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[发明专利]利用原位合成微流体芯片检测转基因番茄的方法-CN201310215315.3有效
发明人：冯俊丽;王凤军;梁彦君 -专利权人：浙江理工大学
申请日： 2013-05-31 - 公布日： 2013-09-11 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用原位合成微流体芯片检测转基因番茄的方法，包括以下步骤：1）、转基因番茄外源基因检测的芯片探针的设计；2）、制备寡聚核苷酸芯片；3）、待测番茄样品中基因组DNA的提取；4）、基因组特定片段或整个基因组荧光标记；5）、芯片杂交；6）、判定样品是否为转基因番茄品种。本发明根据已公开报道的所有已知番茄外源基因序列信息设计了寡聚核苷酸探针，并用原位合成方法制备微流体基因芯片，以实现在一张芯片上同时检测与抗虫、抗病毒、抗除草剂、延熟、抗软化和耐储等相关的外源基因存在情况从而为番茄及其深加工产品转基因成分的快速检测和鉴定提供了有效方法，为建立健全转基因检测体系和监管制度提供依据。
利用原位合成流体芯片检测转基因番茄方法

[发明专利]检测基因点突变的液相芯片和方法-CN201110334842.7有效
发明人：程昌明 -专利权人：上海生物芯片有限公司
申请日： 2011-10-28 - 公布日： 2013-05-15 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种检测基因点突变的液相芯片，包括：针对基因突变位点设计的引物对、微球、以及信号报告分子，该引物对中，正向引物3’端最后一个碱基与待检测基因突变位点的碱基互补，与野生型基因不互补，该正向引物序列中还人工引入的一个与突变型和野生型基因均不互补的碱基，该正向引物与微球通过连接臂相连接；反向引物与突变型基因完全互补，其5’端标记有信号报告分子。本发明还公开了检测基因点突变的方法，包括步骤：针对基因突变位点设计上述引物对；用该引物对在油包水乳液中对待检测突变基因进行扩增；检测微球表面的荧光信号。本发明检测基因点突变的液相芯片和方法，显著提高了大量野生型基因背景下低丰度基因点突变的检测灵敏度。
检测基因突变芯片方法

[发明专利]香樟延伸因子CcEF1a基因片段序列及克隆方法-CN201410529725.X在审
发明人：杜丽;李勇鹏;姚瑶;张力维 -专利权人：南阳师范学院
申请日： 2014-10-10 - 公布日： 2015-02-18 - 主分类号： C12N15/29 文献下载
摘要：本发明公开了香樟延伸因子CcEF1a基因片段序列及克隆方法，基于对NCBI已经登录的其他物种EF1a基因cDNA全长进行分析的基础上，根据其基因序列的保守区域设计简并引物，以香樟叶片中总RNA反转录的cDNA第一链为模板，用常规PCR进行体外扩增，获得香樟CcEF1a基因片段的cDNA序列。设计相应的qRT-PCR引物，测序检测其扩增产物的特异性，建立了基于SYBR GreenI染料技术的qRT-PCR方法，从而为香樟CcEF1a基因作为内参基因，为利用qRT-PCR技术研究香樟其它功能基因或逆境相关基因提供有效的方法
香樟延伸因子 ccef1a 基因片段序列克隆方法

[发明专利]乙肝L基因和结核Ag85B融合基因及其表达载体的构建与应用-CN200910037758.1无效
发明人：李君武 -专利权人：李君武
申请日： 2009-03-11 - 公布日： 2009-08-19 - 主分类号： C12N15/62 文献下载
摘要：本发明公开了一种乙肝病毒全包膜L基因与结核杆菌Ag85B的融合抗原基因及其构建和表达方法。该融合基因的真核表达载体pVLA的构建和表达：根据乙肝病毒全包膜L基因设计1对扩增乙肝病毒全包膜L基因的引物，根据结核杆菌Ag85B基因的编码序列设计1对扩增Ag85B基因的引物；重组质粒pVL的构建；本发明融合抗原基因及其真核表达载体和表达蛋白质均可用于制备乙肝和结核的联合DNA疫苗。
乙肝基因结核 ag85b 融合及其表达载体构建应用

