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[发明专利]一种Cas9核酸酶R780A及其用途-CN201710343400.6在审
发明人：吴强;李金环;寿佳 -专利权人：上海交通大学
申请日： 2017-05-16 - 公布日： 2017-07-28 - 主分类号： C12N9/22 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种Cas9核酸酶及用途。本发明的Cas9核酸酶（Cas9‑R780A），具有Cas9核酸酶活性，适用于CRISPR/Cas9系统，所述Cas9核酸酶（Cas9‑R780A）是将野生型Cas9核酸酶第780位精氨酸突变成丙氨酸获得采用所述Cas9核酸酶（Cas9‑R780A）对DNA双链进行切割可产生突出断裂末端，以补平连接的方式可加入与突出断裂末端互补的碱基，能够实现对基因组DNA片段的特定位置的精准编辑。
一种 cas9 核酸酶 r780a 及其用途

[发明专利]一种Cas9核酸酶ΔF916及其用途-CN201710343377.0有效
发明人：吴强;李金环;寿佳 -专利权人：上海交通大学
申请日： 2017-05-16 - 公布日： 2020-12-25 - 主分类号： C12N9/22 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种Cas9核酸酶及用途。本发明的Cas9核酸酶（Cas9‑∆F916），具有Cas9核酸酶活性，适用于CRISPR/Cas9系统，所述Cas9核酸酶（Cas9‑∆F916）是将野生型Cas9核酸酶第916位的苯丙氨酸删除后获得采用所述Cas9核酸酶（Cas9‑∆F916）对DNA双链进行切割可产生突出断裂末端，以补平连接的方式可加入与突出断裂末端互补的碱基，能够实现对基因组DNA片段的特定位置的精准编辑。
一种 cas9 核酸酶 f916 及其用途

[发明专利]一种Cas9核酸酶K918A及其用途-CN201710343397.8有效
发明人：吴强;李金环;寿佳 -专利权人：上海交通大学
申请日： 2017-05-16 - 公布日： 2021-03-12 - 主分类号： C12N9/22 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种Cas9核酸酶及用途。本发明的Cas9核酸酶（Cas9‑K918A），具有Cas9核酸酶活性，适用于CRISPR/Cas9系统，所述Cas9核酸酶（Cas9‑K918A）是将野生型Cas9核酸酶第918位赖氨酸突变成丙氨酸获得采用所述Cas9核酸酶（Cas9‑K918A）对DNA双链进行切割可产生突出断裂末端，以补平连接的方式可加入与突出断裂末端互补的碱基，能够实现对基因组DNA片段的特定位置的精准编辑。
一种 cas9 核酸酶 k918a 及其用途

[发明专利]一种Cas9核酸酶F916P及其用途-CN201710344461.4在审
发明人：吴强;李金环;寿佳 -专利权人：上海交通大学
申请日： 2017-05-16 - 公布日： 2017-07-28 - 主分类号： C12N9/22 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种Cas9核酸酶及用途。本发明的Cas9核酸酶（Cas9‑F916P），具有Cas9核酸酶活性，适用于CRISPR/Cas9系统，所述Cas9核酸酶（Cas9‑F916P）是将野生型Cas9核酸酶第第916位苯丙氨酸突变成脯氨酸获得采用所述Cas9核酸酶（Cas9‑F916P）对DNA双链进行切割可产生突出断裂末端，以补平连接的方式可加入与突出断裂末端互补的碱基，能够实现对基因组DNA片段的特定位置的精准编辑。
一种 cas9 核酸酶 f916p 及其用途

[发明专利]一种Cas9核酸酶G915F及其用途-CN201710344429.6有效
发明人：吴强;李金环;寿佳 -专利权人：上海交通大学
申请日： 2017-05-16 - 公布日： 2021-03-26 - 主分类号： C12N9/22 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种Cas9核酸酶及用途。本发明的Cas9核酸酶（Cas9‑G915F），具有Cas9核酸酶活性，适用于CRISPR/Cas9系统，所述Cas9核酸酶（Cas9‑G915F）是将野生型Cas9核酸酶第915位的甘氨酸突变成苯丙氨酸获得采用所述Cas9核酸酶（Cas9‑G915F）对DNA双链进行切割可产生突出断裂末端，以补平连接的方式可加入与突出断裂末端互补的碱基，能够实现对基因组DNA片段的特定位置的精准编辑。
一种 cas9 核酸酶 g915f 及其用途

[发明专利]一种Cas9核酸酶Q920P及其用途-CN201710347002.1有效
发明人：吴强;李金环;寿佳 -专利权人：上海交通大学
申请日： 2017-05-16 - 公布日： 2020-12-08 - 主分类号： C12N9/22 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种Cas9核酸酶及用途。本发明的Cas9核酸酶（Cas9‑Q920P），具有Cas9核酸酶活性，适用于CRISPR/Cas9系统，所述Cas9核酸酶（Cas9‑Q920P）是将野生型Cas9核酸酶第920位谷氨酰胺突变成脯氨酸获得采用所述Cas9核酸酶（Cas9‑Q920P）对DNA双链进行切割可产生突出断裂末端，以补平连接的方式可加入与突出断裂末端互补的碱基，能够实现对基因组DNA片段的特定位置的精准编辑。
一种 cas9 核酸酶 q920p 及其用途

