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[发明专利]先天性晶状体不全脱位的靶基因二代测序panel及测序方法-CN202211257091.8在审
发明人：陈泽旭;蒋永祥;贾婉楠;窦同海;陈诚文;陈雯烨 -专利权人：复旦大学附属眼耳鼻喉科医院;上海昂朴生物科技有限公司
申请日： 2022-10-14 - 公布日： 2022-12-20 - 主分类号： C12Q1/6883 文献下载
摘要：本发明公开了一种先天性晶状体不全脱位的靶基因二代测序panel，包括41个基因。本发明还公开了使用所述的靶基因二代测序panel进行的先天性晶状体不全脱位的靶基因二代测序方法。本发明设计了新的专用于先天性晶状体不全脱位CEL的靶基因二代测序panel，设计的panel具有针对性强、准确性高等特点，并且，通过挑选出41个靶基因组合成了panel，降低了测序成本，提高了测序深度。
先天性晶状体不全脱位基因二代 panel 方法

[发明专利]利用CRISPR-Cas9系统制得基因点突变动物模型胚胎的靶序列组、载体和方法-CN201811640522.2有效
发明人：黎肖容;郑生华;陈清清;毛润媛;喻潇 -专利权人：广州赛业百沐生物科技有限公司
申请日： 2018-12-29 - 公布日： 2022-08-16 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种利用CRISPR‑Cas9系统制得基因点突变动物模型胚胎的靶序列组、载体和方法。本发明方法，包括：目标基因的sgRNA设计；Donor oligo设计；sgRNA表达质粒对的构建；体外转录；原核注射及胚胎移植。本发明方法通过对CRISPR/Cas9系统进行优化，一步获得目标基因点突变小鼠，为目标基因的研究节省时间和成本。同时也给一些致死基因的模型构建提供了一种有效的，节省时间和成本的方法。
利用 crispr cas9 系统基因突变动物模型胚胎序列载体方法

[发明专利]青藏高原野生大麦HsCIPK5基因-CN201010601570.8无效
发明人：潘建伟;王文祥;郑仲仲;马伯军 -专利权人：浙江师范大学
申请日： 2010-12-23 - 公布日： 2011-08-31 - 主分类号： C12N15/29 文献下载
摘要：本发明公开了青藏高原野生大麦HsCIPK5基因，其特征在于，其由SEQ ID NO：1的核苷酸序列定义。本发明利用水稻OsCIPK同源基因序列设计电子探针，从已有的各种大麦核苷酸序列库如EST库中搜索同源片段，然后用聚类分析和电子拼接等方法，获取目标基因编码序列(coding sequence，CDS)。运用生物信息学方法对目标基因进行结构分析和功能预测。提取野生大麦总RNA，制备cDNA和设计PCR引物，通过PCR技术克隆目标基因。对所获得的目标基因进行TA克隆、测序和序列分析。
青藏高原野生大麦 hscipk5 基因

[发明专利]青藏高原野生大麦HsCIPK5基因-CN201110321520.9无效
发明人：潘建伟;王文祥;郑仲仲;沈金秋;马伯军 -专利权人：浙江师范大学
申请日： 2011-10-21 - 公布日： 2012-04-04 - 主分类号： C12N15/54 文献下载
摘要：本发明公开了青藏高原野生大麦HsCIPK5基因，其特征在于，其由SEQ ID NO：1的核苷酸序列定义。本发明利用水稻OsCIPK同源基因序列设计电子探针，从已有的各种大麦核苷酸序列库如EST库中搜索同源片段，然后用聚类分析和电子拼接等方法，获取目标基因编码序列(coding sequence，CDS)。运用生物信息学方法对目标基因进行结构分析和功能预测。提取野生大麦总RNA，制备cDNA和设计PCR引物，通过PCR技术克隆目标基因。对所获得的目标基因进行TA克隆、测序和序列分析。
青藏高原野生大麦 hscipk5 基因

