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[发明专利]一种同时检测多种长链非编码RNA的复合物及方法-CN202110069247.9有效
发明人：张春阳;张艳;胡娟;王陈;邹笑然;田小锐 -专利权人：山东师范大学
申请日： 2021-01-19 - 公布日： 2022-06-24 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种同时检测多种长链非编码RNA的复合物及方法。复合物包括磁珠、报告单元和生物素化的捕获探针；报告单元至少为两个；报告单元是由辅助探针、荧光团标记的信号探针A和荧光团标记的信号探针B的DNA杂交链反应构建的长一维DNA连接体，辅助探针与部分信号探针A杂交，信号探针A和信号探针B彼此相互交替杂交；所述捕获探针的3’端标记有biotin生物素并与磁珠相连，捕获探针的5’端与报告单元杂交形成部分互补双链。当靶lncRNA存在时，该复合物可以催化链置换反应从而释放荧光分子，随后可通过单分子检测对其进行定量，没有引入核酸扩增方法，可以在无酶系统中进行，具有显著优势。
一种同时检测多种长链非编码 rna 复合物方法

[发明专利]制备单链长探针的方法、去除核糖体RNA的方法和试剂盒-CN202010001834.X在审
发明人：唐冲;陈智超;韩默;阮凤英;郭梅;杨林峰 -专利权人：深圳华大基因科技服务有限公司
申请日： 2020-01-02 - 公布日： 2021-07-02 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明涉及一种制备单链长探针的方法、去除核糖体RNA的方法和试剂盒。该制备单链长探针的方法包括通过反转录获得cDNA样本，所述cDNA样本包含核糖体RNA的反转录产物；利用引物对cDNA样本进行特异性扩增，获得扩增产物，所述引物能够特异性靶向所述核糖体RNA的反转录产物，所述扩增产物包括互补的两条链；去除扩增产物中的一条链，获得所述单链长探针；所述引物包括第一引物和第二引物，第一引物5’端携带有磷酸化修饰，第二引物上含有至少一个硫代修饰。所获得的单链长探针可以用于去除核糖体RNA，可以应用于多种物种中RNA样本中核糖体RNA的去除，方便简单，且核糖体RNA的残留率低。
制备单链长探针方法去除核糖体 rna 试剂盒

[发明专利]一种利用核酸外切酶反应产生引物结合树枝状滚环扩增可视化检测miRNA的方法-CN201710154441.0有效
发明人：周翔;刘奕侬;王少儒;田沺;张小娥;黄俊捷;杨伊文;朱子睿 -专利权人：武汉大学
申请日： 2017-03-15 - 公布日： 2020-03-10 - 主分类号： C12Q1/6844 文献下载
摘要：本发明方法包含三部分，第一部分引物的产生，发卡探针I被靶标miRNA打开后，被核酸外切酶I降解单链部分，而后核糖核酸酶H降解DNA：RNA杂合链中的RNA，留下一段短链DNA；第二部分是树状滚环扩增，上一步产生的单链DNA连接长单链DNA探针成环作为模板，然后以该单链DNA为引物进行一级滚环扩增，在滚环扩增体系中引入的发卡茎环结构II，被一级滚环扩增产物打开，从而多级树枝状滚环扩增；第三部分是根据滚环扩增产物中含有的G‑四链体进行检测。
一种利用核酸外切酶反应产生引物结合树枝状滚环扩增可视化检测 mirna 方法

[发明专利]GSTP1基因SNP的荧光原位杂交测序检测方法-CN201811231782.4在审
发明人：王鹤尧;孙美娜 -专利权人：北京华夏时代生物工程有限公司
申请日： 2018-10-22 - 公布日： 2019-01-11 - 主分类号： C12Q1/6841 文献下载
摘要：本发明公开了一种GSTP1基因SNP的荧光原位杂交测序检测方法，所述方法包括提取待测样本的DNA，并以DNA为模板进行单链化衍生，然后同时加入不同荧光标记的第一测序探针和第二测序探针与单链化衍生物进行杂交所述方法可在一个单链化衍生和杂交反应循环中完成对单核苷酸多态性的精准分型，从而了解受试者的基因型，达到对危险因素引起疾病的预防及临床上个体化用药的指导。
单链化荧光原位杂交测序检测测序探针单核苷酸多态性个体化用药自动化操作待测样本危险因素荧光标记杂交反应杂交结果基因型分型判读杂交疾病预防安全

[发明专利]CYP基因单核苷酸多态性的荧光原位杂交测序检测方法-CN201811227193.9在审
发明人：王鹤尧;孙美娜 -专利权人：北京华夏时代生物工程有限公司
申请日： 2018-10-22 - 公布日： 2019-01-11 - 主分类号： C12Q1/6874 文献下载
摘要：本发明公开了一种CYP基因单核苷酸多态性的荧光原位杂交测序检测方法，所述方法包括提取待测样本的DNA，并以DNA为模板进行单链化衍生，然后同时加入不同荧光标记的第一测序探针和第二测序探针与单链化衍生物进行杂交所述方法精准性高，稳定性好，快速，安全，易自动化操作，可在一个单链化衍生和杂交反应循环中完成对单核苷酸多态性的精准分型，从而了解受试者的基因型，能够为预防因危险因素引起的疾病及临床个体化用药提供指导。
单核苷酸多态性单链化荧光原位杂交测序检测测序探针个体化用药自动化操作待测样本危险因素荧光标记杂交反应杂交结果基因基因型分型判读杂交疾病预防安全

