚胺酶arc固定于包涵体蛋白cipA上，产生具有催化活性的包涵体蛋白cipA‑arc，即cipA‑arc融合蛋白。本申请提供的具有催化活性的固定化cipA‑精氨酸脱亚胺酶cipA‑arc融合蛋白，能连续反应560小时以上；同时得到的具有同位素标记的[14/15N]L‑瓜氨酸
一种固定连续制备 base sup 14 15

[发明专利]重组禽传染性鼻炎疫苗及其制备方法-CN200980157652.3有效
发明人：坂元隆一;马场进;坂口正士;沟上宽 -专利权人：一般财团法人化学及血清疗法研究所
申请日： 2009-12-24 - 公布日： 2012-01-25 - 主分类号： A61K39/02 文献下载
摘要：提供用于制备重组禽传染性鼻炎疫苗的方法，该方法包括：构建可以产生包涵体形式的融合肽的大肠杆菌的步骤，所述融合肽由源自血清型A和血清型C的副鸡禽杆菌的外膜蛋白的肽组成；培养所述大肠杆菌并从培养物中收集并纯化包涵体的步骤；和制备包含所述的纯化的包涵体的制剂的步骤，以及提供包含作为活性成分的融合肽的禽传染性鼻炎疫苗。
重组传染性鼻炎疫苗及其制备方法

[发明专利]杀菌肽－X的发酵工艺-CN200610026829.4无效
发明人：沈益;劳学刚;张洪祖;徐贤秀 -专利权人：浙江医药股份有限公司新昌制药厂;南京大学
申请日： 2006-05-24 - 公布日： 2006-12-27 - 主分类号： C12P21/02 文献下载
摘要：本发明通过选择用于发酵的菌种种龄和优化培养基，使融合蛋白得到高表达，最终每升发酵液可获得包涵体5.05g，其中融合蛋白的含量＞80％。本发明是一种稳定、高表达并适于工业化生产的杀菌肽－X发酵工艺。
杀菌发酵工艺

[发明专利]一种TNFSF15可溶性蛋白的纯化方法-CN201610482906.0在审
发明人：李鲁远;张智松;高珊 -专利权人：南开大学
申请日： 2016-06-23 - 公布日： 2018-01-05 - 主分类号： C12P21/02 文献下载
摘要：本发明涉及一种TNFSF15可溶性蛋白的纯化方法，包括如下步骤(1).IPTG诱导；(2).菌体裂解；(3).上柱洗脱；(4).除盐分装。本发明纯化方案通过低温诱导的方式，并且以很低的IPTG诱导浓度，降低蛋白在包涵体中的表达，提升可溶性蛋白的含量，并用较为温和的裂解纯化方式，提高蛋白的稳定性和活性。
一种 tnfsf15 可溶性蛋白纯化方法

[发明专利]大肠杆菌可溶性表达载体的设计及其应用-CN99114002.8无效
发明人：华子春;杨杉;赵景晖 -专利权人：南京大学
申请日： 1999-01-05 - 公布日： 2003-06-04 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：一种新的大肠杆菌可溶性表达载体1.外源基因和大肠杆菌Thioredoxin(硫氧还蛋白)以多顺反子形式在常用大肠杆菌启动子控制下共表达；2.该表达载体显著改善外源基因在大肠杆菌中表达产物的可溶性，减少包涵体产物的形成；3.该表达载体能和其它相容性质粒共同使用，达到抑制泄漏表达或进一步改善表达产物可溶性等目的；4.其应用是解决目前大肠杆菌基因工程表达产物易形成包涵体的难题，对可溶的、具有生物活性的基因工程产品，尤其是基因工程多肽、蛋白质药物的生产具有实用价值。
大肠杆菌可溶性表达载体设计及其应用

[发明专利]一种重组全长人脑红素、其生产方法及其应用-CN200510059313.5无效
发明人：张成岗;王利红;高艳;王春丽 -专利权人：中国人民解放军军事医学科学院放射医学研究所
申请日： 2005-03-28 - 公布日： 2005-10-26 - 主分类号： C12P21/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种细菌表达生产重组全长人脑红素rhNGB的方法以及用该方法得到的重组全长人脑红素rhNGB，该方法包括将工程菌接种培养、细菌反复冻融、菌体裂解、包涵体裂解、层析纯化和目的蛋白复性等步骤。本发明是在构建人脑红素基因片段NSV并构建高效表达菌株的基础上，建立了一整套工程菌诱导表达、包涵体分离裂解、蛋白质复性纯化的工艺，从而获得了重组全长人脑红素纯品，并对重组全长人脑红素的生物学活性进行描述
一种重组全长人脑生产方法及其应用

[发明专利]融合蛋白SUMO1-PLA2及制备方法和医用用途-CN201510333868.8在审
发明人：艾永兴;于佩峰;邓晨;吴山力;郑海南;王梦云;赵程程;郝林琳;于浩;张玉静 -专利权人：吉林大学
申请日： 2015-06-17 - 公布日： 2016-05-04 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明提供一种融合蛋白SUMO1-PLA2及制备方法，本发明还提供了该SUMO1化融合蛋白的医用用途，解决了PLA2在大肠杆菌不溶性表达的技术难题；利用pColdTF冷诱导表达载体高效制备融合蛋白SUMO1-PLA2，克服现有方法中PLA2 蛋白表达量低、表达产物以包涵体形式存在给后续纯化带来诸多不便，以及表达产物的反应原性和免疫原性不如可溶性蛋白好等缺陷。
融合蛋白 sumo1 pla2 制备方法医用用途

[发明专利]融合蛋白SUMO3-PLA2及制备方法和医用用途-CN201510334750.7在审
发明人：艾永兴;于佩峰;邓晨;吴山力;郑海南;王梦云;赵程程;郝林琳;于浩;张玉静 -专利权人：吉林大学
申请日： 2015-06-17 - 公布日： 2016-05-04 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明提供一种融合蛋白SUMO3-PLA2及制备方法，本发明还提供了该SUMO3化融合蛋白的医用用途，解决了PLA2在大肠杆菌不溶性表达的技术难题；利用pColdTF冷诱导表达载体高效制备融合蛋白SUMO3-PLA2，克服现有方法中PLA2 蛋白表达量低、表达产物以包涵体形式存在给后续纯化带来诸多不便，以及表达产物的反应原性和免疫原性不如可溶性蛋白好等缺陷。
融合蛋白 sumo3 pla2 制备方法医用用途

[发明专利]一种重组人卵泡抑素蛋白的纯化方法-CN201611242334.5有效
发明人：雷振松;王勇波 -专利权人：德清知诺同丰生物科技有限公司
申请日： 2016-12-29 - 公布日： 2020-12-18 - 主分类号： C07K14/47 文献下载
摘要：本发明涉及一种基因工程新药‑重组人卵泡抑素蛋白的高效纯化方法。一种重组人卵泡抑素蛋白的纯化方法，该方法包括（1）菌体超声裂解，包涵体经过洗涤，用6M盐酸胍助溶；（2）利用6His标签，进行镍柱亲和层析；（3）利用DEAE Sepharose FF阴离子交换层析，得到高纯度重组人卵泡抑素蛋白本发明纯化蛋白得率高，蛋白纯度高，具有步骤简单，经济实用，便于大规模生产纯化的特点。
一种重组卵泡蛋白纯化方法