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[发明专利]用于预测对重组人血管内皮抑素敏感性的方法及试剂组合-CN202011551887.5在审
发明人：高文斌 -专利权人：深圳市罗湖区人民医院;高文斌
申请日： 2020-12-24 - 公布日： 2021-04-06 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：本发明公开了用于预测对重组人血管内皮抑素敏感性的方法包括：收集患者的浆膜腔积液；在浆膜腔积液中加入一定剂量的红细胞裂解液，混匀得到待检测浆膜腔积液；在设定环境下将待检测浆膜腔积液初次离心作用至设定时长；向离心作用后的待检测浆膜腔积液中加入样本稀释液，重悬沉淀成单细胞悬液并计数；在离心管中加入淋巴细胞分离液，将单细胞悬液置于淋巴细胞分离液层面之上，再次离心作用至设定时长后弃上清留沉淀；提取沉淀物质的RNA
用于预测重组血管内皮敏感性方法试剂组合

[发明专利]一种在细胞内原位进行全长mRNA反转录和转座的试剂盒、方法及其应用-CN202310351385.5在审
发明人：徐锦;徐涛;许逸聪;安子扬;李一恒 -专利权人：中山大学
申请日： 2023-04-03 - 公布日： 2023-08-18 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明公开了一种在细胞内原位进行全长mRNA反转录和转座的试剂盒、方法及其应用。所述试剂盒包括细胞固定和打孔液、重悬缓冲液I、重悬缓冲液II、反转录试剂及Tn5转座试剂；本发明能够实现在保持细胞形态完整的情况下对细胞内mRNA进行原位反转录和基于Tn5酶的转座反应，进而通过简单的PCR扩增和片段筛选得到可用于转录组测序的细胞内全长转录组文库，避免了样本RNA提取过程中的损失，可用于极低样本量的转录组文库构建，并可以结合基于微流控或多孔板技术等的单细胞分选平台，进而构建单细胞全长转录组文库
一种细胞内原位进行全长 mrna 转录试剂盒方法及其应用

[发明专利]人表皮干细胞的分离培养方法及装置-CN202210289257.8有效
发明人：陈志超;赵振民;张心灵;李义 -专利权人：北京中科健兰集团有限公司;北京大学第三医院（北京大学第三临床医学院）
申请日： 2022-03-23 - 公布日： 2023-05-23 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开一种人表皮干细胞的分离培养方法及装置，涉及干细胞培养技术领域。本发明分离培养方法包括材料选取、预处理、表皮修剪过滤、酶消化吹打、过滤离心、单细胞悬液制备、恒温孵育培养，采集小儿包皮后，清洗消毒去除皮下组织，与现有技术区别在于通过分离培养装置完成其中的表皮修剪过滤、酶消化吹打、过滤离心工序，分离培养装置能够提高表皮修剪效率，保持酶消化过程中的温度恒定，并且进行表皮干细胞液的自动收集，便于后续的单细胞悬液制备和恒温孵育培养工序，该分离培养方法的分离培养效率高，分离得到的人表皮干细胞纯度高，倒置显微镜观察呈卵圆形或多角形且细胞之间紧密相连。
表皮干细胞分离培养方法装置

[发明专利]一种用于循环肿瘤细胞捕获及单细胞分析的微流控芯片-CN202310532912.2在审
发明人：宋玉君;高彦峰 -专利权人：南京大学
申请日： 2023-05-11 - 公布日： 2023-07-28 - 主分类号： C12M1/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于循环肿瘤细胞捕获及单细胞分析的微流控芯片，属于微流控芯片技术及生物医学检测领域。所述的系统包括微流控芯片和检测溶液。所述的微流控芯片包含进样流道、平行主流道、单细胞检测功能单元和出样流道。其中，所述的单细胞检测功能单元包含用于单细胞锚定的钩状结构和用于单细胞代谢物收集的检测微腔室。本发明的微流控芯片可将单细胞捕获、单细胞培养和单细胞检测操作集成在同一芯片上完成，可大规模高效地建立无交叉污染的单细胞微环境，进而实现单细胞内和单细胞外代谢物分子的可视化检测，可用于单细胞代谢异质性分析和肿瘤细胞恶性程度评估
一种用于循环肿瘤细胞捕获单细胞分析微流控芯片

