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[发明专利]全细胞生物转化制备L-2-氨基丁酸的方法-CN201410793186.0在审
发明人：郁庆明 -专利权人：郁庆明
申请日： 2014-12-20 - 公布日： 2015-04-22 - 主分类号： C12P13/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种全细胞生物转化制备L-2-氨基丁酸的方法。所述方法是：将苏氨酸脱氨酶和亮氨酸脱氢酶串联表达，克隆氯霉素抗性的表达载体上，实现二个酶在同一细菌中共表达；甲酸酶克隆到卡拉霉素抗性pET-28a载体上进行表达，和大肠杆菌中辅酶I代谢途径中限速步骤的pcnB基因串联表达，实现二个酶的高表达；将二种抗性的表达载体，转化到同一个细菌里进行共表达，实现了四个酶，在同一属主菌里的表达；用大肠杆菌发酵表达含有四种酶的大肠杆菌用全细胞，实现从苏氨酸到L-2-氨基丁酸的生物还原转化本发明使得在转化体系内，不需要添加辅酶就可以实现2-酮基丁酸的高效转化，成本低、方法简单。
细胞生物转化制备氨基丁酸方法

[发明专利]一种固定化微生物酶转化棘白菌素B的方法-CN201811500746.3在审
发明人：朱辉;易欣;曹艳茹;朱春燕;龙燕;莫洪;庞雪;包希臻 -专利权人：成都雅途生物技术有限公司
申请日： 2018-12-07 - 公布日： 2019-04-09 - 主分类号： C12P21/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种固定化微生物酶转化棘白菌素B的方法，属于生物工程领域，包括以下步骤：(1)犹他游动放线菌发酵，收集菌丝，利用细胞破碎仪，采用超声破碎的方法使细胞破碎，离心取上清液，得棘白菌素B脱酰酶的粗酶液；(2)向步骤(1)中的粗酶液中缓慢加入硫酸铵溶液，得沉淀；(3)将步骤(2)中的沉淀溶解于缓冲盐水溶液中；(4)向步骤(3)中加入海藻酸钠，搅拌均匀后滴加预冷的氯化钙水溶液，置于冰箱过夜，过滤得固定化微生物酶；(5)将棘白菌素B溶解乙醇中，并加入步骤(4)所述的固定化微生物酶，转化收集滤液，得棘白菌素B母核溶液。转化率高，转化时间短，产物易分离，转化液色素少，固定化酶易于保存且可重复使用。
棘白菌素B 固定化微生物粗酶液酶转化缓冲盐水溶液氯化钙水溶液生物工程领域硫酸铵溶液细胞破碎仪游动放线菌超声破碎沉淀溶解固定化酶海藻酸钠取上清液细胞破碎菌丝可重复易分离转化液色素乙醇滴加母核脱酰预冷转化沉淀发酵过滤溶解冰箱保存

[发明专利]一种微生物酶法转化白藜芦醇苷为白藜芦醇的方法-CN201110179324.2无效
发明人：林元山;庞一林;邹冬生;杨祖佑 -专利权人：林元山
申请日： 2011-06-29 - 公布日： 2012-04-11 - 主分类号： C12N1/14 文献下载
摘要：本发明提供一种从虎杖、花生壳、葡萄皮等植物材料中高效提取白藜芦醇苷及其类似物所用的微生物菌株棘孢曲霉（Aspergillus.aculeatusCGMCCNo.3876）及其发酵制备的复合酶；用所述菌株的复合酶酶法提取虎杖苷及其类似物用所述菌株的复合酶转化白藜芦醇苷（虎杖苷）为白藜芦醇的转化率达99.5%以上；从所述菌株的复合酶中纯化的虎杖糖苷水解酶，并转化98%的虎杖苷为白藜芦醇，转化率达99.7%。白藜芦醇纯度达98.5%。本发明为生产实际提供一种新型复合酶制剂，从根本上解决当前生产升级中酶催化活性不高，转化率低，时间过长，成本高的问题，促进生产实践应用。
一种微生物转化藜芦方法

