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[发明专利]白芷原生质体高效瞬时转化的方法-CN202310606845.4在审
发明人：吴卫;赵琳;瞿文洁;徐东北;冯冬菊;陈靳松;胡朝勇;江美彦;杜宣;刘仁浪 -专利权人：四川农业大学
申请日： 2023-05-26 - 公布日： 2023-10-20 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明属于细胞生物学领域，具体涉及白芷原生质体高效瞬时转化的方法，包括以下步骤：S1、将待转化的外源基因DNA溶液和原生质体溶液进行混合；其中，外源DNA质粒的高纯度为吸光度值OD260/OD280＝1.6‑2.0，高浓度为0.5‑1.5μg/μl，外源基因DNA的用量为7.5‑12.5μg，原生质体溶液的浓度范围为2×104‑2×106个/mL；S2、将浓度为45‑55％的PEG‑Ca2+溶液加入步骤S1得到的混合液中，于20‑26℃黑暗条件下转化25‑35min；S3、往孵育转化后的混合液中加入W5溶液以终止转化，离心后去除上清液，再加入W5溶液将管底的原生质体重悬，进一步在24‑32℃条件下黑暗孵育14‑16h即可。本发明的瞬时转化方法周期短、操作便捷、效率高，弥补了传统遗传转化方式的缺点。
白芷原生质体高效瞬时转化方法

[发明专利]一种白芷原生质体高效分离的方法-CN202211629773.7在审
发明人：吴卫;瞿文洁;赵琳;徐东北;侯凯;冯冬菊;陈靳松;胡朝勇;江美彦;杜宣;刘仁浪;张嘉恒 -专利权人：四川农业大学
申请日： 2022-12-19 - 公布日： 2023-09-19 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明属于细胞生物学领域，具体涉及一种白芷原生质体高效分离的方法。包括以下步骤：S1、白芷的培养：选取含有3片以上基生叶的白芷进行黑暗培养，黑暗培养的时间为20‑60天；S2、原生质体材料的选择：选取步骤S1处理后白芷的黄化叶片作为原生质体材料；S3、原生质体的分离：将步骤S2得到的所述黄化叶片进行酶解，其中所述酶解使用的酶解液含有1.3‑1.7％的纤维素酶、0.6‑0.8％的离析酶和0.35‑0.45mol/L的甘露醇。经过本发明提供的分离的方法得到的白芷原生质体，具有产量高、细胞完整、杂质少，以及基因转化率高的特点。
一种白芷原生质体高效分离方法

[发明专利]一种青蒿原生质体高效分离及瞬时转化的方法-CN201811031518.6有效
发明人：唐克轩;马亚男;徐东北;刘航;吴张宽玉;付雪晴;钟旖珺;谢利辉;秦维;陈甜甜;王宇婷;孙小芬 -专利权人：上海交通大学
申请日： 2018-09-05 - 公布日： 2021-11-09 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种青蒿原生质体高效分离及瞬时转化的方法，包括：1)选取幼嫩青蒿叶片去除下表皮，得到除下表皮的青蒿叶片；2)将所述除下表皮的青蒿叶片置入酶解液中进行酶解，得到酶解混合液；3)将所述酶解混合液过滤离心得到原生质体沉淀，重悬后获得原生质体；4)将所述原生质体进行瞬时转化。本发明首次在青蒿中建立了原生质体分离及转化的方法，得到原生质体的产量为2.749×105个/g FW，活力为96％，绿色荧光蛋白的转化效率为80％，获得的原生质体产量大，活力高。并且利用青蒿原生质体为受体进行转化，绿色荧光蛋白GFP、荧光素酶LUC及海参荧光素酶REN能够成功表达。
一种青蒿原生质体高效分离瞬时转化方法

[发明专利]青蒿腺毛优势表达AaTCP15基因启动子及应用-CN201711156427.0有效
发明人：唐克轩;马亚男;徐东北;付雪晴;沈乾;石璞;黎凌;陈明慧;谢利辉;孙小芬 -专利权人：苏州唐基生物科技有限公司
申请日： 2017-11-20 - 公布日： 2020-06-09 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：一种植物生物技术领域的基因启动子，所述启动子的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；AaTCP15基因启动子能够调控目的基因在植物各组织中表达，尤其是分泌型腺毛和非分泌型腺毛中优势表达。同时本发明还涉及前述AaTCP15基因启动子在利用植物腺毛组织表达和生产代谢产物的基因工程育种中的用途。由于腺毛优势表达的启动子对植物的腺毛系统进行遗传操作，不会对植物的生长发育造成危害，本发明对利用植物腺毛组织表达和生产代谢产物的基因工程育种具有重要意义。
青蒿腺毛优势表达 aatcp15 基因启动子应用

