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[发明专利]一种用于骨干载体的RNAi表达框及相应载体和应用-CN202310811822.7在审
发明人： 许蓉芳;李娟;秦瑞英;王士梅;谷东方;卞士权;章潇 -专利权人：安徽省农业科学院水稻研究所
申请日： 2023-07-04 - 公布日： 2023-10-10 - 主分类号： C12N15/84 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于骨干载体的RNAi表达框及相应载体和应用。本发明的表达框可以抑制MLH1基因表达并且实现了引导编辑后将其切除。本发明的骨干载体包括融合蛋白、pegRNA和OsMLH RNAi表达框和激活Cre重组酶表达的表达框；所述融合蛋白为Cas9切刻酶或其变体、反转录酶组成的融合蛋白。pegRNA包含靶向目的DNA片段的sgRNA、逆转录模板和引物结合位点、连接得到的RNA分子。本发明所述的骨干质粒载体中，pegRNA表达框和融合蛋白表达框、OsMLH RNAi表达框及Cre表达框位于同一双元载体中。本发明的PE‑MLH1i‑Cre引导编辑系统不仅大大提高了编辑靶点的编辑效率，并能获得纯合突变植株，具有很好的应用前景。
一种用于骨干载体 rnai 表达相应应用

[发明专利]一种植物抗除草剂EPSPS突变型基因及其应用-CN202310959199.X在审
发明人：李娟;吴丹丹;许敏敏;刘兆明;谷东方;许蓉芳;秦瑞英;章潇;梁静 -专利权人：合肥戬谷生物科技有限公司;安徽省农业科学院水稻研究所
申请日： 2023-08-01 - 公布日： 2023-10-10 - 主分类号： C12N15/54 文献下载
摘要：本发明公开了一种植物抗除草剂EPSPS突变型基因及其应用。本发明还提供了植物抗除草剂EPSPS突变型蛋白、表达盒和重组载体。本申请的发明人通过实验证明，包含本发明的植物抗除草剂EPSPS突变型基因或植物抗除草剂EPSPS突变型蛋白的植物，尤其是水稻，对草甘膦除草剂具有显著的抗性，能够在该除草剂中几乎不受影响地正常生长，而相同条件下野生型植株则生长受到显著抑制，本发明的该基因突变体具有巨大的市场经济前景。
一种植物除草剂 epsps 突变型基因及其应用

[发明专利]提高引导编辑效率的融合蛋白表达框及相应骨架载体和应用-CN202310793261.2在审
发明人：秦瑞英;许蓉芳;李娟;谷东方;卞士权;章潇 -专利权人：安徽省农业科学院水稻研究所
申请日： 2023-06-30 - 公布日： 2023-09-29 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高引导编辑效率的融合蛋白表达框及相应骨架载体和应用。本发明的骨干载体包括PE融合蛋白、pegRNA；所述融合蛋白为Cas9切刻酶或其变体、反转录酶和MLH基因破坏域序列组成的融合蛋白。pegRNA包含靶向目的DNA片段的sgRNA、逆转录模板和引物结合位点、连接得到的RNA分子。本发明所述骨干质粒载体中，融合蛋白和pegRNA表达框表达框位于同一双元载体中，Cas9核酸酶表达框由ZmUBI启动子，融合蛋白编码序列和35s终止子依次构成；pegRNA表达框依次由35S‑CmYLCV‑U6复合启动子、tRNA基因序列、壮观霉素抗性基因SpR、RNA核酶HDV序列、EQ序列和polyT‑HSPt复合终止子组成。本发明的ePE2‑OsMLHdn引导编辑系统不仅大大提高了编辑靶点的编辑效率，并能获得纯合突变植株，具有很好的应用前景。
提高引导编辑效率融合蛋白表达相应骨架载体应用

[发明专利]一种能够实现碱基颠换的CGBE单碱基编辑器及其应用-CN202310703968.X在审
发明人：李娟;许蓉芳;秦瑞英;谷东方;卞士权;章潇 -专利权人：安徽省农业科学院水稻研究所
申请日： 2023-06-14 - 公布日： 2023-09-12 - 主分类号： C12N15/62 文献下载
摘要：本发明提供了一种能够实现碱基颠换的CGBE碱基编辑器及其应用。本发明设计合成了鳕鱼来源的尿嘧啶糖基化酶基因cUNG，融合大鼠来源的胞嘧啶脱氨酶基因rAPO的突变体APOEE以及失活的Cas9蛋白基因nSpCas9，组合成为APOEE‑nCas9‑cUNG基因，该基因可以实现C‑G的碱基颠换。并且本发明还提供包括APOEE‑nCas9‑cUNG基因的表达盒和一种表达载体，以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用设计的APOEE‑nCas9‑cUNG基因构建植物表达载体，进而构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的单碱基替换，特别是实现高效率的C‑G碱基颠换。
一种能够实现碱基 cgbe 编辑器及其应用