[发明专利]一种青蒿原生质体高效分离及瞬时转化的方法-CN201811031518.6有效
发明人：唐克轩;马亚男;徐东北;刘航;吴张宽玉;付雪晴;钟旖珺;谢利辉;秦维;陈甜甜;王宇婷;孙小芬 -专利权人：上海交通大学
申请日： 2018-09-05 - 公布日： 2021-11-09 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种青蒿原生质体高效分离及瞬时转化的方法，包括：1)选取幼嫩青蒿叶片去除下表皮，得到除下表皮的青蒿叶片；2)将所述除下表皮的青蒿叶片置入酶解液中进行酶解，得到酶解混合液；3)将所述酶解混合液过滤离心得到原生质体沉淀，重悬后获得原生质体；4)将所述原生质体进行瞬时转化。本发明首次在青蒿中建立了原生质体分离及转化的方法，得到原生质体的产量为2.749×105个/g FW，活力为96％，绿色荧光蛋白的转化效率为80％，获得的原生质体产量大并且利用青蒿原生质体为受体进行转化，绿色荧光蛋白GFP、荧光素酶LUC及海参荧光素酶REN能够成功表达。
一种青蒿原生质体高效分离瞬时转化方法

[发明专利]β-葡萄糖苷酶在转化淫羊藿总黄酮制备宝霍苷I中的应用-CN201710333064.7有效
发明人：赵林果;裴建军;解静聪;赵顺懿;房仙颖;陈安娜 -专利权人：南京林业大学
申请日： 2017-05-12 - 公布日： 2020-10-13 - 主分类号： C12P19/60 文献下载
摘要：β‑葡萄糖苷酶在转化淫羊藿总黄酮制备宝霍苷I中的应用。该方法是利用一种特异的β‑葡萄糖苷酶定向转化淫羊藿总黄酮，使淫羊藿总黄酮中含量丰富的多个组分都转化为宝霍苷I。本发明筛选获得的一种β‑葡萄糖苷酶，不仅能高效地酶解淫羊藿总黄酮中富含的淫羊藿苷、朝霍定A、箭藿苷A制得宝霍苷I，而且能特异地将朝霍定B和箭藿苷B制得宝霍苷I。本发明酶使用成本低，只需一种酶；总黄酮的转化效率高，摩尔转化率大于95%。
葡萄糖苷酶转化淫羊藿黄酮制备宝霍苷中的应用

[发明专利]枯草芽孢杆菌的高丝氨酸脱氢酶基因灭活方法-CN201510052898.1在审
发明人：王升平;李丽立;张彬;范觉鑫;蒋国礼;刘刚;刘志强 -专利权人：中国科学院亚热带农业生态研究所
申请日： 2015-02-02 - 公布日： 2015-05-20 - 主分类号： C12N15/74 文献下载
摘要：一种枯草芽孢杆菌的高丝氨酸脱氢酶基因灭活方法，该方法包括以下步骤：构建用于同源重组的PCR产物的质粒，该重组质粒由pMD18-T载体、卡纳霉素抗性基因和高丝氨酸脱氢酶基因组成，其中，该同源重组的DNA片段含有用于替代待敲除基因的高丝氨酸脱氢酶基因以及在高丝氨酸脱氢酶基因中间部位插入的卡纳霉素抗性基因；从重组质粒上PCR扩增高丝氨酸脱氢酶基因以及在高丝氨酸脱氢酶基因中间部位插入的卡纳霉素抗性基因，使PCR产物单链化，通过电转化将所述单链PCR产物转化至枯草芽孢杆菌感受态细胞，得到转化子，并筛选出阳性转化子，即高丝氨酸脱氢酶基因灭活的突变株。本方法相对现有将高丝氨酸脱氢酶重组质粒转化枯草芽孢杆菌感受态细胞的技术，更为简单、省时。
枯草芽孢杆菌丝氨酸脱氢酶基因方法

[发明专利]一种提高羊骨粉酶解液中钙转化率和抗氧化性能的发酵方法-CN201711347281.8有效
发明人：韩克光;张浩;霍乃蕊;庞丰平;胡钰洁 -专利权人：山西农业大学
申请日： 2017-12-15 - 公布日： 2021-08-27 - 主分类号： C12P1/04 文献下载
摘要：本发明属生物发酵技术领域，为解决目前骨粉酶解液钙转化率低，多肽转化率低，利用度低的问题，提供一种提高羊骨粉酶解液中钙转化率和抗氧化性能的发酵方法。碱性蛋白酶酶解羊骨酶解液，驯化好的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)加入到制备好的羊骨酶解液中发酵，植物乳杆菌接种量为羊骨酶解液体积的4.0%‑4.5%，控制发酵温度为37‑37.5℃，pH值为5‑5.5，发酵12‑14h，得高钙转化率和抗氧化性能的发酵液。促进骨钙的转化和胶原短肽的生成并显著提高其体外抗氧化能力，短肽和钙离子反过来促进植物乳杆菌的繁殖，增强其益生功能，乳酸菌产生的维生素、胞外多糖等物质使羊骨酶解液更富营养。
一种提高骨粉酶解液中钙转化氧化性能发酵方法

