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[发明专利]生产L-谷氨酰胺的方法和生产L-谷氨酰胺的细菌-CN200710088176.7有效
发明人：中村纯;秋山嘉代 -专利权人：味之素株式会社
申请日： 2003-11-26 - 公布日： 2012-03-21 - 主分类号： C12N15/52 文献下载
摘要：生产L-谷氨酰胺的方法和生产L-谷氨酰胺的细菌；通过在培养基中培养具有L-谷氨酰胺生产能力并且已经修饰使它的细胞内谷氨酰胺酶活性降低，优选地同时修饰使它的细胞内谷氨酰胺合成酶活性增强的棒状杆菌，在培养基中生产和积累L-谷氨酰胺，并且回收L-谷氨酰胺，来生产L-谷氨酰胺。
生产谷氨酰胺方法细菌

[发明专利]一种高产L-谷氨酰胺的谷氨酸棒杆菌及其构建方法与应用-CN201911368695.8在审
发明人：王成;胡丹;吴涛 -专利权人：新疆梅花氨基酸有限责任公司
申请日： 2019-12-26 - 公布日： 2020-04-03 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明属于生物工程技术领域，公开了一种高产L‑谷氨酰胺的谷氨酸棒杆菌及其构建方法与应用。本发明所述高产L‑谷氨酰胺的谷氨酸棒杆菌其细胞内α‑酮戊二酸脱氢酶和/或谷氨酸外运蛋白活性丧失，并且谷氨酰胺合成酶的腺苷酰化修饰解除。本发明所述高产L‑谷氨酰胺的谷氨酸棒杆菌能使L‑谷氨酰胺在培养基或细胞中积累，很大程度提高L‑谷氨酰胺的产量。实验表明本发明所述谷氨酸棒杆菌为L‑谷氨酰胺高产菌株，产生L‑谷氨酰胺的能力与未修饰菌株相比得到增强，能有效积累L‑谷氨酰胺，提高L‑谷氨酰胺的产量，且具有较高的转化率，为L‑谷氨酰胺的工业化生产奠定了基础
一种高产谷氨酰胺谷氨酸杆菌及其构建方法应用

[发明专利]谷氨酰胺合酶突变体及其应用-CN202111530525.2有效
发明人：栾明月;吴涛;姚嘉琪;赵津津;李岩 -专利权人：廊坊梅花生物技术开发有限公司
申请日： 2021-12-14 - 公布日： 2023-06-06 - 主分类号： C12N9/00 文献下载
摘要：本发明涉及重组微生物技术领域，具体涉及谷氨酰胺合酶突变体及其应用。本发明通过易错PCR方法强化异源谷氨酰胺合酶，促进谷氨酰胺或者谷氨酰胺衍生物的生产。具体地，通过对不同来源的谷氨酰胺合酶编码基因进行密码子优化，然后通过易错PCR的方法构建突变体文库，获得谷氨酰胺合酶突变体。发酵实验证实，含有本发明提供的谷氨酰胺合酶突变体的菌株更利于谷氨酰胺的生产；谷氨酰胺产量可达到32.7‑33.5g/L，产酸提高5.7‑12.4％。
谷氨酰胺突变体及其应用

[发明专利]用于软骨肉瘤诊治的生物标记物及谷氨酰胺酶抑制剂在制备治疗软骨肉瘤药物中的应用-CN202111159786.8在审
发明人：叶招明;吴岩;章增杰;陈亮;莫现安 -专利权人：浙江大学
申请日： 2021-09-30 - 公布日： 2022-03-01 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于软骨肉瘤诊治的生物标记物及谷氨酰胺酶抑制剂在制备治疗软骨肉瘤药物中的应用。该用于软骨肉瘤诊治的生物标记物为谷氨酰胺酶、谷氨酰胺酶基因或谷氨酰胺酶mRNA，所述的谷氨酰胺酶基因具有如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。本发明研究发现，谷氨酰胺酶在软骨肉瘤细胞中表达上调，靶向抑制软骨肉瘤细胞中的谷氨酰胺酶活性可能就是治疗软骨肉瘤的潜在新靶点，因此，将谷氨酰胺酶、谷氨酰胺酶基因或谷氨酰胺酶mRNA作为软骨肉瘤诊治的生物标记物，可用于筛查能够靶向抑制软骨肉瘤细胞中的谷氨酰胺酶活性的药物，为软骨肉瘤的治疗提供新途径。
用于软骨肉瘤诊治生物标记谷氨酰胺抑制剂制备治疗药物中的应用