[实用新型]一种单细胞悬液样品制备过程中的收集装置-CN202020174839.8有效
发明人：付永;沈秀英 -专利权人：青海省畜牧兽医科学院
申请日： 2020-02-17 - 公布日： 2020-11-06 - 主分类号： C12M1/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种单细胞悬液样品制备过程中的收集装置，包括：冰盒主体，冰盒主体为顶端开口的空心箱体，空心箱体其中一个侧面的靠上方位置处整体开设有一横向开口；冰盒主体由内外两层组成，其中，内层为支撑层，相比传统办法，本实用新型避免了单细胞悬液样品在收集及输送过程中有效成分的失活，进而极大的提高了单细胞悬液样品制备质量和后期检测效率。
一种单细胞样品制备过程中的收集装置

[发明专利]从动物组织中提取病毒基因组RNA的方法-CN200710185356.7无效
发明人：赵宝华;宋杰;黄文娟 -专利权人：河北师范大学
申请日： 2007-12-10 - 公布日： 2008-07-16 - 主分类号： C07H21/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种从动物组织中提取单链RNA病毒基因组的方法，包括以下步骤：(1)组织匀浆取病变组织剪碎后加入无菌水，匀浆器内高速匀浆至单细胞悬液；(2)细胞裂解、病毒释放将所得单细胞悬液反复冻融、超声破碎，使细胞裂解、病毒释放；(3)离心分离将上述处理液在低温下，离心分离，收集病毒沉淀；(4)RNA提取向沉淀物中加入RNAiso Reagent试剂，重悬，分离后提取得到RNA。用本发明提取病毒基因组RNA既可以避免宿主细胞物质的干扰，又可以得到高丰度、高纯度、高完整性的病毒RNA，方便后续实验。用于病毒检测，可以检测到极微量病毒离子的存在。
动物组织提取病毒基因组 rna 方法

[发明专利]一种成纤维细胞基因转染方法-CN202310436265.5在审
发明人：张立苹;肖红卫;毕延震;任红艳;华再东;顾浩;陈矾;周昌繁 -专利权人：湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
申请日： 2023-04-21 - 公布日： 2023-06-23 - 主分类号： C12N15/89 文献下载
摘要：本发明公开了一种成纤维细胞基因转染方法，所述方法包括：获得细胞浓度为1～2个/uL的成纤维细胞悬液，将所述成纤维细胞悬液于细胞培养皿中制备细胞悬液微滴，每个所述细胞悬液微滴由体积为10±0.5uL的所述成纤维细胞悬液形成；将所述含有细胞悬液微滴的细胞培养皿于套皿微环境中孵育，细胞贴壁后加入细胞培养基培养；获得浓度为150～200ng/uL的含有线性化目的基因的质粒溶液；将所述质粒溶液吸入注射针中，调整所述注射针与水平面所成夹角的角度为30～60°，依次向每个所述细胞注射；注射后进行单细胞培养，获得稳定转染的转基因细胞克隆。获得不带筛选标记细胞系的目的，同时能够实现高效率的稳转。
一种纤维细胞基因转染方法

[实用新型]一种流式细胞仪分选装置-CN202222013011.6有效
发明人：汪桦君;汪艳涛;刘凯 -专利权人：长沙市微米生物科技有限公司
申请日： 2022-08-02 - 公布日： 2022-12-23 - 主分类号： G01N1/34 文献下载
摘要：本实用新型涉及细胞研究器材领域，公开了一种流式细胞仪分选装置，包括鞘液箱、多个悬液注入管和微型激光发射器，鞘液箱下端面贯穿设置有多个套接管，多个套接管内部顶端位置均固定设置有多个连接杆，多个悬液注入管靠下端位置分别通过多个连接杆连接设置于套接管内部本实用新型中，通过光电转换单元将激光的光能转换为电能，细胞通过形成的电场，使附加电荷特性的分选细胞移动到容器中，分选效果好，分选更加充分精确，同时设置多个悬液注入管，提升了分选细胞产量，也可将不同的细胞悬液注入到不同的悬液注入管中，可同时进行多种单细胞悬液的分选工作，工作效率高。
一种细胞分选装置

