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[发明专利]全合成酮还原酶及应用该酮还原酶的制备方法-CN202310408507.X在审
发明人：戚陈陈;邬小兵;张康;杨柳 -专利权人：重庆普佑生物医药有限公司
申请日： 2023-04-17 - 公布日： 2023-09-12 - 主分类号： C12N9/02 文献下载
摘要：本发明涉及合成技术领域，特别是涉及基因工程与酶工程合成技术领域，具体而言，涉及全合成酮还原酶及应用该还原酶的制备方法。通过全合成的方法获得了一种新的酮还原酶，该酮还原酶能够稳定异源功能性表达，同时该酮还原酶能够在替格瑞洛合成关键中间体化合物(S)‑2‑氯‑1‑(3,4‑二氟苯基)乙醇的制备中和富马酸丙酚替诺福韦关键中间体化合物(R)‑9‑(2‑羟丙基)腺嘌呤的制备中均表现出高效地催化活性，具有巨大的工业化应用潜力，有望成为催化不同手性构型的通用酮还原酶。
合成还原酶应用制备方法

[发明专利]一种高活性细菌硝基还原酶基因及其应用-CN201410337143.1有效
发明人：杨君;白敬;刘培瑜;刘田;姜秀萍;杨青 -专利权人：大连理工大学
申请日： 2014-07-15 - 公布日： 2014-10-15 - 主分类号： C12N15/53 文献下载
摘要：本发明公开了一种突变型细菌硝基还原酶基因及其应用，属于酶工程领域。根据多序列比对及蛋白结构分析，设计突变位点，以来自大肠杆菌的硝基还原酶NfsB基因为模板，采用重叠延伸PCR技术将NfsB基因第123位的苯丙氨酸(Phe)突变为丙氨酸(Ala)。本发明所述硝基还原酶突变体F123A具有硝基还原酶活性，与野生型硝基还原酶相比催化效率显著提高2-5倍。本发明所提供硝基还原酶突变体可广泛应用于药物激活及代谢、芳香羟胺合成及硝基污染物降解等诸多领域。
一种活性细菌硝基还原酶基因及其应用

[发明专利]筛选醛糖还原酶抑制剂的方法-CN201210284802.0有效
发明人：宋凤瑞;侯广月;刘舒;皮子凤;刘志强;刘淑莹 -专利权人：中国科学院长春应用化学研究所
申请日： 2012-08-10 - 公布日： 2012-11-28 - 主分类号： C12Q1/26 文献下载
摘要：筛选醛糖还原酶抑制剂的方法，解决了现有技术中光谱法易受背景干扰，引起假阳性和假阴性结果的问题。本发明以葡萄糖为底物，醛糖还原酶在25-37摄氏度催化葡萄糖生成山梨醇，用超高效液相色谱和质谱联用对山梨醇进行定量，进一步计算出天然产物提取物、单体及合成类的醛糖还原酶抑制剂对醛糖还原酶的抑制率。本发明的筛选方法快速、准确，线性方程相关系数达到0.999，可用于醛糖还原酶抑制剂的筛选及醛糖还原酶的动力学研究。
筛选还原酶抑制剂方法

[发明专利]飞蝗过氧化物还原酶及其编码基因与应用-CN201910397111.3有效
发明人：涂雄兵;张泽华;陈俊;郝昆;崔栋楠;王广君;农向群;赵亚斋 -专利权人：中国农业科学院植物保护研究所
申请日： 2019-05-14 - 公布日： 2021-08-17 - 主分类号： C12N9/08 文献下载
摘要：本发明公开了一种过氧化物还原酶基因PRX6的dsRNA及其制备方法与应用。本发明首先从飞蝗中克隆了飞蝗过氧化物还原酶基因LmPRX6，并对飞蝗过氧化物还原酶基因LmPRX6设计引物，合成了用于飞蝗过氧化物还原酶基因LmPRX6的dsRNA，且运用注射法将dsRNA导入飞蝗对飞蝗过氧化物还原酶基因结果表明：通过干扰飞蝗过氧化物还原酶基因LmPRX6可调控飞蝗滞育。本发明为更深入理解飞蝗滞育机制、创制新的生物农药制剂提供理论基础。
飞蝗过氧化物还原酶及其编码基因应用

[发明专利]一种羰基还原酶、基因及其在不对称还原前手性羰基化合物中的应用-CN201210423006.0有效
发明人：许建和;许国超;郁惠蕾;潘江 -专利权人：华东理工大学
申请日： 2012-10-30 - 公布日： 2013-01-16 - 主分类号： C12P7/22 文献下载
摘要：本发明公开了一种羰基还原酶作为催化剂在不对称还原前手性羰基化合物制备手性醇中的应用，以及所述羰基还原酶的基因、蛋白及其突变体。本发明还提供了包含所述羰基还原酶基因的重组表达载体和重组表达转化体。利用本发明所述的羰基还原酶催化不对称还原前手性羰基化合物反应时，所述不对称还原反应的反应条件温和，操作过程简便，易于放大；通过该不对称还原反应制备所得的手性醇产物浓度高，光学纯度高。因此，所述羰基还原酶在光学纯手性醇的制备中具有很好的工业应用开发前景。
一种羰基还原酶基因及其不对称还原手性化合物中的应用

