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[发明专利]多重PCR-CN02826595.5无效
发明人： M·法翰姆;E·A·纳姆萨拉伊夫;T·D·威利斯 -专利权人：帕拉里勒生物科学公司
申请日： 2002-11-19 - 公布日： 2005-11-16 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明提供了用于核酸扩增，特别是能使多重扩增反应中的副产物的生长和扩增最小化的组合物和方法。本发明提供了线性扩增分子。第一个实施方案包含第一通用引物序列、第一模板同源性区、可切割位点、第二通用引物序列和第二模板同源性区。本发明还提供了将线性扩增分子用于核酸扩增的方法。第一个实施方案包含模板特异性杂交、线性扩增、模板特异性分子内杂交、链切割、第二次线性扩增和使用通用引物的指数扩增。
多重 pcr

[发明专利]基于哑铃环模板的恒温滚环扩增方法-CN201911360205.X在审
发明人：安然;梁兴国;刘梦琴;周广庆;张伯颖 -专利权人：中国海洋大学
申请日： 2019-12-25 - 公布日： 2020-05-12 - 主分类号： C12Q1/6844 文献下载
摘要：本发明属于核酸扩增技术领域，具体涉及一种基于哑铃环模板的恒温滚环扩增方法，包括如下步骤：(1)制备哑铃环状DNA作为模板，所述哑铃环状DNA整体对称，两端为大小相等的环部区域，中间为完全互补的茎部区域；(2)将步骤(1)制备得到的模板加入到反应体系中进行超分支滚环扩增反应，反应得到的扩增产物自身形成二级结构。该基于哑铃环模板的恒温滚环扩增方法操作简单，在恒温条件下即可实现核酸扩增反应，在避免非特异性扩增的同时保证其高效扩增，提高扩增效率。
基于哑铃模板恒温扩增方法

[发明专利]一种用于寡核苷酸扩增的环形信号扩增模板及其应用-CN202110157264.8有效
发明人：黄庆;屈雪梅;苏宁;李文满;李博文;尚美云 -专利权人：中国人民解放军陆军特色医学中心
申请日： 2021-02-04 - 公布日： 2023-07-07 - 主分类号： C12Q1/6844 文献下载
摘要：本发明属于基因检测技术领域，具体涉及一种用于寡核苷酸扩增的环形信号扩增模板及其应用，所述环形信号扩增模板为两条与靶序列互补的片段通过缺口剂识别序列相互连接形成的闭环寡核苷酸。利用环形信号扩增模板与靶序列识别并杂交时，靶序列在DNA聚合酶的作用下延伸形成双链，在缺口酶的切割作用下形成一个缺口，继续延伸，置换出合成的新链，扩增的目的片段可用作后续扩增的模板，使靶序列通过“切割‑延伸‑链置换”自主链式循环实现靶分子的指数扩增。本发明的环形信号扩增模板无需要像PCR、LCR等反应所依赖的热循环过程；无需复杂的引物和探针，只需要一条简单的DNA模板链，设计简单，反应速度快，效率高，短时间内可以获得高达107以上的扩增。
一种用于寡核苷酸扩增环形信号模板及其应用

[发明专利]一种利用限制性内切酶处理DNA模板以增进DNA扩增效率的方法-CN200710057926.4无效
发明人：孟良玉;李静;阎大伟;张治洲 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2007-07-03 - 公布日： 2008-01-30 - 主分类号： C12N15/09 文献下载
摘要：本发明涉及一种应用限制性内切酶处理DNA模板以增进聚合酶链式反应扩增效率的方法，该方法采用限制性内切酶处理DNA模板，通过对待扩增DNA模板的酶切实现对难以扩增的DNA片段的有效扩增，从而提高目的DNA片段的扩增特别是高GC含量片段的扩增，且效果明显，使用简便，易于掌握，较好地解决了某些目的DNA片段扩增效率不高或不易扩增的关键问题。
一种利用限制性内切酶处理 dna 模板增进扩增效率方法

[发明专利]同步进行DNA正义链和反义链测序的方法-CN202080087320.9在审
发明人：龚梅花;刘生茂;徐崇钧;周爽;王静静;李计广;韦小芳;蒋慧;刘健 -专利权人：深圳华大智造科技股份有限公司
申请日： 2020-01-17 - 公布日： 2022-08-02 - 主分类号： C12Q1/6869 文献下载
摘要：一种同步进行DNA正义链和反义链测序的方法，包括：以待测序的环状DNA分子为模板进行第一轮滚环扩增生成第一部分模板链；在第一部分模板链上杂交上阻断或未阻断的扩增引物，然后继续以环状DNA分子为扩增模板进行第二轮滚环扩增生成第二部分模板链；以第一部分模板链和第二部分模板链中的任一部分模板链作为一链测序模板，以另一部分模板链为扩增模板进行多重置换扩增生成二链测序模板；分别在一链测序模板和二链测序模板上杂交上一链测序引物和二链测序引物，同时进行一链测序和二链测序
同步进行 dna 正义反义链测序方法