[发明专利]东方田鼠特异DNA序列-CN00126606.3无效
发明人：胡维新;杨榕;彭兴华 -专利权人：湖南医科大学
申请日： 2000-09-26 - 公布日： 2004-02-04 - 主分类号： C12N15/12 文献下载
摘要：本发明公开了一种东方田鼠特异DNA序列，该序列为抗日本血吸虫相关基因序列。依据小鼠H2外显子2及其两侧序列，设计引物，扩增东方田鼠基因组DNA，将扩增产物测序后设计合成内引物再进行东方田鼠基因组DNA体外扩增，得到特异性扩增带并进行序列分析，证实抗日本血吸虫相关基因序列只存在于东方田鼠基因组利用该相关基因序列可进行基因分型、物种鉴定、分子遗传学标志确定，并对抗日本血吸虫的基因药物生产具有重要应用价值。
东方田鼠特异 dna 序列

[发明专利]一种用于检测KIAA1549-BRAF融合基因的荧光原位杂交探针及其制备方法和应用-CN201811346321.1有效
发明人：吕玉琦;李先洋;李倩;李雪梅;叶伦;程弘夏;陈刚 -专利权人：武汉康录生物技术股份有限公司
申请日： 2018-11-13 - 公布日： 2019-08-09 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：本发明属于分子生物学领域，具体涉及一种用于检测KIAA1549‑BRAF融合基因的荧光原位杂交探针及其制备方法和应用。所述荧光原位杂交探针包含两个探针库，KIAA1549基因杂交探针库：探针的起始位置设计在KIAA1549基因断裂点左右各200Kb范围内，探针向着丝粒方向延伸，探针的长度为300～1000Kb；BRAF基因杂交探针库：探针的起始位置设计在BRAF基因断裂点左右各200Kb范围内，探针向端粒方向延伸，探针的长度为300～1000Kb。本发明在两个融合基因外区域分别设计探针，实现了在同一条染色体上两个距离比较近的融合基因检测，能够在细胞水平上很直观的反应两个基因的融合状态。
探针融合基因荧光原位杂交探针制备方法和应用方向延伸检测分子生物学领域基因断裂基因杂交距离比较细胞水平杂交探针断裂点染色体端粒丝粒直观基因融合

[发明专利]预防对虾白斑综合症病毒二价DNA疫苗的制作法及应用-CN201510575082.7有效
发明人：张娜;马新华;龙阳;谢艳辉;袁俊杰;刘骁;杨劲;李红权;徐金龙;孙良娟 -专利权人：湛江出入境检验检疫局检验检疫技术中心
申请日： 2015-09-10 - 公布日： 2019-01-01 - 主分类号： A61K48/00 文献下载
摘要：本发明预防对虾白斑综合症病毒二价DNA疫苗的制作法及应用在引物设计时进行在上、下游引物两端分别加上两个酶切位点，使克隆得到的抗原基因VP19和VP28带有双酶切位点；在进行双酶切时，使目的基因获得粘性末端，再用DNA连接酶将抗原基因VP19和VP28串联克隆至原核表达载体，用以进行原核表达载体；在构建二价DNA疫苗时，需要进行VP19基因改造，即通过引物设计，去除VP19基因的终止密码子；由于在进行引物设计时，VP19基因下游的酶切位点和VP28上游的酶切位点是同一个，所以通过酶切技术，可以使VP19基因和VP28基因串联克隆。
预防对虾白斑综合症病毒二价 dna 疫苗制作应用