[发明专利]一种化学酶法制备D-谷氨酰胺的方法-CN201911112311.6在审
发明人：陈诚;吴聪;程文莹;甘飞;杜青林;刘均忠;焦庆才 -专利权人：湖北新生源生物工程有限公司
申请日： 2019-11-14 - 公布日： 2020-01-03 - 主分类号： C12P41/00 文献下载
摘要：本发明提供了一种化学酶法制备D‑谷氨酰胺的方法。所述方法按以下步骤进行：1、制备N‑邻苯二甲酰‑DL‑谷氨酸；2、制备N‑邻苯二甲酰‑DL‑谷氨酸酐；3、制备N‑邻苯二甲酰‑DL‑谷氨酰胺；4、制备DL‑谷氨酰胺；5、培养制备氨肽酶；6、氨肽酶拆分DL‑谷氨酰胺。本发明利用成本低廉的DL‑谷氨酸为原料，经四步简单的化学反应制备DL‑谷氨酰胺，并对工艺参数进行优化，DL‑谷氨酰胺收率由57%提高至67%；利用氨肽酶拆分DL‑谷氨酰胺，得到L‑谷氨酸和D‑谷氨酰胺，D‑谷氨酰胺达到理论收率的95%。
谷氨酰胺制备谷氨酸邻苯二甲酰氨肽酶收率化学反应工艺路线绿色环保原料成本化学酶优化

[发明专利]生产L－谷氨酰胺的方法和生产L－谷氨酰胺的细菌-CN200310124084.1有效
发明人：中村纯;秋山嘉代 -专利权人：味之素株式会社
申请日： 2003-11-26 - 公布日： 2004-06-09 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：通过在培养基中培养具有L－谷氨酰胺生产能力并且已经修饰使它的细胞内谷氨酰胺酶活性降低，优选地同时修饰使它的细胞内谷氨酰胺合成酶活性增强的棒状杆菌，在培养基中生产和积累L－谷氨酰胺，并且回收L－谷氨酰胺，来生产L－谷氨酰胺。
生产谷氨酰胺方法细菌

[发明专利]一种采用复合膜提取丙氨酰谷氨酰胺的方法-CN201610844852.8在审
发明人：李斌水;米造吉;何连顺;马腾;李霆;马静;杨涛 -专利权人：精晶药业股份有限公司
申请日： 2016-09-23 - 公布日： 2016-12-21 - 主分类号： C07K5/062 文献下载
摘要：本发明涉及丙氨酰谷氨酰胺的生产技术领域，尤其涉及丙氨酰谷氨酰胺的分离提纯技术领域，具体公开了一种采用复合膜提取丙氨酰谷氨酰胺的方法，从丙氨酰谷氨酰胺的酶促合成转化液中提取丙氨酰谷氨酰胺粗品，将丙氨酰谷氨酰胺的酶促合成转化液先用活性炭处理脱色，再依次序分别循环流经两种高效复合膜进行杂质分离，最后采出滤液经浓缩结晶得到氨酰谷氨酰胺浓粗品。本发明方法操作简便，效率高，所得丙氨酰谷氨酰胺杂质含量少、纯度高，产品质量稳定，适用于丙氨酰谷氨酰胺的规模化生产。
一种采用复合提取丙氨酰谷氨酰胺方法

[发明专利]一种优化的谷氨酰胺转氨酶基因和前导序列及其分泌表达-CN201710139754.9在审
发明人：宋小平 -专利权人：安徽医学高等专科学校
申请日： 2017-03-10 - 公布日： 2017-05-31 - 主分类号： C12N15/54 文献下载
摘要：本发明涉及到基因序列优化的谷氨酰胺转氨酶及其分泌表达方法和应用。本发明将源于茂源链霉菌的谷氨酰胺转氨酶基因及其前导序列按照巴斯德毕赤酵母的偏爱密码子进行改造得到优化谷氨酰胺转氨酶基因及其优化前导序列。构建了优化谷氨酰胺转氨酶基因及其优化前导序列共表达重组毕赤酵母体系，筛选得到高表达重组谷氨酰胺转氨酶的菌株。本发明所优化的谷氨酰胺转氨酶基因及其前导序列能在毕赤酵母中稳定、高效的表达，所表达的重组谷氨酰胺转氨酶酶活达到0.5U/mL，是原始谷氨酰胺转氨酶活的4倍，为谷氨酰胺转氨酶进一步工业化扩大生产奠定了基础
一种优化谷氨酰胺转氨酶基因前导序列及其分泌表达