[发明专利]用于等温DNA扩增的方法和组合物-CN202080045635.7在审
发明人：赫尔本·卡罗尔森·马蒂纳斯·宗达格;布拉姆·约翰内斯·特尼斯;纳韦尔·亚历杭德罗·保利诺 -专利权人：辛沃鲁克斯IP有限公司
申请日： 2020-04-23 - 公布日： 2022-02-18 - 主分类号： C12Q1/6844 文献下载
摘要：本发明涉及用于扩增DNA模板的方法，包括在核糖核苷酸存在下用DNA依赖性RNA聚合酶培养DNA模板，和通过链置换DNA聚合酶扩增DNA模板。本发明还涉及RNA聚合酶用于在DNA模板上产生核糖核苷酸引物然后通过链置换DNA聚合酶扩增DNA模板的用途，以及部件试剂盒，包括RNA聚合酶和链置换DNA依赖性DNA聚合酶，以及部件试剂盒用于扩增DNA模板的用途。
用于等温 dna 扩增方法组合

[发明专利]一步逆转录模板转换PCR-CN201780037392.0在审
发明人：城口克之 -专利权人：国立研究开发法人理化学研究所
申请日： 2017-06-23 - 公布日： 2019-02-12 - 主分类号： C12Q1/686 文献下载
摘要：本发明提供了用于更快、更容易，且具有高特异性地进行一步逆转录模板转换PCR的技术。本发明提供了使用经修饰的寡核苷酸引物扩增RNA的至少一部分区域的核酸扩增方法，所述核酸扩增方法的特征如下：核酸扩增反应包括逆转录步骤a)，其中RNA用作模板，模板转换步骤b)，其中将模板转换寡核苷酸加入到步骤a)中合成的cDNA中，和DNA扩增步骤c)，其中通过PCR进行DNA扩增，其中步骤b)中合成的模板转换cDNA用作模板；步骤a)至c)在同一反应体系中的单个阶段中进行；该经修饰的寡核苷酸在逆转录步骤a)中引物功能部分地封闭或完全地封闭，并在DNA扩增步骤c)中清除引物功能的封闭。
模板转换逆转录寡核苷酸核酸扩增引物修饰封闭合成寡核苷酸引物核酸扩增反应扩增

[发明专利]一种切克酶介导等温扩增小分子信标定量检测技术-CN201510426823.5有效
发明人：许文涛;黄昆仑;王晨光;翟百强;罗云波;朱鹏宇;徐瑗聪 -专利权人：北京福德安科技有限公司;中国农业大学
申请日： 2015-07-20 - 公布日： 2019-01-22 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：本发明公开了一种切克酶介导等温扩增小分子信标定量检测技术。本发明综合了切克酶介导等温扩增技术和分子信标定量技术，主要包括样品基因组的提取，实时荧光PCR反应和信号检测。本发明在切克酶介导等温扩增过程中加入设计好的小分子信标，随着模板DNA/RNA的扩增，小分子信标不断退火结合到模板上释放荧光信号，释放的荧光信号累积形成模板扩增曲线。依据标准浓度模板的扩增曲线绘制标准曲线，从而确定待测模板是否为目的产物及其含量。本发明将小分子信标应用到等温扩增中，达到准确定量目的，简化了操作步骤，提高效率，且实现了待检样品的实时检测，增加结果特异性和灵敏度。
一种切克酶介导等温扩增分子信标定量检测技术

[发明专利]基于微滴的多重置换扩增(MDA)方法及相关组合物-CN201680059825.8在审
发明人： A·R·阿贝特;F·兰;S·李;A·希多 -专利权人：加利福尼亚大学董事会
申请日： 2016-08-16 - 公布日： 2018-07-31 - 主分类号： C12Q1/6827 文献下载
摘要：本发明提供了用于非特异性地扩增核酸模板分子的方法。所述方法可用于扩增一个或多个核酸模板分子，以用于测序，例如对不可培养的微生物的基因组测序或测序以鉴别癌细胞中的拷贝数变异。所公开方法的各方面可包括非特异性地扩增核酸模板分子，包括将从生物样品获得的核酸模板分子囊封在微滴中；将多重置换扩增(MDA)试剂和多个MDA引物引入到所述微滴中；以及在有效产生MDA扩增产物的条件下孵育所述微滴，其中所述孵育由所述核酸模板分子有效地产生MDA扩增产物。
微滴核酸模板多重置换扩增扩增产物扩增核酸模板分子测序孵育异性基因组测序生物样品分子囊拷贝数有效地癌细胞可用扩增引物微生物鉴别引入

[发明专利]传感装置及方法-CN201380038217.5有效
发明人： Z·安萨里;K·阿明;G·乔根森;K·科尔布;D·摩尔利;A·帕特尔;S·里德;L·涉泊德;C·陶马祖 -专利权人： DNA电子有限公司
申请日： 2013-07-18 - 公布日： 2017-04-12 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明提供一种传感装置，该传感装置包括芯片，该芯片用于样品中的模板多核苷酸的集成扩增和测序。该装置包括具有在一个阱或室中至少一个ISFET的芯片，扩增装置，该扩增装置用于在所述芯片的表面上扩增所述模板多核苷酸并且包括至少一个加热装置，所述加热装置适于在高于室温的温度下引导模板多核苷酸的扩增，以及测序装置，该测序装置用于对在所述阱或室中的扩增模板寡核苷酸进行测序。
传感装置方法