[发明专利]抗肝癌基因药物组合物、小分子干扰RNA及其筛选方法-CN200410016210.6无效
发明人：周庆玮;张倩;朱俊;潘巍;金由辛;甘人宝;李载平 -专利权人：中国科学院上海生命科学研究院
申请日： 2004-02-11 - 公布日： 2005-08-17 - 主分类号： A61K48/00 文献下载
摘要：本发明提供一种抗肝癌基因药物组合物，包含安全、有效量的反义fup1基因和/或小分子干扰RNA，及药学上可接受的辅剂。其中所述反义fup1基因具有序列表中SEQ IDNO：2所示DNA序列，所述小分子干扰RNA包含序列表中SEQ ID NO：3所示RNA序列。还提供采用ambion网站提供的RNAi设计软件，针对fup1的编码区设计小分子干扰RNA的抗肝癌基因药物筛选方法。进一步提供包含序列表中SEQ IDNO：3所示RNA序列的抗肝癌小分子。本发明以在肝癌细胞中高表达的基因fup1为药靶，针对其基因序列设计拮抗分子，为肝癌的基因治疗提供了有力的武器，并为进一步筛选抗肝癌的基因药物提供了很好的筛选平台。
肝癌基因药物组合分子干扰 rna 及其筛选方法

[发明专利]一种快速诊断甲型H1N1流感病毒的悬浮芯片方法-CN201110396894.7无效
发明人：高志贤;宁保安;孙智勇;彭媛;白家磊;孙思明;牛超 -专利权人：中国人民解放军军事医学科学院卫生学环境医学研究所
申请日： 2011-12-05 - 公布日： 2013-06-05 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种可快速诊断甲型H1N1流感病毒的悬浮芯片方法，所述方法包括：针对HIN1特有的NA基因、HA基因、NS基因设计的引物，下游引物末端用生物素标记，根据三个基因扩增区内的核酸序列，设计特异性探针，探针末端氨基C12修饰，以便于把特异性的核酸探针共价结合到用彩色荧光编码的微球表面，采用液态悬浮杂交方法，将微球与生物素标记的目标物进行杂交，通过结合的链霉亲和素藻红蛋白，检测目标物，实验证明所设计探针没有交叉反应，单通道检测最低检出限为HA基因1.6nM，NA基因、NS基因检出限8nM，多通道检测的检出限为1.6nM。
一种快速诊断 h1n1 流感病毒悬浮芯片方法

[发明专利]编码杀虫蛋白的核苷酸序列及其应用-CN201510443866.4有效
发明人：马崇烈;林拥军;谭超;王维鹏;王文舒;杨桥;左丹;杨倩倩;邱龙;刘博林;章旺根 -专利权人：中国种子集团有限公司;华中农业大学
申请日： 2015-07-24 - 公布日： 2019-11-12 - 主分类号： C12N15/32 文献下载
摘要：本申请涉及改造的抗鳞翅目害虫新基因及其在植物育种中的应用。并设计构建了稳定高效表达该基因的转化载体；将该基因转化到玉米自交系中，获得转基因抗虫玉米。通过鳞翅目害虫进行杀虫活性生物测定对照实验，验证了改造后的基因较其他同类基因的抗虫性具有明显提升。
编码杀虫蛋白核苷酸序列及其应用

[发明专利]同时鉴定转甘露聚糖酶基因、葡聚糖酶基因、木聚糖酶基因和半乳糖苷酶基因植物的方法-CN201210591031.X有效
发明人：姚斌;徐晓露;孟昆;杨培龙;罗会颖;王亚茹 -专利权人：中国农业科学院饲料研究所
申请日： 2012-12-29 - 公布日： 2013-04-17 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及转基因植物检测领域，具体涉及同时鉴定转甘露聚糖酶基因、葡聚糖酶基因、木聚糖酶基因和半乳糖苷酶基因植物的方法。本发明中设计的针对转入的半乳糖苷酶、葡聚糖酶、甘露聚糖酶及木聚糖酶的外源基因的引物可以同时鉴定转基因玉米饲料中的该四种外源基因，这为今后饲用酶转基因玉米原料成分的快速鉴定检测提供了方法。
同时鉴定甘露聚糖基因半乳糖植物方法