[发明专利]一种应用Perakine还原酶合成手性醇的方法-CN201811521466.0有效
发明人：孙莲莉;陈媛媛;邵娜娜;周韵 -专利权人：浙江大学
申请日： 2018-12-12 - 公布日： 2020-05-08 - 主分类号： C12P7/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种应用Perakine还原酶合成手性醇的方法，以不同的潜手性酮为底物，经Perakine还原酶催化体系还原合成手性醇，所述催化体系由Perakine还原酶和辅酶再生系统组成。本发明中所述应用Perakine还原酶作为催化剂合成手性醇的方法不仅具有反应步骤简单、反应条件温和、环境友好、催化效率高、酶纯化简单、稳定性好、立体选择性强等优点，而且Perakine还原酶的底物性极广
一种应用 perakine 还原酶合成手性方法

[发明专利]酮还原酶LEK突变体及应用-CN201310244684.5有效
发明人：谢恬;殷晓浦;叶婷婷;沈凌宏;曹丹;王秋岩;谌容;裴晓林 -专利权人：杭州师范大学
申请日： 2013-06-18 - 公布日： 2013-09-25 - 主分类号： C12N9/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种酮还原酶LEK突变体及在生物催化制备（R）-4-氯-3-羟基丁酸乙酯中的应用，所述酮还原酶LEK具有SEQ.ID.NO.2所示氨基酸序列，酮还原酶LEK突变体是将酮还原酶LEK氨基酸位点第209位的S突变G获得的突变体S209G，本发明开发R型酮还原酶，即酮还原酶LEK，再经定点突变改造该酶并建立辅酶再生循环反应体系，催化制备(R)-CHBE的转化率达到100%和e.e.值大于99%，同时该酶
还原酶 lek 突变体应用

[发明专利]一种检测HMG-CoA还原酶活性的改良分光光度法及应用-CN201110073398.8有效
发明人：汪晖;郭喻;平洁;梁赅;王婷婷 -专利权人：武汉大学
申请日： 2011-03-25 - 公布日： 2011-10-19 - 主分类号： G01N21/33 文献下载
摘要：本发明公开了一种检测HMG-CoA还原酶活性的改良分光光度法及应用。其检测方法：a、新鲜肝脏组织离心制备肝微粒体；b、肝微粒体重悬、匀浆、稀释、离心后取上清得到含可溶性HMG-CoA还原酶源；c、检测HMG-CoA还原酶源的蛋白含量，并稀释至已知浓度；d、将HMG-CoA还原酶源加至已优化的反应体系，检测OD340值并计算酶活性。基于该检测方法建立HMG-CoA还原酶抑制剂检测体系，计算酶活性抑制率和半数抑制浓度(IC50)，可用于筛选降血脂药物。本发明具有体系优化、安全价廉、批量筛选、结论可信等优点，可有效的筛选HMG-CoA还原酶活性抑制剂，为开发降脂药物提供了简便、快速的方法。
一种检测 hmg coa 还原酶活性改良分光光度法应用

[发明专利]一种酮还原酶及其在不对称合成手性羟基化合物中的应用-CN201410541899.8有效
发明人：罗煜;丁时澄;瞿旭东;王海涛 -专利权人：上海弈柯莱生物医药科技有限公司
申请日： 2014-10-14 - 公布日： 2019-06-11 - 主分类号： C12N9/04 文献下载
摘要：本发明提供了一种催化活性高、对映选择性强、底物耐受性好的酮还原酶，以及使用该酮还原酶催化合成(R)‑HPBE，进而进一步合成普利类药物的酶‑化学合成方法。还提供了编码该酮还原酶的核酸序列，含有该核酸序列的重组表达载体、重组表达转化体及该酮还原酶的制备方法，以及该酮还原酶在催化羰基底物不对称还原中的用途。相对于其它不对称还原制备方法，使用本发明方法制备所得的产物浓度高，并且具有产物光学纯度高、反应条件温和、对环境友好、操作简便、易于工业放大的优点。
一种还原酶及其不对称合成手性羟基化合物中的应用

[发明专利]一种高通量筛选羰基还原酶活性和对映选择性的方法-CN201410457947.5在审
发明人：吴洽庆;冯进辉;陈曦;马延和;朱敦明 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2014-09-11 - 公布日： 2016-04-06 - 主分类号： C12Q1/32 文献下载
摘要：本发明公布了一种高通量筛选羰基还原酶活性和立体选择性的方法，该方法利用羰基还原酶氧化时生成的辅因子NAD（P）H和偶氮染料为底物，利用偶氮还原酶将偶氮染料还原引起的颜色变化实现羰基还原酶的高通量筛选。本发明的方法可以快速有效的实现羰基还原酶的筛选，并且可以在96孔板或者是384孔板中实现，该方法既可以在利用检测紫外波长变换进行检测，也可以利用肉眼直接观察，是一种非常可靠的筛选方法。
一种通量筛选羰基还原酶活性选择性方法