[发明专利]一种基于TadA8e突变体实现碱基颠换的编辑工具及应用-CN202310910637.3在审
发明人：李娟;吴丹丹;许敏敏;刘兆明;谷东方;许蓉芳;秦瑞英;章潇;梁静 -专利权人：合肥戬谷生物科技有限公司;安徽省农业科学院水稻研究所
申请日： 2023-07-24 - 公布日： 2023-09-12 - 主分类号： C12N9/00 文献下载
摘要：本发明提供了一种基于TadA8e突变体实现水稻G‑C碱基颠换的编辑工具。其中，所述碱基编辑工具cCDc‑CGBE包括：腺嘌呤脱氨酶TadA编码基因的突变体TadA‑CDc、失活型nSpCas9以及鳕鱼源的尿嘧啶DNA糖基化酶cUNG基因序列。采用本发明提供的包含cCDc‑CGBE编辑工具的表达载体，可以造成基因组特异位点的C到G碱基转换替换。实验证明，利用本发明设计的融合编辑工具构建水稻靶向编辑载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点DNA上G‑C的高效碱基颠换，同时保留了TadA脱氨酶的高保真性，产生较少的副产物和indels频率。
一种基于 tada8e 突变体实现碱基编辑工具应用

[发明专利]一种抗二硝基苯胺类除草剂的水稻突变型蛋白及应用-CN202210640201.2有效
发明人： 许蓉芳;李娟;魏鹏程;秦瑞英 -专利权人：安徽省农业科学院水稻研究所
申请日： 2022-07-19 - 公布日： 2023-06-20 - 主分类号： C07K14/415 文献下载
摘要：本发明公开了一种水稻OsTubA2突变型蛋白及相应基因。所述OsTubA2突变型基因编码蛋白的氨基酸序列存在如下突变：其对应于野生型水稻OsTubA2的氨基酸序列的第202位的缬氨酸发生突变。通过将该OsTubA2突变型基因导入水稻基因组并使其表达，本申请的发明人发现受体植物具有对二甲戊灵等二硝基苯胺类除草剂极高的抗(耐)性，经过反复试验确认，证实该水稻OsTubA2突变型蛋白能够为植物，尤其是水稻提供二甲戊灵等二硝基苯胺类除草剂的抗性。
一种硝基苯胺除草剂水稻突变型蛋白应用

[发明专利]一种引导编辑系统介导作物产生内源除草剂抗性的方法-CN202110506582.0有效
发明人：李娟;许蓉芳;魏鹏程;秦瑞英;刘小双 -专利权人：安徽省农业科学院水稻研究所
申请日： 2021-05-10 - 公布日： 2023-04-07 - 主分类号： C12N15/84 文献下载
摘要：本发明公开了一种引导编辑系统介导作物产生内源除草剂抗性的方法，本发明获得了多种除草剂抗性的ACCase突变基因型，所述ACCase突变型基因在不同位点分别获得单一的氨基酸突变。首先利用CRISPR介导的引导编辑系统，获得ACCase突变型基因，具体表现为第1879位氨基酸由异亮氨酸分别突变为亮氨酸、苏氨酸、缬氨酸、丝氨酸、甲硫氨酸等，第1927位由脯氨酸突变为酪氨酸或苯丙氨酸，第2097位由色氨酸突变为甘氨酸、丝氨酸或亮氨酸，第2139位由异亮氨酸突变为天冬氨酸、缬氨酸、丝氨酸，第2176位由天冬氨酸突变为甘氨酸，第2194位由甘氨酸突变为丝氨酸和丙氨酸。这些ACCase突变型基因使受体植物在不同程度上具有对乙酰辅酶A羧化酶抑制剂类除草剂的抗(耐)性。
一种引导编辑系统作物产生内源除草剂抗性方法