[发明专利]一种Cas9核酸酶R919P及其用途-CN201710343933.4有效
发明人：吴强;李金环;寿佳 -专利权人：上海交通大学
申请日： 2017-05-16 - 公布日： 2021-02-23 - 主分类号： C12N9/22 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种Cas9核酸酶及用途。本发明的Cas9核酸酶（Cas9‑R919P），具有Cas9核酸酶活性，适用于CRISPR/Cas9系统，所述Cas9核酸酶（Cas9‑R919P）是将野生型Cas9核酸酶第919位精氨酸突变成脯氨酸获得采用所述Cas9核酸酶（Cas9‑R919P）对DNA双链进行切割可产生突出断裂末端，以补平连接的方式可加入与突出断裂末端互补的碱基，能够实现对基因组DNA片段的特定位置的精准编辑。
一种 cas9 核酸酶 r919p 及其用途

[发明专利]一种CRISPR/Cas9纳米系统-CN202211127415.6在审
发明人：余极峰;徐辉雄;尹豪豪;张绅;周邦国 -专利权人：上海市第十人民医院
申请日： 2022-09-16 - 公布日： 2023-04-28 - 主分类号： A61K41/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种CRISPR/Cas9纳米系统。具体地，本发明提供一种CRISPR/Cas9纳米系统，所述的CRISPR/Cas9纳米系统包括载体、声敏剂和CRISPR/Cas9系统；所述的载体负载声敏剂和CRISPR/Cas9系统。本发明所述的载体负载声敏剂和CRISPR/Cas9系统，所述的CRISPR/Cas9纳米系统在超声辐照条件下具有优异的溶酶体逃逸能力，从而避免被溶酶体降解，增强基因编辑效率。
一种 crispr cas9 纳米系统

[发明专利]一种香蕉枯萎菌CRISPR/Cas9基因编辑载体、制备方法及应用-CN202210606127.2在审
发明人：彭军;张欣;曾凡云;漆艳香;丁兆建;王艳玮;谢培兰;谢艺贤 -专利权人：中国热带农业科学院环境与植物保护研究所
申请日： 2022-05-31 - 公布日： 2022-07-22 - 主分类号： C12N15/80 文献下载
摘要：本发明提供一种香蕉枯萎菌CRISPR/Cas9基因编辑载体、制备方法及应用,该载体包括Cas9和sgRNA表达框；Cas9表达框中，包括PgpdA启动子、优化密码子Foc4‑Cas9和密码子Foc4‑Cas9两端携带的H2BNLS核定位信号；sgRNA表达框中，包括Pol III型5SrRNA启动子和gRNA序列N20；本发明构建的香蕉枯萎菌CRISPR/Cas9基因编辑载体，实现了香蕉枯萎菌Foc4的更高编辑效率的体内表达Cas9和sgRNA的质粒型CRISPR/Cas9基因编辑技术，操作简便且稳定，充分提高香蕉枯萎菌CRISPR/Cas9基因编辑效率。
一种香蕉枯萎 crispr cas9 基因编辑载体制备方法应用

[发明专利]一种基于CRISPR-Cas9系统的基因编辑载体及其应用-CN201710396445.X有效
发明人：李健;王峥;马力耕;邓兴旺 -专利权人：未名兴旺系统作物设计前沿实验室（北京）有限公司
申请日： 2017-05-31 - 公布日： 2020-10-16 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明提供了一种基于CRISPR‑Cas9系统的基因组编辑载体及其应用，属于植物基因工程领域，具体涉及一种基于CRISPR‑Cas9系统的小麦基因组编辑载体及其应用。本发明通过比较CRISPR‑Cas9系统的转化载体，采用不同Cas9启动子、不同sgRNA启动子和不同sgRNA序列结构时的基因编辑效率，获得了在小麦中编辑效率更高的CRISPR‑Cas9转化载体。此优化载体显著提高了小麦作物利用CRISPR‑Cas9进行基因编辑的效率，克服了小麦等作物中CRISPR‑Cas9载体转化后突变率低、获得CRISPR‑Cas9转基因突变株系难的问题，节约了转化时间，减少了转化成本，对CRISPR‑Cas9基因编辑系统在作物中的推广应用奠定了更好的基础。
一种基于 crispr cas9 系统基因编辑载体及其应用