[发明专利]一种获得辣椒疫病抗性候选基因及分子标记的方法及应用-CN201410811975.2在审
发明人：刁卫平;王述彬;刘金兵;潘宝贵;戈伟;郭广君;高长洲 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2014-12-24 - 公布日： 2015-04-29 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：一种获得辣椒疫病抗性候选基因及分子标记的方法及应用，该方法是一种利用辣椒疫病转录组和全基因组测序数据信息、差异表达基因鉴定、生物信息学分析、分子标记开发以及疫霉菌接种鉴定来获得辣椒疫病抗病候选基因，属于辣椒生物技术领域该方法包括辣椒高抗、高感疫病材料构建的F₂群体接种疫霉菌后获得的疫病抗、感基因池转录组测序、差异基因表达分析和功能注释、辣椒疫病高抗、高感材料基因组DNA提取、引物设计和PCR扩增、序列差异分析和SNP位点鉴定、SNP特异引物设计及有效性验证等步骤，高效的获得辣椒疫病抗性候选基因及分子标记。该发明可以精准地鉴定出辣椒疫病抗性候选基因及开发有效的分子标记。
一种获得辣椒疫病抗性候选基因分子标记方法应用

[发明专利]一种凝血因子基因突变的定点修复载体系统及方法-CN201610005683.9在审
发明人：李大力;关玉婷;王立人;刘明耀 -专利权人：华东师范大学
申请日： 2016-01-05 - 公布日： 2016-05-11 - 主分类号： C12N15/861 文献下载
摘要：本发明公开一种对凝血因子F8/F9进行原位修复的方法，包括：在目标基因组序列中，选定凝血因子基因的突变位点为原位修复的基因位点；设计CRISPR/Cas系统的sgRNA序列的核酸酶的结合位点；设计用于原位修复的同源重组修复供体序列；将核酸酶蛋白和/或sgRNA、所述同源重组修复供体的核酸序列通过递送载体输送至原位修复的基因位点中；通过核酸酶在所述基因原位修复位点造成基因组DNA损伤；所述同源重组供体序列插入到所述基因原位修复位点内，修复基因或补充基因的表达。
一种凝血因子基因突变定点修复载体系统方法

[发明专利]西瓜ClCP2基因的启动子及其制备方法和应用-CN201510988242.0在审
发明人：阳永学;祝菊红;杨洁;赵志远;李其友;张安华;王萍 -专利权人：武汉市农业科学研究所
申请日： 2015-12-22 - 公布日： 2016-03-23 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明公开了西瓜ClCP2基因的启动子的制备方法及其应用，包括1、根据西瓜全基因组测序获得的ClCP2基因上游2kb左右的序列设计1对引物进行PCR扩增，扩增西瓜的ClCP2基因5′上游启动子序列；2、根据西瓜全基因组测序获得的ClCP2基因5′上游2kb左右序列设计引物，利用CTAB法提取西瓜叶片基因组DNA，以此为模板进行PCR扩增，凝胶回收试剂盒纯化回收后，连接到pMD18-T载体，热激法转化大肠杆菌DH5α菌株的感受态细胞，挑取阳性克隆，PCR检测阳性克隆和酶切验证后测序，得到ClCP2基因上游2014bp的侧翼序列。该启动子在西瓜转基因安全性等方面，具有良好的应用潜力。
西瓜 clcp2 基因启动子及其制备方法应用

[发明专利]TALENs介导的奶山羊成纤维细胞基因敲除和基因定点插入的方法-CN201510978161.2在审
发明人：李雪玲;刘慧;刘畅;崔思朋;赵宇航 -专利权人：内蒙古大学
申请日： 2015-12-23 - 公布日： 2016-11-16 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明公开了TALENs介导的奶山羊成纤维细胞基因敲除和基因定点插入的方法，其是根据奶山羊CSN2基因序列，获得针对第二外显子的TALENs表达载体，并根据TALENs作用位点设计含有外源基因的且可以整合至宿主基因组中的打靶载体，然后将上述TALENs表达载体和打靶载体共同转入奶山羊成纤维细胞中，获得CSN2基因敲除且定点整合外源基因的细胞。TALENs技术具有实验设计简单准确、实验周期短、成本低、成功率高、脱靶情况少等优点。利用本方法可以快速获得双等位基因整合的细胞克隆，细胞不经过药物筛选，提高了所获得体细胞的核移植和胚胎发育质量，不含有抗性基因，大大简化了生物安全评价。
talens 山羊纤维细胞基因定点插入方法