[实用新型]一种高效获取单细胞悬液的工具-CN201921658293.7有效
发明人：何方;贾慧琳;刘涛 -专利权人：遵义医学院附属医院
申请日： 2019-09-30 - 公布日： 2020-10-13 - 主分类号： C12M1/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种高效获取单细胞悬液的工具，包括工具本体，所述工具本体内设有空腔，所述空腔内设有尼龙滤网，所述工具本体的两端均设有螺纹端，所述工具本体的外侧壁上设有两个抽气孔，其中一个所述抽气孔位于尼龙滤网的上方本实用新型特别适用于临床级干细胞的提取，能够快速方便有效的获取高生物学活性的单细胞悬液，从而保证原代脐带或羊膜间充质干细胞质量。
一种高效获取单细胞工具

[发明专利]一种小胶质细胞的培养方法-CN202010958373.5在审
发明人：殷文静;孙莉洁 -专利权人：苏州良辰生物医药科技有限公司
申请日： 2020-09-14 - 公布日： 2020-11-13 - 主分类号： C12N5/079 文献下载
摘要：本发明公开了一种小胶质细胞的培养方法，包括将组织移入装有预冷HBSS的离心管中处理；弃去上层清液，加入预热的含白血病抑制因子（LIF）的胰酶，轻微摇晃使组织与消化液充分接触，得到组织溶液；在胎牛血清的培养基中添加LIF；在组织溶液中加入等体积的上述培养基终止消化；加入含LIF的培养基，用枪尖反复吹打使细胞分散过滤，得到单细胞悬液；将单细胞悬液接种于若干个细胞培养瓶中进行培养。实现在传统混合胶质细胞培养方法的基础上，在胰酶与培养基中加入LIF，并采用摇床震荡法分离小胶质细胞，可获得不易激活的小胶质细胞，对获得处于静息状态的神经胶质细胞用于药物评价实验有重要意义。
一种胶质细胞培养方法

[发明专利]一种脐带间充质干细胞的分离方法-CN201911379261.8在审
发明人：任玲;赵俊伟;殷克然;周兴旺;蔡子梦;宋健 -专利权人：河北银丰鼎诚生物技术有限公司;银丰生物工程集团有限公司
申请日： 2019-12-27 - 公布日： 2020-04-07 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明公开了一种脐带间充质干细胞的分离方法：(1)取新鲜脐带，用PBS缓冲液冲洗干净，剪成小段，剥离组织，放于组织消化液中，将小段剪成组织块，加入氯化钙溶液，37℃消化45分钟，每隔15分钟取出吹打，混匀；(2)将含组织块的消化产物过筛进行过滤：过滤前先用无血清培养基浸湿网筛，过滤时将含组织块的消化产物逐渐滴加过滤，过滤后用无血清培养基冲洗网筛，得到比较充分的组织块和单细胞悬液；(3)将组织块和单细胞悬液离心，培养，得脐带间充质干细胞。第3天已经有很多细胞，7～8天，生长迅速，细胞处于对数生长期，细胞融合度能达到95～100％。后期进行成肌/成脂诱导分化，原代细胞分化程度很高，且细胞状态良好。
一种脐带间充质干细胞分离方法

