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[发明专利]一种D-阿洛酮糖3-差向异构酶固定化酶及其制备方法和应用-CN202211511552.X在审
发明人：柳新荣;费亚男;王炜清;赵宗培;邢志强 -专利权人：佳禾食品工业股份有限公司
申请日： 2022-11-29 - 公布日： 2023-03-17 - 主分类号： C12N11/08 文献下载
摘要：本发明提供一种D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶固定化酶及其制备方法和应用，D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶固定化酶包括酶载体、以及固定在所述酶载体上的D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶，所述酶载体为碳原子数为2～4的短链氨基树脂，所述D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶来自Rhizobium freirei。本发明提供的D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶固定化酶具有在弱酸条件下酶活高、制备D‑阿洛酮糖的周期短以及重复利用率高等优点。
一种阿洛酮糖差向异构固定及其制备方法应用

[发明专利]一种高活性的蔗糖异构酶及其应用-CN202111442626.4有效
发明人：丁雪峰;李帅杰;刘珊珊;周垠垠 -专利权人：南京诺云生物科技有限公司
申请日： 2021-11-30 - 公布日： 2023-08-11 - 主分类号： C12N9/90 文献下载
摘要：本发明涉及酶催化技术领域，尤其是一种高活性的蔗糖异构酶及其应用，该蔗糖异构酶氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。使用时，取蔗糖母液，加入PB、纯水，加入该蔗糖异构酶的粗酶液，30℃反应。其中，酶的最高底物浓度≤750g/L，底物：粗酶液投比≤200：1。本发明的高活性蔗糖异构酶比野生型蔗糖异构酶具有更高的底物浓度，更快的反应速度，投酶量低，可有效缩减成本；转化率高，大于90％。
一种活性蔗糖异构酶及其应用

[发明专利]一种高转化率的蔗糖异构酶及其应用-CN202111448646.2有效
发明人：丁雪峰;李帅杰;刘珊珊;周垠垠 -专利权人：南京诺云生物科技有限公司
申请日： 2021-11-30 - 公布日： 2023-09-19 - 主分类号： C12N9/90 文献下载
摘要：本发明涉及酶催化技术领域，尤其是一种高转化率的蔗糖异构酶及其应用，该蔗糖异构酶氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。使用时，取蔗糖母液，加入PB、纯水，加入该蔗糖异构酶的粗酶液，30℃反应。其中，酶的最高底物浓度≤700g/L，底物：粗酶液投比≤100：1。本发明的高转化率蔗糖异构酶比野生型蔗糖异构酶具有更高的底物浓度，更快的反应速度，投酶量低，可有效缩减成本；转化率高，大于95％。
一种转化蔗糖异构酶及其应用

[发明专利]用pHsh表达系统制备重组耐热性木糖/葡萄糖异构酶的方法-CN200710020315.2无效
发明人：邵志忠;裴建军;王一凡 -专利权人：邵蔚蓝
申请日： 2007-02-12 - 公布日： 2007-09-19 - 主分类号： C12N15/09 文献下载
摘要：一种重组耐热性木糖/葡萄糖异构酶的制备方法，其制法是：首先提取嗜热菌的基因组DNA，通过PCR扩增获得异构酶基因，将该基因插入基因表达载体pHsh，转化大肠杆菌获得异构酶表达质粒；其次是对基因进行诱变，改变密码子使用频次和mRNA的二级结构，得到优化的异构酶表达质粒；然后将异构酶表达质粒或优化的异构酶表达质粒转入大肠杆菌，得到基因工程菌，并通过热激诱导，使木糖/葡萄糖异构酶得到表达；最后收集细胞，破壁、离心后得到粗酶液，进一步纯化后得到纯度达90％的重组耐热性木糖/葡萄糖异构酶。本发明首次使用表达载体pHsh对嗜热菌的耐热性木糖/葡萄糖异构酶基因进行高效表达，应用该技术生产重组酶，产量超过200mg/L，稳定性好，易于工业化生产。
phsh 表达系统制备重组耐热性葡萄糖异构酶方法