[发明专利]一种羰基还原酶突变体mut-AcCR(I147V/G152L)及其应用与编码基因-CN201811412383.8有效
发明人：娄文勇;魏萍;宗敏华 -专利权人：华南理工大学
申请日： 2018-11-25 - 公布日： 2021-07-20 - 主分类号： C12N9/04 文献下载
摘要：本发明提供一种羰基还原酶突变体mut‑AcCR(I147V/G152L)及其应用与编码基因。羰基还原酶AcCR能够催化多种潜手性羰基化合物不对称还原，但是其对于芳香族化合物的活性及底物耐受性较低，本发明采用酶分子改造手段将糖基化还原酶AcCR进行突变，获得突变体mut‑AcCR(I147V/G152L)，突变体对于2‑羟基苯乙酮的比酶活可达6.4 U/mg，比未突变前的羰基还原酶的比活力提高17.4倍。本发明所述羰基还原酶突变体在羰基化合物的不对称还原中被广泛应用。
一种羰基还原酶突变体 mut accr i147v g152l 及其应用编码基因

[发明专利]一种羰基还原酶突变体mut-AcCR(E144A/G152L)及其应用与编码基因-CN201811412391.2有效
发明人：娄文勇;魏萍;宗敏华;郭泽望;区晓阳 -专利权人：华南理工大学
申请日： 2018-11-25 - 公布日： 2021-06-08 - 主分类号： C12N9/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种羰基还原酶突变体mut‑AcCR(E144A/G152L)及其应用与编码基因。羰基还原酶AcCR能够催化多种潜手性羰基化合物不对称还原，但是其对于芳香族化合物的活性及底物耐受性较低，本发明采用酶分子改造手段将糖基化还原酶AcCR进行突变，获得突变体mut‑AcCR(E144A/G152L)，该突变体对于4’‑氯苯乙酮的比酶活可达92.7 U/mg，比未突变前的羰基还原酶的比活力提高17.93倍。本发明所述羰基还原酶突变体在羰基化合物的不对称还原中被广泛应用。
一种羰基还原酶突变体 mut accr e144a g152l 及其应用编码基因

[发明专利]用于检测生物标本中的过氧化物还原酶Ⅳ抗体的ELISA试剂盒及其方法与运用-CN201110025635.3有效
发明人：吴乔;吴玉章 -专利权人：中国人民解放军第三军医大学
申请日： 2011-01-24 - 公布日： 2012-02-08 - 主分类号： G01N33/543 文献下载
摘要：本发明涉及医学领域，特别涉及用于检测生物标本中的过氧化物还原酶Ⅳ抗体的ELISA试剂盒及其方法与运用，所述ELISA试剂盒包括抗体捕获剂、酶标二抗、底物；本试剂盒能特异性的检测过氧化物还原酶Ⅳ抗体的含量，其成本低，敏感性佳；运用本试剂盒检测过氧化物还原酶Ⅳ抗体的含量，并与正常人的过氧化物还原酶Ⅳ的抗体水平进行比较，判断过氧化物还原酶Ⅳ抗体是否为阳性。
用于检测生物标本中的过氧化物还原酶抗体 elisa 试剂盒及其方法运用

[发明专利]一种羰基还原酶突变体及其在手性醇制备中的应用-CN201611239139.7有效
发明人：石利平;陈峻青;蔡进;漆志文;张维冰;叶银梅;徐春涛 -专利权人：江苏阿尔法药业有限公司
申请日： 2016-12-28 - 公布日： 2020-08-21 - 主分类号： C12N15/53 文献下载
摘要：本发明公开了一种羰基还原酶突变体及其在手性醇制备中的应用。一种羰基还原酶突变体基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。一种羰基还原酶突变体，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。一种用于生产羰基还原酶的基因工程菌，并且通过培养该基因工程菌和优化发酵工艺，实现重组羰基还原酶的制备，并将其用于不对称催化合成(R)‑2‑羟基‑4‑苯基丁酸乙酯。
一种羰基还原酶突变体及其手性制备中的应用

[发明专利]用硝酸还原酶活性诊断甜菜氮素营养及预测产糖量的方法-CN200410043937.3无效
发明人：李凤鸣;李彩凤;李文华 -专利权人：东北农业大学
申请日： 2004-10-15 - 公布日： 2006-04-19 - 主分类号： C12Q1/26 文献下载
摘要：本发明提供的是一种用硝酸还原酶活性诊断甜菜氮素营养及预测产糖量的方法。分别测定甜菜在幼苗末期、根块增长初期功能叶片的硝酸还原酶的活性。硝酸还原酶活性不仅表示甜菜对NO₃^－的吸收、积累水平，更真实地反映了甜菜对NO₃^－利用即氮同化代谢的水平，而且硝酸还原酶活性对作物的光合、呼吸及碳素代谢都有重要的影响，因此以硝酸还原酶活性为指标比以NO₃^－含量作指标更直接、更可靠。
硝酸还原酶活性诊断甜菜氮素营养预测产糖量方法