[发明专利]一种复合BMSCs的引导组织再生膜、补片及制备方法-CN201710886334.7在审
发明人：董玲娟;明磊国;李晓宁 -专利权人：东莞自然衡健康科技有限公司
申请日： 2017-09-27 - 公布日： 2019-04-02 - 主分类号： A61L31/16 文献下载
摘要：本发明属于妇产科技术领域，具体涉及一种复合BMSCs的引导组织再生膜、补片及制备方法，本发明为将生长期的BMSCs胰酶消化后制备单细胞悬液，取单细胞悬液均匀滴加到引导组织再生膜上，放入培养箱中培养即得复合骨髓间充质干细胞引导组织再生膜
引导组织再生膜制备单细胞悬液复合补片骨髓间充质干细胞分泌生长因子子宫内膜损伤生物相容性免疫调节胰酶消化子宫内膜妇产科培养箱微环境滴加放入内膜损伤血管修复治疗

[发明专利]一种脂多糖诱导肿瘤细胞生成肿瘤干细胞的用途和方法-CN201711146080.1在审
发明人：李晓华;杨思洁;连雪琪;江佳佳 -专利权人：张家港澳洋医院有限公司
申请日： 2017-11-17 - 公布日： 2018-04-13 - 主分类号： C12N5/095 文献下载
摘要：本发明公开了一种脂多糖诱导肿瘤细胞生成肿瘤干细胞的用途和方法，解决了现有技术难以获取符合药物的药效研究要求、数量足够且数量可控的肿瘤干细胞的问题。本发明的方法包括(1)获取悬浮的单个肿瘤细胞，接种于培养皿中进行单层贴壁细胞培养，培养过程中加入脂多糖培养4～10h；(2)添加胰蛋白酶消化，然后洗涤获得脂多糖处理后的单个肿瘤细胞；(3)将脂多糖处理后的单个肿瘤细胞与干细胞培养液混合获得细胞悬液；(4)细胞悬液经悬浮培养后获得肿瘤干细胞。本发明能够获得符合药物的药效研究要求的肿瘤干细胞，且诱导生成的肿瘤干细胞具有数量显著增加、数量可控等优点。
一种多糖诱导肿瘤细胞生成干细胞用途方法

[发明专利]一种用于检测电子烟制品对细胞脂质过氧化影响的方法-CN201710226543.9在审
发明人：管莹;夭建华;李雪梅;熊国行;米其利;高茜;朱洲海 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2017-04-09 - 公布日： 2017-12-12 - 主分类号： C12Q1/02 文献下载
摘要：本发明公开一种用于检测电子烟制品对细胞脂质过氧化影响的方法，包括如下步骤受试物前处理、人肺成纤维细胞单细胞悬液的制备、人肺成纤维细胞单细胞悬浮液细胞浓度计算、人肺成纤维细胞单细胞悬浮液的细胞接种、受试物分组本发明对样品的有效处理、检测剂量的优化设定以及靶细胞的正确选择，使得本方法能够准确有效的检测电子烟制品对细胞脂质过氧化影响。
一种用于检测电子制品细胞过氧化影响方法

[发明专利]一种大鼠原代生精细胞体外分离的方法-CN202110853124.4在审
发明人：周党侠;葛攀;张健;杨妍琪;吕茉琦 -专利权人：西安交通大学
申请日： 2021-07-27 - 公布日： 2021-11-16 - 主分类号： C12N5/076 文献下载
摘要：本发明公开了一种大鼠原代生精细胞体外分离的方法，采用的方案包括：1)取新鲜离体大鼠双侧睾丸，剥除被膜及血管，获得睾丸组织；2)将睾丸组织消化处理制备单细胞悬液；3)将单细胞悬液培养直至非生精细胞贴壁后，吸出未贴壁的悬浮细胞，对悬浮细胞采用Percoll法分离获得生精细胞。本发明为体外研究大鼠睾丸生殖功能奠定基础，该方法实现了体外分离和培养大鼠睾丸生精细胞，并证实这种方法分离和培养的生精细胞体外存活率高，且存活时间较长。利用该方法能获得正常的大鼠睾丸生精细胞，花费少，操作简单，可重复度高，能满足多种实验需求，值得大范围推广。
一种大鼠原代生精细体外分离方法