[发明专利]一种脑中风相关位点检测方法-CN200810208221.2有效
发明人：陈奕雄;赵翊均 -专利权人：上海基康生物技术有限公司
申请日： 2008-12-26 - 公布日： 2010-06-30 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及一种脑中风相关位点检测方法，包括步骤：提取来自人的样本的基因组DNA；根据至少2个脑中风相关基因分别设计一对Taqman探针对和一对引物对，所述Taqman探针对的5’端和3’端分别标记荧光报告基团和荧光淬灭基团，分别对所述基因组DNA进行荧光定量PCR扩增；根据荧光定量PCR扩增结果来判断所述脑中风相关基因是否发生突变，较佳的，所述脑中风相关基因的数目是4个，是MTHFR基因、ENOS基因、PDE4D基因和PON1基因，本发明的检测方法设计巧妙、操作简单、检测结果准确可靠，为是否进一步采取有针对性的健康管理以及后续的检测手段提供参考依据。
一种脑中风相关检测方法

[发明专利]一种番茄PSY 1基因的CRISPR-Cas9体系构建及其应用-CN201610918480.9有效
发明人：成妍;马蓉丽;焦彦生;乔宁;雷阳 -专利权人：山西省农业科学院蔬菜研究所
申请日： 2016-10-21 - 公布日： 2019-11-08 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明属于基因工程和基因遗传修饰领域，涉及一种番茄PSY 1基因的CRISPR‑Cas9体系构建及其应用，包括以下步骤：根据番茄PSY 1基因的cDNA保守序列设计sgRNA的DNA序列，如SEQ ID NO.1所示；设计用于扩增sgRNA的番茄PSY 1基因目标区的引物组合；利用引物进行sgRNA扩增，并纯化扩增产物；得到含有特异性靶向番茄PSY 1基因sgRNA的CRISPR‑Cas9 Level有助于研究该基因参与番茄果实成熟过程中的作用，进一步了解番茄果实成熟的分子机理，可用于制备PSY 1基因缺失的转基因番茄，对未来培育耐贮运番茄新品种有重要作用。
番茄基因番茄果实体系构建扩增番茄新品种特异性靶向转基因番茄保守序列成熟过程分子机理基因工程基因目标基因缺失基因遗传扩增产物引物组合耐贮运可用引物修饰制备应用成熟培育研究

[发明专利]一种碱基编辑器SpCas9-LjCDAL1及其构建和应用-CN202011462235.4有效
发明人：许蓉芳;秦瑞英;李娟;刘小双;吴晓亮;周贤达;魏鹏程 -专利权人：安徽省农业科学院水稻研究所;合肥丰乐种业股份有限公司
申请日： 2020-12-11 - 公布日： 2022-04-01 - 主分类号： C12N15/55 文献下载
摘要：本发明设计合成了新的类胞嘧啶脱氨酶LjCDAL1基因，融合失活的nSpCas9基因及3个重复的尿嘧啶糖基化酶基因抑制剂基因(uracil DNA glycosylase(UDG)inhibitor，eUGI)，成为SpCas9‑LjCDAL1基因。并且本发明还提供包含该SpCas9‑LjCDAL1基因的表达盒和一种表达载体，以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用设计的SpCas9‑LjCDAL1基因构建植物表达载体，进而构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的单碱基替换，特别是实现由C/G碱基突变成T/A。
一种碱基编辑器 spcas9 ljcdal1 及其构建应用

[发明专利]一种对植物特定基因进行饱和碱基编辑的育种方法-CN201911093561.X有效
发明人：余泓;宋晓光;李家洋;孟祥兵 -专利权人：中国科学院遗传与发育生物学研究所
申请日： 2019-11-11 - 公布日： 2022-11-08 - 主分类号： C12N15/29 文献下载
摘要：本发明公开了一种对特定基因进行饱和碱基编辑的植物育种方法，包括如下步骤：1)选定一个待编辑基因；2)设计靶向待编辑基因的蛋白编码区及基因表达调控区的靶点，3)根据设计的靶点利用单碱基编辑CRISPR系统制备构建体；4)利用步骤3)中的构建体制备转基因作物，作为一代植株；5)筛选步骤4)中的一代植株或其后代中基因组纯合编辑的植株作为亲本育种。本发明通过向导RNA指导的Cas单碱基编辑融合蛋白对植物(例如作物植物)基因组中选定基因中所有或多个靶序列进行碱基编辑以获得不同表型后代的方法及通过此方法获得的植物后代及等位基因。
一种植物特定基因进行饱和碱基编辑育种方法

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