本发明属于生物制药和生物工程技术领域，具体为一种羰基还原酶突变体及其在制备(R)‑4‑氯‑3‑羟基‑丁酸酯中的应用。本发明的羰基还原酶突变体是对如SEQ ID NO.2序列的第85位苯丙氨酸替换为甲硫氨酸得到，或者在此基础上对85位之外的一个或几个位点经过氨基酸残基替换得到。本发明还涉及含有羰基还原酶突变体基因的重组表达载体，含有羰基还原酶突变体基因和葡萄糖脱氢酶基因的工程菌，以及该基因工程菌在不对称还原氯乙酰乙酸酯制备(R还原酶突变体与野生酶相比，对氯乙酰乙酸酯的还原能力明显提高，具有良好的工业应用前景。
本发明公开了一种醛酮还原酶突变体及其在不对称还原6‑氰基‑(5R)‑羟基‑3‑羰基己酸叔丁酯制备6‑氰基‑(3R,5R)‑二羟基己酸叔丁酯中的应用，所述醛酮还原酶突变体是将SEQ ID No.2所示氨基酸第本发明制备的醛酮还原酶突变体pKlAKR‑I125V‑S30P‑Q212R‑I63W的比酶活较母本醛酮还原酶提升了1.31倍，最大底物6‑氰基‑(5R)‑羟基‑3‑羰基己酸叔丁酯投料达到80g/L，该醛酮还原酶突变体更具工业应用前景
本发明涉及一种羰基还原酶，及所述羰基还原酶在催化N‑叔丁氧羰基‑羰基氮杂环化合物的不对称还原，生成高光学纯度的相应(S)‑构型的N‑叔丁氧羰基‑羟基氮杂环化合物中的应用。所述羰基还原酶为由SEQ ID No.2所示氨基酸序列的第90位、第92位、第94位、第99位、第138位或第174位氨基酸残基经过氨基酸替换后所形成的新氨基酸序列构成的N‑叔丁氧羰基‑羰基哌啶还原活性提高的羰基还原酶突变体与现有技术相比，本发明的工程化羰基还原酶具有活性高、底物谱广的优势，在制备(S)‑N‑Boc‑羟基氮杂环中具有很好的工业应用前景。
