本发明公开了一种人工合成的编码硫磺菌蘑菇凝集素N‑乙酰氨基乳糖胺结合域的LSL基因以及含有LSL基因的表达载体、宿主细胞,LSL基因的核苷酸序列为SEQ ID NO.1。本发明还公开了一种以LSL作为融合标签的目标蛋白表达与纯化方法,该方法具体涉及LSL基因合成、含LSL基因和目标蛋白基因的表达载体构建、含LSL基因和蛋白酶基因的表达载体构建、融合蛋白的表达与纯化、LSL蛋白标签去除和目标蛋白纯化等步骤。本发明方法简单易行,实现了目标蛋白一步纯化,可获得高纯度的目标蛋白,降低了蛋白纯化成本,可广泛用于生物医药、兽药等领域的活性蛋白质以及生物制品行业中疫苗抗原的规模化制备,具有较高的实用价值。
本发明涉及基因工程领域,具体涉及一种用于DNA纯化的蛋白质,及其编码基因、应用和纯化方法。本发明所述编码用于DNA纯化的蛋白质的基因,该基因具有如下序列之一:(i)具有序列表中SEQ ID NO.1所述的核苷酸序列;(ii)在(i)所述序列的3’端融合了蛋白标签编码序列的核苷酸序列。本发明基因编码的蛋白质可有效地纯化DNA,尤其是含有TetO序列的DNA,并且可高效纯化微克以下含量级别的DNA,尤其是100纳克以下含量级别的DNA。
本发明公开了一种IL1R1基因启动子区域中的SNP位点、其确定方法及应用,该SNP位点是首次发现的新位点,为IL1R1基因T/C多态,具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列,位于IL1R1基因启动子区域-1253位;其确定方法:提取宿主细胞的基因组DNA;将模板DNA进行PCR扩增,产物纯化;纯化后的PCR产物进行DNA测序,从而确定SNP位点;其基因型确定法:提取宿主细胞的基因组DNA;将模板DNA进行PCR扩增,产物纯化;纯化后的PCR产物进行PCR延伸反应,树脂纯化;芯片点样后,质谱检测,进行数据分析,从而确定SNP位点的基因型。