[发明专利]用于基因突变高深度测序的基因芯片及其制备方法和应用-CN201811287028.2在审
发明人：王春丽;蔡宇航;师妍;杨颖;陈希;刘军 -专利权人：深圳华大基因股份有限公司;天津华大医学检验所有限公司;广州华大基因医学检验所有限公司
申请日： 2018-10-31 - 公布日： 2020-05-08 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：本申请公开了一种用于基因突变高深度测序的基因芯片及其制备方法和应用。本申请的基因芯片制备方法，包括根据不同的突变类型，结合基因突变在线数据库和本地数据库，构建捕获区间库；由捕获区间库设计基因芯片，提高捕获质量和效率，实现高深度测序；突变类型包括单核苷酸变异、插入缺失突变本申请的基因芯片制备方法，能够最大程度的覆盖突变人群，最大程度的覆盖癌症及其相关基因，设计出更加适应于中国人群的基因芯片。本申请的基因芯片测序深度高，特别适用于血液中极其微量的循环DNA的检测。
用于基因突变深度基因芯片及其制备方法应用

[发明专利]一种能够实现碱基颠换的CGBE单碱基编辑器及其应用-CN202310703968.X在审
发明人：李娟;许蓉芳;秦瑞英;谷东方;卞士权;章潇 -专利权人：安徽省农业科学院水稻研究所
申请日： 2023-06-14 - 公布日： 2023-09-12 - 主分类号： C12N15/62 文献下载
摘要：本发明设计合成了鳕鱼来源的尿嘧啶糖基化酶基因cUNG，融合大鼠来源的胞嘧啶脱氨酶基因rAPO的突变体APOEE以及失活的Cas9蛋白基因nSpCas9，组合成为APOEE‑nCas9‑cUNG基因，该基因可以实现并且本发明还提供包括APOEE‑nCas9‑cUNG基因的表达盒和一种表达载体，以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用设计的APOEE‑nCas9‑cUNG基因构建植物表达载体，进而构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的单碱基替换，特别是实现高效率的C‑G碱基颠换。
一种能够实现碱基 cgbe 编辑器及其应用

[发明专利]一种2型糖尿病相关位点检测方法-CN200810044163.4有效
发明人：陈奕雄;赵翊均 -专利权人：上海基康生物技术有限公司
申请日： 2008-12-22 - 公布日： 2010-06-23 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及一种2型糖尿病相关位点检测方法，包括步骤：提取来自人的样本的基因组DNA；根据两个2型糖尿病相关基因的序列设计二对引物对，对基因组DNA进行PCR扩增，回收PCR扩增产物；对PCR扩增产物进行测序，并分析测序结果来判断两个2型糖尿病相关基因是否发生突变，较佳的，所述两个2型糖尿病相关基因是PRKCZ基因和CAPN10基因，二对引物对分别用于检测PRKCZ基因的rs427811位点，及CAPN10基因的rs3792267位点，本发明的2型糖尿病相关位点检测方法设计巧妙、操作简单、检测结果准确可靠，为是否进一步采取有针对性的健康管理以及后续的检测手段提供参考依据。
一种糖尿病相关检测方法

[发明专利]甘蓝型油菜BnCP51启动子及制备方法和应用-CN201210090345.1有效
发明人：刘胜毅;阳永学;董彩华;刘婷婷;黄军艳;李振波;刘越英 -专利权人：中国农业科学院油料作物研究所
申请日： 2012-03-30 - 公布日： 2012-08-15 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：其步骤： A、根据油菜全基因组测序获得的BnCP51基因上游2kb序列设计引物进行PCR，获得油菜BnCP51的5’上游启动子序列；B、根据油菜全基因组测序获得的BnCP51的5’上游2kb序列设计引物，提取油菜叶片基因组DNA，进行PCR扩增，纯化回收后，连接到pMD18-T载体，转化感受态细胞，挑取阳性克隆，PCR检测阳性和酶切验证后测序，得到目的基因上游2kb侧翼序列，为PBnCP51。PBnCP51在油菜花药、花粉粒中高效表达，提高外源基因在转基因植物中的表达效率，可用于植物的基因工程研究和籽用油菜安全转基因研究。
甘蓝油菜 bncp51 启动子制备方法应用