[发明专利]生产L-谷氨酰胺的菌株和生产L-谷氨酰胺的方法-CN201611250325.0有效
发明人：胡丹;王成;刁刘洋;毛贤军 -专利权人：廊坊梅花生物技术开发有限公司
申请日： 2016-12-29 - 公布日： 2021-06-22 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明涉及食品工业技术领域，尤其涉及生产L‑谷氨酰胺的菌株和生产L‑谷氨酰胺的方法。本发明研究表明，单独pyc改造不能提高谷氨酸棒杆菌积累谷氨酰胺的能力，但pyc改造与odhA弱化改造配合，则可以大幅提高谷棒产谷氨酰胺的水平。说明，pyc高表达与odhA弱化表达，对合成谷氨酰胺具有协同促进作用。本发明以保藏编号为CGMCC No.13404的谷氨酸棒杆菌为出发，通过弱化odhA及增强pyc的表达水平，构建得到L‑谷氨酰胺基因工程改造菌。该菌株能够实现发酵过程中L‑谷氨酰胺的高效积累，L‑谷氨酰胺可达28.9g/L。
生产谷氨酰胺菌株方法

[发明专利]使用酶的蛋白质的改性方法-CN200980110108.3无效
发明人：三轮典子;榛叶信久;中村美奈;铃木荣一郎;横山敬一;中越裕行;广濑文之;佐藤弘明 -专利权人：味之素株式会社;天野酶株式会社
申请日： 2009-03-12 - 公布日： 2011-04-13 - 主分类号： C12P21/02 文献下载
摘要：本发明提供使蛋白谷氨酰胺酶及转谷氨酰胺酶两者作用于蛋白质而使蛋白质改性的方法，提供含有经这两种酶改性的蛋白质的食品，提供含有两酶的蛋白质改性用酶制剂，提供简便地发现以适当添加量比将蛋白谷氨酰胺酶和转谷氨酰胺酶添加到蛋白质中的方法蛋白谷氨酰胺酶添加到蛋白质中的时间和转谷氨酰胺酶添加到蛋白质中的时间大致相同，或者在转谷氨酰胺酶作用于蛋白质之前，或者，通过使作用于蛋白质的蛋白谷氨酰胺酶和转谷氨酰胺酶的添加比例为规定的比例而使蛋白质改性通过使用同位素标记铵盐标记的蛋白质的NMR信号强度等发现蛋白谷氨酰胺酶和转谷氨酰胺酶的适当添加量比。
使用蛋白质改性方法

[发明专利]一种L-谷氨酰胺的提取方法-CN201910414708.4在审
发明人：王林 -专利权人：南通普悦生物医药有限公司
申请日： 2019-05-17 - 公布日： 2019-07-16 - 主分类号： C12P13/14 文献下载
摘要：本发明公开了一种L‑谷氨酰胺的提取方法，将所得活化菌株接种到发酵培养基中，培养后，培养基的上清液中得L‑谷氨酰胺；将L‑谷氨酰胺通过微滤膜得到滤清液和截留液，浓缩液冷却，分离得到谷氨酰胺粗品，谷氨酰胺粗品中加去离水溶解，得到粗品溶解液；粗品溶解液分离得到脱色液，脱色液结晶、分离烘干，即可得到L‑谷氨酰胺成品和精母液；将截留液和精母液混合进行浓缩再添加硫酸锌和复合菌，混合均匀、干燥，制成L‑谷氨酰胺饲料。利用谷氨酸棒杆菌发酵生产L‑谷氨酰胺时可以抑制副产物L‑谷氨酸的产生，取L‑谷氨酰胺发酵液经微滤、结晶、脱色，制得L‑谷氨酰胺，完全去除离子交换的步骤，使收率大幅度提高，大幅度降低了废水废液，减少了污染，以L‑谷氨酰胺提取工艺中的截留液、精母液为主要原料制备成高附加值饲料，增加了工艺附加值。
谷氨酰胺截留液精母液粗品溶解脱色液粗品谷氨酸棒杆菌谷氨酸发酵培养基废水废液活化菌株离子交换原料制备培养基饲料脱色发酵液副产物复合菌硫酸锌滤清液浓缩液上清液水溶解微滤膜烘干去除收率微滤发酵接种冷却浓缩污染生产