[发明专利]清洁具有包含脂肪酸的污垢的表面的方法以及用于该方法的消费产品组合物-CN201880068168.2在审
发明人：胡安·埃斯特本·维拉斯克斯;丹尼斯·阿尔佛雷德·冈萨雷斯;让-吕克·菲利普·贝蒂诺;尼古拉斯·威廉·格里 -专利权人：宝洁公司
申请日： 2018-11-13 - 公布日： 2020-06-05 - 主分类号： C11D1/94 文献下载
摘要：本发明涉提供了一种清洁上面存在包含脂肪酸的污垢的表面的方法，所述方法包括使所述污垢与消费产品组合物接触，所述消费产品组合物包含表面活性剂和污垢转化酶，所述污垢转化酶选自氢过氧脂肪酸生成酶、氢过氧脂肪酸转化酶、多结构域酶、羟基脂肪酸生成酶、以及它们的混合物。所述方法还包括将所述污垢的所述脂肪酸转化为选自氢过氧脂肪酸、氢过氧脂肪酸衍生物、羟基脂肪酸、以及它们的混合物的活性脂肪酸衍生物物质。本发明还提供了消费产品组合物。
清洁具有包含脂肪酸污垢表面方法以及用于消费产品组合

[发明专利]一种细菌5α-还原酶及其应用-CN202211253947.4在审
发明人：申雁冰;王敏;夏梦雷;袁丛丛;苏振华;刘知宴;骆健美 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2022-10-13 - 公布日： 2023-04-18 - 主分类号： C12N9/02 文献下载
摘要：本发明涉及一种来源于大肠杆菌的新型5α‑还原酶基因及其应用，具体涉及通过基因工程技术和分子生物学手段获得表达该5α‑还原酶的重组表达菌株，以及该新型细菌5α‑还原酶在转化雄烯二酮(AD)到5α‑雄烷二酮(5α‑AD)的应用，属于酶的基因工程技术领域。本发明构建的包含该新型5α‑还原酶的重组表达菌株对转化AD生成5α‑AD具有很好的效果，大大缩短了底物转化的时间，提高了转化效率，在工业生产中具有较大的应用潜力。
一种细菌还原酶及其应用

[发明专利]用于生产化学品及其衍生物的组合物和方法-CN201580021486.X在审
发明人： S·卡博乌拉克斯;B·M·格里芬;K·V·马丁 -专利权人：合成基因组股份有限公司
申请日： 2015-03-20 - 公布日： 2017-02-15 - 主分类号： C12P7/58 文献下载
摘要：本发明提供用于生产一个或多个酶促途径的产物的方法。本发明方法中所用的途径包括一个或多个转化步骤，例如像古罗糖醛酸酶促转化为D‑葡糖二酸(步骤7)；5‑酮葡糖酸(5‑KGA)酶促转化为L‑艾杜糖醛酸(步骤15)；L‑艾杜糖醛酸酶促转化为艾杜糖二酸步骤7b)；以及5‑酮葡糖酸酶促转化为4，6‑二羟基2，5‑二酮己酸(2，5‑DDH)(步骤16)。所述方法包括酶促和化学转化两者作为步骤。还提供各种途径用于将葡萄糖转化为5‑脱氢‑4‑脱氧‑葡糖二酸(DDG)，并将葡萄糖转化为2，5‑呋喃二甲酸(FDCA)。所述方法还包括以高特异性和效率进行反应的工程化酶的用途。可产生的额外产物包括代谢产物，如但不限于古罗糖醛酸、L‑艾杜糖醛酸、艾杜糖二酸、葡糖二酸。
用于生产化学品及其衍生物组合方法

[发明专利]经纯化的蛋白质、重组DNA序列以及控制咖啡植物成熟的方法-CN97197242.7无效
发明人： J·I·斯迪勒司;I·默伊斯雅迪;K·R·纽潘 -专利权人：夏威夷大学
申请日： 1997-08-11 - 公布日： 1999-09-01 - 主分类号： C12N15/52 文献下载
摘要：纯化的蛋白质，编码表达该蛋白质的DNA序列，以及重组DNA分子，包括已被该分子转化以用来转化咖啡植物从而抑制乙烯合成中所必需的诸酶的表达的宿主。该DNA序列和重组DNA分子的特征在于它们编码表达ACC合成酶或ACC氧化酶，这两种酶是咖啡植物内乙烯生物合成途径中的要素。用含有编码表达相应mRNA的ACC合成酶和/或ACC氧化酶DNA序列的载体转化咖啡植物，所述mRNA与编码表达ACC合成酶和/或ACC氧化酶的mRNA反义。所产生的反义mRNA结合到XMImRNA上，由此使编码乙烯合成途径中的一种或多种酶的mRNA失活。所述DNA序列也可用来通过共抑制而阻遏ACC合成酶或ACC氧化酶的合成。每一事件的结果均是被转化植物不能合成乙烯，尽管未影响到这些植物的代谢的其它方面。
纯化蛋白质重组 dna 序列以及控制咖啡植物成熟方法