[发明专利]一种提升基因克隆效率的方法-CN201210136763.X在审
发明人：施晓峰;丁少雄;王军;苏永全 -专利权人：厦门大学
申请日： 2012-05-04 - 公布日： 2012-09-12 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：于目标基因中间片段设计1对特异性引物；对RACE过程中不同来源的模板进行特异性PCR扩增；扩增产物经1.5%琼脂糖电泳分析，检测产物阳性条带存在与否及其亮度，从而确定RACE待扩增模板中目标基因的拷贝数水平，并确定RACE过程中各酶促反应步骤的效率，获得最适的用以5’RACE扩增的模板，最终达到提高靶基因扩增成功率的目的。是一种通过快速、灵敏地检测不同来源模板中目的基因有效拷贝数，高效地选择出RACE扩增最适模板和条件的一种方法。
一种提升基因克隆效率方法

[发明专利]核酸扩增的对照的检测方法及其用途-CN200980124610.X无效
发明人：平井光春;间嶋智史;中嶋真也;镰田达夫 -专利权人：爱科来株式会社
申请日： 2009-12-16 - 公布日： 2011-05-25 - 主分类号： C12N15/09 文献下载
摘要：在对照检测用的反应体系中添加对照用模板核酸进行扩增反应。上述模板核酸能够通过能够扩增目的标的序列的引物进行扩增，在利用上述引物扩增的上述对照用模板核酸的扩增区域中，能够与上述标的序列杂交的检测用探针能够进行杂交，利用上述引物扩增的上述对照用模板核酸的扩增区域和上述检测用探针的由此，通过在上述TmC有无峰能够确认反应体系中扩增的进行，并且通过在TmC以外有无峰能够确认反应体系中不需要的核酸的混入。
核酸扩增对照检测方法及其用途

[发明专利]使用切口酶的解旋酶依赖性等温扩增-CN201710107030.6在审
发明人：克里斯蒂安·科夫哈格;戈尔德·格洛豪瑟;托马斯·罗特曼;拉尔夫·希默尔赖希 -专利权人：凯杰有限公司
申请日： 2011-08-16 - 公布日： 2017-08-04 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及使用切口酶的解旋酶依赖性等温扩增。具体而言，本发明涉及用于扩增模板核酸的方法，其中所述方法包括在切口核酸内切酶存在下使用解旋酶依赖性扩增(HDA)反应扩增所述模板核酸，并且其中所述模板核酸包含由所述切口核酸内切酶识别的序列，或者在HDA反应期间由所述切口核酸内切酶识别的序列被引入到模板核酸中。本发明还涉及用于扩增核酸的试剂盒，所述试剂盒包含切口核酸内切酶、解旋酶和DNA聚合酶。
使用切口解旋酶依赖性等温扩增

[发明专利]使用切口酶的解旋酶依赖性等温扩增-CN201180039588.6在审
发明人：克里斯蒂安·科夫哈格;戈尔德·格洛豪瑟;托马斯·罗特曼;拉尔夫·希默尔赖希 -专利权人：凯杰有限公司
申请日： 2011-08-16 - 公布日： 2013-05-15 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及用于扩增模板核酸的方法，其中所述方法包括在切口核酸内切酶存在下使用解旋酶依赖性扩增（HDA）反应扩增所述模板核酸，并且其中所述模板核酸包含由所述切口核酸内切酶识别的序列，或者在HDA反应期间由所述切口核酸内切酶识别的序列被引入到模板核酸中本发明还涉及用于扩增核酸的试剂盒，所述试剂盒包含切口核酸内切酶、解旋酶和DNA聚合酶。
使用切口解旋酶依赖性等温扩增

[发明专利]模板核酸的分析方法、靶物质的分析方法、模板核酸或靶物质的分析用试剂盒及模板核酸或靶物质的分析用装置-CN201680050335.1在审
发明人：田中佑治;林崎良英;辻丸光一郎 -专利权人：达纳福股份有限公司
申请日： 2016-08-26 - 公布日： 2018-05-11 - 主分类号： C12Q1/686 文献下载
摘要：本发明的模板核酸的分析方法的特征在于，包含如下工序：含有模板核酸的样品的分级工序；在核酸扩增试剂的存在下进行所述模板核酸中的靶序列及其互补序列的扩增的扩增工序；检测表示所述靶序列或所述互补序列的扩增的信号的产生或消失的检测工序；以及，将检测出表示所述扩增的信号的产生或消失的模板核酸级分判别为所述靶序列或所述互补序列被扩增的扩增级分的判别工序，所述核酸扩增试剂含有扩增所述靶序列及所述互补序列的引物组和通过所述扩增而产生信号或信号消失的信号产生物质
模板核酸分析方法物质试剂盒装置

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