[发明专利]丙氨酰谷氨酰胺特种超细粉体冻干制剂及其制备方法-CN201410059863.6有效
发明人：姜晓东;李凤生 -专利权人：海南灵康制药有限公司
申请日： 2014-02-21 - 公布日： 2015-08-26 - 主分类号： A61K9/19 文献下载
摘要：本发明公开了一种丙氨酰谷氨酰胺特种超细粉体冻干制剂及其制备方法，该方法包括如下步骤：步骤1，以N-（α-氯）-丙酰基-谷氨酰胺为原料，选择甲基肼作为氨化试剂，在常压下进行反应，浓缩，低温冷却，析出丙氨酰谷氨酰胺粗产物；步骤2，在10℃温度下，向丙氨酰谷氨酰胺粗产物加入无水甲醇，搅拌，抽虑除去甲醇溶液，获得含丙氨酰谷氨酰胺的滤饼；步骤3，将含丙氨酰谷氨酰胺的滤饼溶于水中，将混合液升温至75℃，保持一定时间进行浓缩，然后加入乙醇，并梯度降低温度，进行重结晶，获得提纯的丙氨酰谷氨酰胺；步骤4，将结晶的丙氨酰谷氨酰胺进行离心洗涤，干燥；步骤5，将干燥的丙氨酰谷氨酰胺用气流粉碎成超细粉体，进行冻干。
丙氨酰谷氨酰胺特种超细粉体冻干制剂及其制备方法

[发明专利]一种包含谷氨酰胺修饰的环糊精的抗肿瘤药物或药物载体-CN201910488667.3有效
发明人：钟殿胜;周平;梁兴梅;王树青 -专利权人：天津医科大学总医院
申请日： 2019-06-06 - 公布日： 2022-04-19 - 主分类号： A61K47/69 文献下载
摘要：本发明涉及一种包含谷氨酰胺修饰的环糊精的抗肿瘤药物或药物载体，及在制备抗肿瘤药物中的应用，其中谷氨酰胺修饰的β‑环糊精可以与化疗药物形成包合物，通过靶向肿瘤中异常高表达的谷氨酰胺转运体ASCT2将化疗药物转运进入肿瘤细胞，谷氨酰胺修饰的环糊精或者谷氨酰胺修饰的β‑环糊精与阿霉素或紫杉醇形成的包合物能够靶向谷氨酰胺转运体ASCT2，并被该转运体识别、转运进入肿瘤细胞，进而杀伤肿瘤细胞；由于荷瘤机体中，肿瘤是最大的谷氨酰胺摄取器官，而肝、肾、肺、肌肉等均为谷氨酰胺分泌器官，因此通过靶向谷氨酰胺转运体能够很好的降低化疗药物对肝、肾、肺等主要器官的毒副作用。
一种包含谷氨酰胺修饰环糊精肿瘤药物载体

[发明专利]用于转谷氨酰胺酶抗体检测的抗原及其制备方法、试剂盒及检测方法-CN201910399115.5在审
发明人：祝亮;阮秋莲;李路新;胡鹍辉 -专利权人：深圳市亚辉龙生物科技股份有限公司
申请日： 2019-05-14 - 公布日： 2019-07-26 - 主分类号： C12N9/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于转谷氨酰胺酶抗体检测的抗原，所述用于转谷氨酰胺酶抗体检测的抗原包括替换天然转谷氨酰胺酶中的特定氨基酸序列中的一个或多个特定氨基酸使所述天然转谷氨酰胺酶失去酶活性而形成的替换蛋白，所述用于转谷氨酰胺酶抗体检测的抗原具有免疫原性本发明还公开了一种用于转谷氨酰胺酶抗体检测的抗原的制备方法。本发明还公开了一种转谷氨酰胺酶抗体检测试剂盒及一种转谷氨酰胺酶抗体检测方法。
转谷氨酰胺酶抗体检测抗原制备替换抗体检测试剂盒氨基酸序列免疫原性氨基酸酶活性试剂盒蛋白检测

[发明专利]谷氨酰胺晶体的制备方法-CN202010031486.0有效
发明人：吴涛;白晨龙;王海雷;龚华;李岩;赵津津;乔石磊;何阳 -专利权人：廊坊梅花生物技术开发有限公司
申请日： 2020-01-13 - 公布日： 2023-06-23 - 主分类号： C07C231/24 文献下载
摘要：本发明涉及氨基酸制备领域，特别涉及谷氨酰胺晶体的制备方法。本发明通过谷氨酰胺发酵液经提取处理得到谷氨酰胺精制清液。精制清液调节pH值。精制液加入结晶助剂，启动蒸发浓缩。浓缩后加入谷氨酰胺晶种。蒸发结晶得到的浓缩液经过冷却预晶、分离、烘干，得到谷氨酰胺成品和精母液。本发明所述结晶方法能够改善L‑谷氨酰胺的结晶效果，有助于提高谷氨酰胺成品的堆积密度，从而提高精制收率和产品质量。
谷氨酰胺晶体制备方法

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