[发明专利]青蒿腺毛优势表达AaTCP14基因启动子及其获得方法与应用-CN201810094836.0有效
发明人：唐克轩;马亚男;徐东北;付雪晴;石璞;陈明慧;黎凌;钟旖珺;谢利辉;沈乾;郝小龙;孙小芬 -专利权人：上海交通大学
申请日： 2018-01-31 - 公布日： 2020-01-03 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明公开了一种青蒿腺毛优势表达AaTCP14基因启动子包含SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列，或者与SEQ ID NO：1互补的核苷酸序列。该启动子能够调控目的基因在植物各组织中表达，尤其是分泌型和非分泌型腺毛中优势表达。同时本发明还涉及该启动子的获得方法和在利用植物腺毛组织表达和生产代谢产物的基因工程育种中的用途。由于利用植物腺毛优势表达的启动子对植物的腺毛系统进行遗传操作时，不会对植物的生长发育造成危害。因此，本发明对利用植物组织尤其是腺毛中表达和生产代谢产物的基因工程育种具有重要意义。
优势表达启动子基因工程育种核苷酸序列基因启动子代谢产物植物腺毛青蒿非分泌型目的基因生长发育遗传操作植物组织重要意义分泌型生产调控应用

[发明专利]磨煤机速关门装置-CN200610113902.1无效
发明人：李大元;嵇文渊;季永强;陈清峰;姜建国;仲德忠;徐东北;田晓明 -专利权人：北京电力自动化设备厂
申请日： 2006-10-20 - 公布日： 2008-04-23 - 主分类号： F16K3/02 文献下载
摘要：一种磨煤机速关门装置，可用于各种管道出口的粉尘速关门，特别是用于磨煤机的输煤管道出口速关门和排渣箱出口；本发明由阀门上体1、阀门下体2、阀门隔板4、阀门板3组成，阀门隔板4上表面与阀门上体1连接，阀门隔板4下表面与阀门下体2连接，在阀门上体1的一端，其与阀门下体2形成一空间，其内安有可拉出、可推进的阀门板3，其特征在于，在阀门上体1的下表面上或/和阀门下体2的上面表上设有1条或多条轨道5；本发明构思巧妙，结构简单，解决了现有磨煤机速关门密封不好，关门速度慢、不平稳，常有爬行现象的问题；本发明还具有吹扫功能，避免了阀门周围固体介质堆积的现象；并能在关门时对较大的固体介质进行剪切。
磨煤机速关门装置

[实用新型]一种粉尘隔绝阀门-CN200620134134.3无效
发明人：李大元;嵇文渊;季永强;陈清峰;姜建国;仲德忠;徐东北;田晓明 -专利权人：北京电力自动化设备厂
申请日： 2006-10-20 - 公布日： 2007-10-24 - 主分类号： F16K3/02 文献下载
摘要：一种粉尘隔绝阀门，用于各种管道出口的速关门，本实用新型由上阀体1、下阀体2、隔板4、插板3组成，隔板4上表面与上阀体1连接，隔板4下表面与下阀体2连接，在上阀体1的一端，其与下阀体2形成一空间，其内安有可拉出、可推进的插板3，其特征在于，在上阀体1的下表面上或/和下阀体2的上面表上设有1条或多条轨道5；本实用新型构思巧妙，结构简单，解决了现有管道出口密封不好，关门速度慢、不平稳，常有爬行现象的问题；也避免了阀门周围固体介质堆积的现象；并能在关门时对较大的固体介质进行剪切。
一种粉尘隔绝阀门

[发明专利]一种煤样采样头-CN97112013.7无效
发明人：周裕庭;孙正祥;魏新彦;徐东北;孟繁勇 -专利权人：北京电力自动化设备厂
申请日： 1997-05-14 - 公布日： 1998-11-18 - 主分类号： G01N1/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种煤样采样头,它是一种安装在输煤皮带端部的用于采集煤样的专用设备,具体结构是动板、静板上均开有采样孔,静板上接有固定在输煤皮带端部主滚筒支架上的固定架,沿静板做直线往复运动的动板通过传动机构与静板联接,动板驱动机构是液压驱动机构。其解决了已有技术的不足,具有采样速度快,准确度高,不会引发系统事故,安装方便,价格低廉,适于我国使用的优点。
一种采样

[实用新型]一种煤样采样头-CN97215666.6无效
发明人：周裕庭;孙正祥;魏新彦;徐东北;孟繁勇 -专利权人：北京电力自动化设备厂
申请日： 1997-05-14 - 公布日： 1998-10-21 - 主分类号： G01N1/04 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种煤样采样头,它是一种安装在输煤皮带端部的用于采集煤样的专用设备,具体结构是动板、静板上均开有采样孔,静板上接有固定在输煤皮带端部主滚筒支架上的固定架,沿静板做直线往复运动的动板通过传动机构与静板联接,动板驱动机构是液压驱动机构。其解决了已有技术的不足,具有采样速度快,准确度高,不会引发系统事故,安装方便,价格低廉,适于我国使用的优点。
一种采样

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