[发明专利]一种基于CRISPR-Cas13a的抑制真核细胞中基因表达水平的方法及其应用-CN201711349268.6有效
发明人：聂广军;赵潇 -专利权人：国家纳米科学中心
申请日： 2017-12-15 - 公布日： 2021-01-29 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：涉及基因工程领域，具体公开了一种基于CRISPR‑Cas13a的抑制真核细胞中基因表达水平的方法及其应用。通过设计并合成与目的基因mRNA中某段序列互补的向导RNA，与Cas13a蛋白形成Cas13a‑向导RNA复合物；在真核细胞中，该复合物在向导RNA的引导下，与序列互补的目的基因mRNA结合并激活Cas13a蛋白的RNA降解活性，从而引起目的基因mRNA的降解和表达水平抑制。另外，通过向导RNA的位置筛选，以及人为添加错配的方式，该方法可以高效并特异性抑制单碱基突变的癌基因表达水平，同时不影响野生型基因表达。通过向导RNA设计，本方法可用于真核细胞中的基因表达沉默以及单碱基突变的癌基因表达特异性抑制，具有特异性高、稳定准确、简便快速的特点。
一种基于 crispr cas13a 抑制真核细胞基因表达水平方法及其应用

[发明专利]一种基因定点敲入载体构建方法、系统及平台-CN202011537705.9有效
发明人：高翠;白颖 -专利权人：广州赛业百沐生物科技有限公司
申请日： 2020-12-23 - 公布日： 2021-11-02 - 主分类号： G16B20/50 文献下载
摘要：本发明属于生物信息领域，具体涉及一种基因定点敲入载体构建方法、系统及平台。本发明通过获取待敲入基因原始数据信息，并创建与所述待敲入基因相对应的骨架，构建载体敲入模型；实时获取待插入序列数据，定点将待敲入基因同源臂序列、外源基因和一些功能元件按设计规则有序敲入载体，以及与方法相对应的系统及平台，可以实现外源基因的定点敲入，使遗传背景更为简单，实验操作更加精准、高效，而且比传统操作更简单，设计上更灵活，成本更低，周期也更短。并且通过基因的定点敲入为未来靶向基因治疗提供了可能，将功能缺失的DNA片段修复为有功能的DNA片段，即可实现基因治疗的目的，同时可以大大提高产出，解放人力，提高工作效率。
一种基因定点载体构建方法系统平台

[发明专利]一种扩增儿童个体化用药基因位点用引物组、检测用引物组及其应用-CN202110199134.0有效
发明人：马凯;高丽娟;田彦捷;胡丹丹;刘清珺;夏勇其;魏颖;朱博兰 -专利权人：北京市理化分析测试中心
申请日： 2021-02-22 - 公布日： 2023-09-26 - 主分类号： C12Q1/6883 文献下载
摘要：本发明提供了一种扩增儿童个体化用药基因位点用引物组、检测用引物组及其应用，属于基因检测技术领域。扩增儿童个体化用药基因位点用引物组及单碱基延伸引物是针对122种药物、32种药物有效成分的31个用药相关基因的42个SNP位点进行设计得到。扩增用引物组及其与单碱基延伸引物形成的检测用引物组或其制备的试剂盒在检测儿童个体化用药基因位点多态性中的应用。本发明提供的检测用引物组涵盖儿童常用药种类、药品有效成分多，涵盖的基因、SNP位点数量多，基因位点的置信等级高，是针对中国人自己的基因数据库进行基因位点设计和优化，具有检测灵敏度高、效率高、通量高的特点
一种扩增儿童个体化用药基因位点用引物检测及其应用