[发明专利]一种木糖异构酶及其编码基因与应用-CN200810138563.1有效
发明人：鲍晓明;沈煜 -专利权人：河南天冠企业集团有限公司;山东大学
申请日： 2008-07-24 - 公布日： 2008-12-17 - 主分类号： C12N15/61 文献下载
摘要：本发明涉及一种木糖异构酶及其编码基因与应用，属酶基因工程技术领域。一种编码木糖异构酶的DNA序列，它是在纤维堆囊菌(Sorangium cellulosum)157－2中的木糖异构酶基因xylA(Genebank EU643621)的部分位点突变获得。以及该DNA序列所编码的酶及在化工、食品、医药领域的应用。本木糖异构酶比传统木糖异构酶在酿酒酵母中的活性提高了2.8倍。
一种木糖异构酶及其编码基因应用

[发明专利]一种基因工程技术制备共表达重组酶的方法-CN201310720225.X在审
发明人：王晓艳;门燕;冯俊敏;孙媛霞;张佩舜;朱玥明;康振奎;巩晋龙;郑丽萍;王小鹏;李奠础 -专利权人：山西天骄食业有限公司;中国科学院天津工业生物技术研究所;山西天骄生物集团有限公司
申请日： 2013-12-24 - 公布日： 2014-04-09 - 主分类号： C12N9/90 文献下载
摘要：本发明属于双酶共表达技术领域，具体涉及的是定点突变的葡萄糖异构酶和D-阿洛酮糖3-差向异构酶共表达；本发明为了克服现有技术的不足，提供一种对葡萄糖异构酶146位氨基酸定点突变，并与D-阿洛酮糖3-差向异构酶共表达的方法，具体为：将定点突变后的葡萄糖异构酶的核苷酸序列与D-阿洛酮糖3-差向异构酶核苷酸序列分别进行PCR扩增、纯化、克隆；将克隆得到的双酶核苷酸序列分别与pCDFDuet-1载体进行双酶切，酶切产物纯化连接，构建重组表达质粒，诱导表达得到重组菌，收集重组菌超声破碎得到含有双酶的粗酶液。
一种基因工程技术制备表达重组方法

[发明专利]一种生产木糖异构酶的方法-CN201210251839.3无效
发明人：张爱联;尹慧祥;易国辉 -专利权人：中国热带农业科学院热带生物技术研究所
申请日： 2012-07-09 - 公布日： 2012-10-24 - 主分类号： C12N9/90 文献下载
摘要：本发明公开了一种生产木糖异构酶的方法。属生物技术领域。首先克隆栖热菌、链霉菌和大肠杆菌的木糖异构酶基因；构建含以上三种木糖异构酶基因表达框架的毕赤酵母表达载体、酿酒酵母表达载体和枯草芽孢杆菌表达载体，并将载体分别转化相对应的宿主菌；分别筛选高表达木糖异构酶的重组子作为工程菌；发酵毕赤酵母工程菌、酿酒酵母工程菌和枯草芽孢杆菌工程菌生产重组混合木糖异构酶。与传统的由单基因编码的木糖异构酶不同，本发明生产的重组混合木糖异构酶的适合反应的温度和pH范围广，适合于多种用途；并且，含多基因表达框架的工程菌表达的木糖异构酶的产量明显高于含单基因的工程菌表达的木糖异构酶的产量
一种生产木糖异构酶方法

[发明专利]一种蔗糖异构酶的制备方法-CN201310142535.8无效
发明人：李宪臻 -专利权人：李宪臻
申请日： 2013-04-23 - 公布日： 2014-01-08 - 主分类号： C12N9/90 文献下载
摘要：本发明涉及一种细胞壁融合蔗糖异构酶的制备方法，其特点是采用超声波破碎技术，制备含有蔗糖异构酶活性的细胞壁融合酶作为催化剂，将蔗糖转化为异麦芽酮糖。包括以下步骤：1）将蔗糖异构酶生产菌在种子培养基中进行菌种活化；2）将活化菌种转种至发酵培养基中培养，进行蔗糖异构酶生产；3）超声波破碎蔗糖异构酶生产菌并收集破碎细胞，获得细胞壁融合蔗糖异构酶。采用本发明制备的蔗糖异构酶催化蔗糖转化时，蔗糖转化率为99.8wt%，转化产物中的异麦芽酮糖比例为88.39%，海藻酮糖为11.61%。
一种蔗糖异构酶制备方法

