[发明专利]核酸扩增的对照的检测方法及其用途

摘要

本发明的目的在于提供一种在一个反应体系中简便地同时检测阳性对照和阴性对照的对照检测方法。在对照检测用的反应体系中添加对照用模板核酸进行扩增反应。上述模板核酸能够通过能够扩增目的标的序列的引物进行扩增，在利用上述引物扩增的上述对照用模板核酸的扩增区域中，能够与上述标的序列杂交的检测用探针能够进行杂交，利用上述引物扩增的上述对照用模板核酸的扩增区域和上述检测用探针的Tm值(TmC)设定为与上述标的序列和上述检测用探针的Tm值(TmA)不同的值。由此，通过在上述TmC有无峰能够确认反应体系中扩增的进行，并且通过在TmC以外有无峰能够确认反应体系中不需要的核酸的混入。

主权项

一种对照检测方法，检测在反应体系中对检测体核酸的标的序列进行扩增时显示所述反应体系的扩增性能的对照，其特征在于：所述对照是显示反应体系中发生扩增反应的阳性对照和显示反应体系中混入不需要的核酸的阴性对照，所述反应体系中含有引物、检测用探针和对照用模板核酸，所述引物是能够对所述标的序列进行扩增的引物，所述检测用探针是能够与所述标的序列杂交的探针，所述对照用模板核酸能够利用所述引物进行扩增，利用所述引物扩增的所述对照用模板核酸的扩增区域中，所述检测用探针能够进行杂交，所述对照用模板核酸的扩增区域和所述检测用探针的Tm值(TmC)是与所述标的序列和所述检测用探针的Tm值(TmA)不同的值，所述对照检测方法包括下述(a1)～(a3)工序，在一个反应体系中检测所述阳性对照和所述阴性对照：(a1)扩增工序，在所述反应体系中，使用所述引物，进行所述对照用模板核酸的扩增，(a2)分析工序，使用所述(a1)工序的所述反应体系，在所述检测用探针的存在下，进行解链曲线分析，(a3)判断工序，通过所述解链曲线中的峰，判断所述阳性对照和所述阴性对照分别为阳性还是阴性。