[发明专利]一种具有除异味效果的妇科护理用生理裤-CN202210066936.9有效
发明人：陆雁;许蓉芳;顾丽丽;邱小丽 -专利权人：南通市肿瘤医院
申请日： 2022-01-20 - 公布日： 2023-02-24 - 主分类号： A61F13/66 文献下载
摘要：本发明提供一种具有除异味效果的妇科护理用生理裤，包括边裤体、拉链一、拉链二以及收腹组件，所述边裤体的上端连接有拉链一，所述收腹组件的下端表面连接有拉链二，所述边裤体的上端与收腹组件的下端通过拉链一、拉链二连接，本发明具有如下的有益效果：通过设置在边裤体内的连接部，连接部的左端与右端呈弯曲状，卫生巾放置在连接部上时不易发生脱落，且当经血不小心落到连接部上时，连接部内的吸附棉能够进行吸附，不会对外裤造成脏污，配合设置的束腰带以及支撑气垫，能够对使用者的腰部进行支撑，且不会对腰部造成损伤，具有一定的温热护理效果，有利于缓解经期女性腹部的疼痛感，减缓经期的不适。
一种具有异味效果妇科护理生理

[发明专利]一种妇产科护理用清洗装置-CN202211223079.5在审
发明人：翁莉莉;许蓉芳;陆雁;秦云霞;王碧琪 -专利权人：翁莉莉
申请日： 2022-10-08 - 公布日： 2022-12-09 - 主分类号： A61M3/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种妇产科护理用清洗装置，涉及妇科护理清洗技术领域。包括护理垫，所述护理垫的一端固定连接有连接座，所述护理垫表面的一端安装有臀垫，所述护理垫的表面开设有导液槽，所述护理垫的表面贯穿设置有排液槽，且排液槽位于导液槽的底端；本发明能够方便对产妇阴处进行扩开，有利于医护人员后续对阴处内部进行清洗，并且能够更全面的对产妇阴道进行清洗，有利于将阴道内壁的污物进行清理、将阴道内部的液体进行清洗排出，提高产妇阴道清洗的效果，同时能够方便医护人员对阴道内部进行操作清洗，为医护人员提供便利，减少医护人员手部的劳累程度，提升医护人员后续对阴道内部清洗的效果。
一种妇产科护理清洗装置

[发明专利]一种植物ACCase突变型基因及其应用-CN202110506569.5有效
发明人：秦瑞英;李娟;许蓉芳;魏鹏程;刘小双 -专利权人：安徽省农业科学院水稻研究所
申请日： 2021-05-10 - 公布日： 2022-10-14 - 主分类号： C12N15/52 文献下载
摘要：本发明公开了一种植物抗除草剂ACCase突变型基因，所述植物ACCase基因为野生型ACCase基因发生以下两种突变：第5779、第5780位点核苷酸发生突变，分别由C变成T、C变成A，或者第5779、第5780、第5781位点核苷酸发生突变，分别由C变成T、C变成A、T变成C。本申请的发明人发现了几种突变型基因，其对应的植株该突变体植株具有对乙酰辅酶A羧化酶抑制剂类除草剂的抗(耐)性，并且，本申请的发明人将其应用到水稻中，证实了其具有非常良好的除草剂的抗(耐)性。
一种植物 accase 突变型基因及其应用

[发明专利]一种高抗二硝基苯胺类除草剂水稻突变型蛋白及相应基因-CN202210529288.6在审
发明人： 许蓉芳;李娟;秦瑞英;谷东方;金珊;魏鹏程 -专利权人：安徽省农业科学院水稻研究所
申请日： 2022-05-16 - 公布日： 2022-10-11 - 主分类号： C07K14/415 文献下载
摘要：本发明公开了一种水稻OsTubA2突变型蛋白及相应基因。所述OsTubA2突变型基因编码蛋白的氨基酸序列存在如下突变：其对应于野生型水稻OsTubA2的氨基酸序列的第243位的精氨酸发生突变。将该OsTubA2突变型基因导入水稻基因组并使其表达，受体植物可以具有对二甲戊灵等二硝基苯胺类除草剂极高的抗(耐)性。
一种高抗二硝基苯胺除草剂水稻突变型蛋白相应基因