[发明专利]一种Cas9蛋白抑制剂及其应用-CN202211273310.1有效
发明人：杨帆;杨珊珊;赵雅楠 -专利权人：哈尔滨工业大学
申请日： 2022-10-18 - 公布日： 2023-08-04 - 主分类号： C12N15/33 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种Cas9蛋白抑制剂及其应用。本发明的Cas9蛋白抑制剂来源于Nme物种的AcrIIC1，其包括如SEQ ID No.1所示序列。该Cas9蛋白抑制剂可以有效抑制Cas9酶活性，从而抑制CRISPR‑Cas9切割特定基因，可以调控CRISPR‑Cas9发挥功能的时间；而且与野生型的AcrIIC1蛋白相比，该Cas9蛋白抑制剂不论是在氧化环境或者还原环境下，均可以发挥对Cas9的抑制作用，较野生型的AcrIIC1蛋白的应用(仅在还原态时发挥作用)范围更广，而且具有比野生型AcrIIC1更加稳定的抑制Cas9切割DNA的能力。
一种 cas9 蛋白抑制剂及其应用

[发明专利]一种高特异性的CRISPR基因组编辑体系-CN201610805040.2有效
发明人：丁秋蓉;陈彦好 -专利权人：中国科学院上海营养与健康研究所
申请日： 2016-09-06 - 公布日： 2021-10-12 - 主分类号： C12N15/55 文献下载
摘要：本发明提供了一种高特异性的CRISPR基因组编辑体系，通过在CRISPR/Cas9基因组编辑系统中引入靶向Cas9基因的gRNA，在靶细胞基因组编辑进行的同时(或之后)，靶向Cas9基因的gRNA能够介导对Cas9基因的切割，从而显著降低Cas9基因的表达时间，继而降低由于CRISPR体系中Cas9长期表达导致的脱靶效应，增加靶向特异性。
一种特异性 crispr 基因组编辑体系

[发明专利]一种安全编码Cas9蛋白的核酸分子及其表达载体-CN201510092144.9有效
发明人：刘厚奇;蒋俊锋;王越;张莉;仵敏娟 -专利权人：中国人民解放军第二军医大学
申请日： 2015-03-02 - 公布日： 2018-04-13 - 主分类号： C12N15/55 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，提供了一种更安全的编码Cas9蛋白的核酸分子及其重组表达载体，以及在CRISPR‑Cas9技术中的应用，以及一种减弱Cas9核酸分子与microRNA结合的方法。实验发现目前广泛应用的Cas9表达载体虽然能成功表达Cas9蛋白发挥作用，但载体所转录的mRNA序列本身可以作为microRNA let‑7家族的吸附体而抑制let‑7的功能，而let‑7可以抑制多个癌基因的表达，因此目前应用的Cas9表达载体可以增加一些癌基因的表达从而增加癌症的风险。本发明提供的M‑mir‑Cas9表达载体，所转录出的mRNA不能吸附let‑7，同时依然能翻译成完整的Cas9蛋白发挥作用，增加CRISPR‑Cas9基因编辑工具的安全性。
一种安全编码 cas9 蛋白核酸分子及其表达载体

[发明专利]一种CRISPR/Cas9递送系统及其制备方法和应用-CN201910512526.0有效
发明人：蒋兴宇;张灵敏;郑文富;王鹏 -专利权人：南方科技大学
申请日： 2019-06-13 - 公布日： 2022-11-08 - 主分类号： A61K48/00 文献下载
摘要：本发明提供了一种CRISPR/Cas9递送系统及其制备方法和应用，所述递送系统包括金纳米簇内核、附着在金纳米簇上的CRISPR/Cas9基因编辑系统和脂质体外壳；所述CRISPR/Cas9基因编辑系统包括sgRNA和Cas9蛋白；所述Cas9蛋白连接有核定位信号肽。本发明的递送系统具有三重靶向性，实现了对CRISPR/Cas9的高效、特异性和核靶向递送，通过精准编辑Pcsk9基因，有效降低了LDL‑C水平，减少了心血管疾病风险。
一种 crispr cas9 递送系统及其制备方法应用

[发明专利]一种抗Cas9蛋白的单克隆抗体的制备及应用-CN201710110956.0在审
发明人：马晓飞;郭亚璐;武鹏程;陈浩;耿广荟;康昊翔;尹长城;刘国振;吴琳;刘斯奇 -专利权人：北京华大蛋白质研发中心有限公司
申请日： 2017-02-27 - 公布日： 2018-09-07 - 主分类号： C07K16/40 文献下载
摘要：本发明涉及一种可特异性识别CRISPR/Cas9基因编辑体系中Cas9蛋白的单克隆抗体的制备方法，目的是提供一种将该抗体用于CRISPR/Cas9基因编辑体系中的外源Cas9蛋白的检测方法。Cas9蛋白是一种核酸内切酶，在CRISPR/Cas9基因编辑体系中与靶位点序列结合，并对靶位点的DNA进行剪切。制备该抗体的抗原为一段优选的、由大肠杆菌表达、具有免疫原性活性的重组蛋白，最终获得的抗体属于IgG1亚型，编码其可变区的序列经基因克隆的方式获得，该抗体可用于CRISPR/Cas9基因编辑体系的功能性确认，检测经CRISPR/Cas9体系的遗传改良物种(Genetic modified Organisms)。
编辑体系抗体蛋白制备基因单克隆抗体大肠杆菌表达靶位点序列核酸内切酶特异性识别基因克隆免疫原性遗传改良重组蛋白剪切可变区检测抗原对靶可用外源位点优选物种应用

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