[发明专利]一种表面展示蔗糖异构酶蛋白重组芽孢及其制备和应用-CN202310817466.X在审
发明人：郭小宇;沈浩天;褚文杰;刘乐;李宪臻 -专利权人：大连工业大学
申请日： 2023-07-05 - 公布日： 2023-10-13 - 主分类号： C12N15/75 文献下载
摘要：本发明公开了一种表面展示蔗糖异构酶蛋白重组芽孢及其制备和应用。本发明利用枯草芽孢杆菌芽孢衣壳蛋白基因为分子载体，与蔗糖异构酶基因重组，构建融合表达的整合型重组质粒，并转化枯草芽孢杆菌得到枯草芽孢杆菌重组菌株，诱导重组菌株产生的芽孢表面展示蔗糖异构酶的重组芽孢。得到以枯草芽孢杆菌为生产菌株，基于“孢子展示”系统生产展示于孢子表面的蔗糖异构酶，固定化的蔗糖异构酶的酶活力为5.24±0.17*10‑14U/CFU，最适温度为40℃，最适pH为6.0，均与游离酶相同，表明将蔗糖异构酶展示于孢子表面后不会影响其酶学性质。该基于枯草芽孢杆菌“孢子展示”系统的蔗糖异构酶的固定化方法操作简单易行，成本低廉，为工业化应用提供参考。
一种表面展示蔗糖异构酶蛋白重组芽孢及其制备应用

[发明专利]一种Δ5-3-酮类异构酶基因、包含该基因的载体及其应用-CN201710564918.2有效
发明人：阳飞;彭飞;苏正定;贺一君;系祖斌;卢方欣;张华山;成细瑶 -专利权人：湖北共同生物科技有限公司
申请日： 2017-07-12 - 公布日： 2020-12-04 - 主分类号： C12N9/90 文献下载
摘要：本发明提供了一种异构酶转化植物甾醇的方法。一种Δ5‑3‑酮类异构酶及编码该酶的基因、Δ5‑3‑酮类异构酶的表达载体和利用该载体转化的重组微生物，如基因工程菌株，以及提供该Δ5‑3‑酮类异构酶的基因工程菌株的应用。
一种酮类异构酶基因包含载体及其应用

[发明专利]一种利用岩藻糖提高马来酸顺反异构酶酶活力的方法-CN201511033116.6有效
发明人：秦晴;许鹏;冯杰;杨为华;纪传侠;娄雯 -专利权人：安徽丰原发酵技术工程研究有限公司
申请日： 2015-12-31 - 公布日： 2018-12-14 - 主分类号： C12N9/90 文献下载
摘要：本发明涉及酶化学领域，具体公开一种利用岩藻糖提高马来酸顺反异构酶酶活力的方法，具体为在马来酸顺反异构酶参与的酶解反应体系中添加岩藻糖。本发明通过实验优化了岩藻糖的添加浓度，使最大程度的提高马来酸顺反异构酶的酶活力。本发明所述方法简单易行，在马来酸顺反异构酶反应过程中具有可以节约酶用量，提高反应效率的优点。
一种利用岩藻糖提高马来顺反异构活力方法

[发明专利]卡拉霉素作为拓扑异构酶Ⅱ抑制剂的应用-CN200910013989.9无效
发明人：秦松;张伟杰;李富超;丁玲;林丽萍;丁健 -专利权人：中国科学院海洋研究所
申请日： 2009-01-23 - 公布日： 2009-07-15 - 主分类号： A61K31/365 文献下载
摘要：本发明属于医药领域，具体涉及一种候选抗生素卡拉霉素作为拓扑异构酶II抑制剂的应用。卡拉霉素作为专一性拓扑异构酶II抑制剂的应用。卡拉霉素是作为一种抗生素进行开发利用，其可以作为一种拓扑异构酶II抑制剂类抗肿瘤药物，它不抑制拓扑异构酶I，是一种专一性的拓扑异构酶II抑制剂，其体外抑制拓扑异构酶II抑制剂的效果较VP16强十倍左右。本发明发现一种化合物作为新的拓扑异构酶II抑制剂类抗肿瘤药物的应用，药效较目前常用的拓扑异构酶II抑制剂强，可应用于医药工业。
卡拉霉素作为拓扑异构酶抑制剂应用