[发明专利]一种识别PAM序列为NRTH的SpCas9n变体及相应碱基编辑系统-CN202011474234.1有效
发明人：秦瑞英;李娟;许蓉芳;刘小双;单调风;武平安;魏鹏程 -专利权人：安徽省农业科学院水稻研究所
申请日： 2020-12-14 - 公布日： 2022-10-11 - 主分类号： C12N15/55 文献下载
摘要：本发明公开了一种识别PAM序列为NRTH的SpCas9n变体及相应碱基编辑系统。本发明的SpCas9n变体融合ABE的碱基编辑系统入生物体或生物细胞内，使所述SpCas9n变体、sgRNA和ABE的编码基因均得到表达，实现基因组靶点序列的编辑；所述sgRNA靶向所述靶点序列；所述靶点序列的PAM序列为NRTH，N为A、T、C或G；R为A或T；H为A，T或C。本发明利用SpCas9n变体融合ABE的碱基编辑系统在水稻中实现了更多的靶点序列中由A:T到G:C的替换，如PAM序列为NRTH的靶点序列，扩展了ABE介导的碱基替换系统的编辑范围，具有广泛的应用前景。
一种识别 pam 序列 nrth spcas9n 变体相应碱基编辑系统

[发明专利]一种用于骨干载体的pegRNA表达框及相应骨干载体和应用-CN202210729325.8在审
发明人：李娟;许蓉芳;秦瑞英;魏鹏程;金珊;刘小双;陈俐克;丁健;李亦臻 -专利权人：安徽省农业科学院水稻研究所
申请日： 2022-06-24 - 公布日： 2022-09-09 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于骨干载体的pegRNA表达框及相应骨干载体和应用。本发明的骨干载体包括融合蛋白、pegRNA；所述融合蛋白为Cas9切刻酶或其变体、反转录酶组成的融合蛋白。pegRNA包含靶向目的DNA片段的sgRNA、逆转录模板和引物结合位点、连接得到的RNA分子。本发明所述骨干质粒载体中，pegRNA表达框和融合蛋白表达框位于同一双元载体中，pegRNA表达框依次由35S‑CmYLCV‑U6复合启动子、tRNA基因序列、壮观霉素抗性基因SpR、RNA核酶HDV序列、EQ序列和polyT‑HSPt复合终止子组成；Cas9核酸酶表达框由ZmUBI启动子，融合蛋白编码序列和35s终止子依次构成。本发明的enpPE2引导编辑系统不仅大大提高了编辑靶点的编辑效率，并能获得纯合突变植株，具有很好的应用前景。
一种用于骨干载体 pegrna 表达相应应用

[发明专利]密码子植物化改造的Plant Nme2Cas9基因及其应用-CN201910543766.7有效
发明人： 许蓉芳;魏鹏程;李娟;秦瑞英;李浩;刘小双;徐善斌 -专利权人：安徽省农业科学院水稻研究所
申请日： 2019-06-21 - 公布日： 2022-07-22 - 主分类号： C12N15/55 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术和植物基因工程技术领域，公开了密码子植物化改造的Plant Nme2Cas9基因及其应用。所述密码子植物化改造的Plant Nme2Cas9基因具有SEQ ID No：1所示的核苷酸序列。本发明提供的密码子植物化改造的Plant Nme2Cas9基因是以模式作物水稻密码子为基础改造获得的，即在维持编码氨基酸序列不变的前提下，利用发明人从与水稻基因相关密码子中所筛选出的密码子替换原有密码子，得到植物化改造的Plant Nme2Cas9基因，再经过化学合成而来。采用本发明的基因可以明显提高剪切效率。
密码子植物改造 plant nme2cas9 基因及其应用

[发明专利]高抗除草剂植物基因突变体及相应载体与应用-CN202210267086.9在审
发明人：刘小双;魏鹏程;秦瑞英;李娟;许蓉芳 -专利权人：安徽农业大学;安徽省农业科学院水稻研究所
申请日： 2022-03-17 - 公布日： 2022-05-27 - 主分类号： C12N15/29 文献下载
摘要：本发明公开了高抗除草剂植物基因突变体及相应载体与应用。本发明提供了两种抗除草剂的基因突变体，二者都能够为植物提供除草剂抗性，尤其是对于二硝基苯胺类除草剂具有良好抗性。将本发明的两个突变体OsTubA2和LOC_Os11g14220中的任意一个导入水稻基因组并使其表达，受体植物都可以具有对二甲戊灵等二硝基苯胺类除草剂极高的抗(耐)性，这为抗除草剂作物的培育提供了更多的基因资源，可以有效地提升作物的抗除草剂性能进而提升作物产量。
除草剂植物基因突变体相应载体应用

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