[发明专利]用于制备熊脱氧胆酸的方法-CN202080061324.X在审
发明人：詹卢卡·加尔迪;西尔维亚·拉帕乔利;罗伯托·韦尔加 -专利权人：艾希易股份公司
申请日： 2020-09-24 - 公布日： 2022-04-12 - 主分类号： C12N9/02 文献下载
摘要：描述了一种用于从脱氧胆酸(DCA)开始制备熊脱氧胆酸(UDCA)的化学‑酶促方法，所述化学‑酶促方法包括制备具有用于将脱氧胆酸(DCA)转化为熊胆酸(UCA)的高7β‑羟化酶活性的酶，所述转化是所述方法的第一步
用于制备脱氧胆酸方法

[发明专利]一种棕榈酸辅酶A的制备方法-CN201210554748.7有效
发明人：不公告发明人 -专利权人：北京利德曼生化股份有限公司
申请日： 2012-12-19 - 公布日： 2013-05-01 - 主分类号： C12P19/32 文献下载
摘要：本发明公开了一种制备棕榈酸辅酶A的方法，该方法包括（1）克隆编码乙酰辅酶A合成酶的基因并将其转化到大肠杆菌细胞中进行表达，获得表达乙酰辅酶A合成酶的基因工程菌株；（2）将基因工程菌株种子接入发酵初始培养基进行初始培养；（3）初始培养结束后，加入诱导补料培养基进行诱导培养产生乙酰辅酶A合成酶；（4）诱导培养结束后加入SDS进行预转化培养；流加转化补料培养基继续进行转化培养，得到棕榈酸辅酶A。本发明使用乙酰辅酶A合成酶重组菌，在温和的条件下，利用生物体本身所能够产生的ATP、辅酶A等物质，转化生产高附加值的棕榈酰辅酶A，其成本远低于现有的制备棕榈酸辅酶A的酶转化方法。
一种棕榈辅酶制备方法

[发明专利]一种葡萄糖异构酶突变体及其应用-CN201110406411.7有效
发明人：吴敬;陈晟;邓辉;陈坚 -专利权人：江南大学
申请日： 2011-12-08 - 公布日： 2012-05-09 - 主分类号： C12N9/92 文献下载
摘要：本发明公开了一种葡萄糖异构酶突变体及其应用，属于酶基因工程和酶工程领域。本发明由嗜热子囊菌(Thermobifida fusca)总DNA获得高温葡萄糖异构酶基因(NCBI编码：CP000088)，经定点突变后，葡萄糖异构酶基因以质粒pT7-7或能表达该酶的载体为表达载体，以E.coli BL21(DE3)或能表达该酶的菌株为表达宿主，实现高转化率葡萄糖异构酶基因的高效表达；该葡萄糖异构酶基因全长个1158核苷酸，编码385个氨基酸，本发明构建了表达质粒，转化细菌或酵母表达葡萄糖异构酶，所获得的重组酶突变体具有葡萄糖异构酶活性，在70℃条件下转化率为60％，比亲本的转化率高出7％。该重组葡萄糖异构酶的最适温度为80℃，最适pH＝10，70℃半衰期不低于30h。此酶非常适合食品工业生产F55高果糖浆应用的需要。
一种葡萄糖异构酶突变体及其应用

[发明专利]抗微生物组合物-CN201480080307.5有效
发明人： T·巴顿;J·布伦南;J·R·巴雷特;I·斯塔普勒斯 -专利权人：玛托克控股有限公司
申请日： 2014-04-30 - 公布日： 2020-06-30 - 主分类号： A01N37/04 文献下载
摘要：所述组合物包含能够转化底物以释放过氧化氢的酶和包括所述酶的底物的未精制的天然物质，诸如蜂蜜。在某些实施方案中，所述酶是纯化的酶。在其它实施方案中，所述底物缺乏过氧化氢酶活性，并且所述酶是除了可能存在于未精制的天然物质中的能够转化底物以释放过氧化氢的任何酶活性以外的酶。储存稳定的组合物不包括足以允许所述酶转化所述底物的游离水。
微生物组合