[发明专利]一种生物转化红枣单糖开发含阿洛酮糖功能性枣汁的技术-CN201310720292.1在审
发明人：王晓艳;门燕;冯俊敏;孙媛霞;张佩舜;朱玥明;康振奎;巩晋龙;郑丽萍;王小鹏;李奠础 -专利权人：山西天骄食业有限公司;中国科学院天津工业生物技术研究所;山西天骄生物集团有限公司
申请日： 2013-12-24 - 公布日： 2014-05-14 - 主分类号： C12P19/24 文献下载
摘要：本发明涉及双酶共表达技术及双酶偶联与固定化技术，具体涉及一种定点突变葡萄糖异构酶和D-阿洛酮糖3-差向异构酶共表达制备方法以及该双酶的偶联与固定化技术以及偶联固定双酶在红枣浓缩汁生产阿洛酮糖中的应用。为解决高热量糖给人们造成的健康问题，本发明提供了一种以红枣浓缩汁中D-葡萄糖、D-果糖作为底物，采用多酶偶联及固定化技术将重组酶葡萄糖异构酶、D-阿洛酮糖3-差向异构酶共固定化后双酶偶联促进生产低热量D-阿洛酮糖的方法；同时提供了对葡萄糖异构酶146位氨基酸定点突变，并与D-阿洛酮糖3-差向异构酶共表达的方法。
一种生物转化红枣单糖开发含阿洛酮糖功能性枣汁技术

[发明专利]一种高效诱导L-阿拉伯糖异构酶的方法-CN201210320390.1有效
发明人：季万兰;江波;沐万孟;李晓卉;丁美琴;刘炯;刘知远;韩晓明 -专利权人：江苏梁丰食品集团有限公司
申请日： 2012-08-31 - 公布日： 2013-01-23 - 主分类号： C12N9/90 文献下载
摘要：本发明涉及一种高效诱导L-阿拉伯糖异构酶方法，主要是在以乳糖操纵子质粒pET-22b(+)构建的L-阿拉伯糖异构酶重组菌表达目的蛋白诱导表达过程中，添加酶底物D-半乳糖，促进L-阿拉伯糖异构酶的有效折叠，高效诱导L-阿拉伯糖异构酶的活性表达，有效提高活性酶的表达量。本发明提高了以乳糖操纵子质粒pET-22b(+)构建的L-阿拉伯糖异构酶重组菌的活性L-阿拉伯糖异构酶的表达量与发酵酶活，从而可以大幅度降低L-阿拉伯糖异构酶的发酵生产成本；所得产品L-阿拉伯糖异构酶是一种新型糖酶
一种高效诱导阿拉伯糖异构酶方法

[发明专利]一种葡萄糖异构酶突变体及其应用-CN201110406411.7有效
发明人：吴敬;陈晟;邓辉;陈坚 -专利权人：江南大学
申请日： 2011-12-08 - 公布日： 2012-05-09 - 主分类号： C12N9/92 文献下载
摘要：本发明公开了一种葡萄糖异构酶突变体及其应用，属于酶基因工程和酶工程领域。本发明由嗜热子囊菌(Thermobifida fusca)总DNA获得高温葡萄糖异构酶基因(NCBI编码：CP000088)，经定点突变后，葡萄糖异构酶基因以质粒pT7-7或能表达该酶的载体为表达载体，以E.coli BL21(DE3)或能表达该酶的菌株为表达宿主，实现高转化率葡萄糖异构酶基因的高效表达；该葡萄糖异构酶基因全长个1158核苷酸，编码385个氨基酸，本发明构建了表达质粒，转化细菌或酵母表达葡萄糖异构酶，所获得的重组酶突变体具有葡萄糖异构酶活性，在70℃条件下转化率为60％，比亲本的转化率高出7％。该重组葡萄糖异构酶的最适温度为80℃，最适pH＝10，70℃半衰期不低于30h。此酶非常适合食品工业生产F55高果糖浆应用的需要。
一种葡萄糖异构酶突变体及其应用

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