[发明专利]HLA亚型检测试剂盒及其应用-CN202010162878.0在审
发明人：廖卫平;石弈武 -专利权人：广州医科大学附属第二医院
申请日： 2020-03-10 - 公布日： 2020-06-05 - 主分类号： C12Q1/6883 文献下载
摘要：本发明涉及HLA亚型检测试剂盒，所述试剂盒包括用于检测多种HLA亚型的多重PCR扩增的引物和探针，每对HLA亚型上游和下游引物的量比值为1:20到1:50，每对引物上游引物的Tm值比下游引物的Tm值高4本发明结合通过提高限速引物的退火温度，加上调整上下游引物的配比，能较传统制备单链方法在不损失PCR扩增效率的情况下，制备出更多的单链，从而使得探针的杂交信号较传统的多重单链制备PCR得到明显的提升，从而提高了检测的灵敏度和特异性
hla 检测试剂盒及其应用

[发明专利]基于单链DNA金纳米簇的荧光传感法检测维生素B1-CN202310510681.5在审
发明人：易姿;周金沙;邱志鹏;钟菲菲;汪辉;杨丽霞;曾希珂;黄小贝 -专利权人：长沙市食品药品检验所
申请日： 2023-05-08 - 公布日： 2023-08-08 - 主分类号： G01N21/64 文献下载
摘要：本发明公开了基于单链DNA金纳米簇的荧光传感法检测维生素B1的方法，将单链A30‑ssDNA为模板的金纳米簇作为荧光探针，免标记、快速、高灵敏度、高特异性定量检测复杂体系中具体来说，以单链A30‑ssDNA模板合成的金纳米簇作为荧光探针，通过荧光强度变化特异性检测溶液中VB1含量。
基于 dna 纳米荧光传感检测维生素 base sub

[发明专利]一种电荷排斥作用诱导的单链胶原多肽探针及制备方法-CN202010068364.9有效
发明人：肖建喜;蔡向东 -专利权人：兰州大学
申请日： 2020-01-21 - 公布日： 2022-07-08 - 主分类号： C07K14/78 文献下载
摘要：本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种电荷排斥作用诱导的单链胶原多肽探针及制备方法。本发明提供的单链胶原多肽探针中间含有(Gly‑Pro‑Hyp)n、(Gly‑Pro‑Pro)n或(Gly‑Hyp‑Hyp)n的重复序列，序列上修饰有荧光信号分子，序列的C端包含数个带电荷的氨基酸。本发明提供的新型多肽探针不含有非天然氨基酸，制备简单。该新型多肽探针具有pH敏感性，在酸性条件下形成三重螺旋结构，而在生理pH条件下，则可以保持稳定的单链结构，不需要经过任何预处理，即具有特异性结合病变胶原蛋白的能力，并且完全避免了预处理对组织样品的损伤风险本发明提供的新型多肽探针，可用于体外检测病变胶原蛋白的含量，在肿瘤等胶原相关疾病的早期诊断与疗效评价中具有广阔的应用前景。
一种电荷排斥作用诱导胶原多肽探针制备方法

[发明专利]一种不依赖连接的核酸恒温滚环扩增方法及其应用-CN202210932372.2在审
发明人：林东旭;杨玉霞;张亚飞 -专利权人：迈杰转化医学研究（苏州）有限公司
申请日： 2022-08-04 - 公布日： 2023-03-31 - 主分类号： C12Q1/6844 文献下载
摘要：本发明提供了一种不依赖连接的核酸恒温滚环扩增方法及其应用，所述核酸恒温滚环扩增方法包括：靶核酸与探针退火互补配对形成环状退火结构，所述环状退火结构在具有链置换功能的聚合酶的作用下进行延伸和滚环扩增；所述环状退火结构包括首尾相连接的退火结合区一、未配对的单链靶核酸、退火结合区二和未配对的单链探针；所述退火结合区一为所述靶核酸的5’端与所述探针的3’端100％互补配对形成的；所述退火结合区二为所述靶核酸的3’端与所述探针的5’端100％互补配对形成的
一种不依赖连接核酸恒温扩增方法及其应用

[发明专利]芘标记的单链DNA荧光探针及其制备方法-CN201210363857.0有效
发明人：王国杰;张瑞辰;杨领叶;赵敏;董杰 -专利权人：北京科技大学
申请日： 2012-09-26 - 公布日： 2013-01-09 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明涉及一种荧光基团芘接枝的聚4-乙烯基吡啶阳离子聚电解质的合成，并由此制备单链DNA复合荧光探针的方法。该聚电解质与单链核酸在缓冲液中通过静电及疏水作用互相吸附形成复合探针，实验中通过荧光变化来检测目标单链DNA碱基与探针DNA是否互补。本发明的优点是合成路线简单，容易操作，成本低，且探针对DNA的特异性识别快速、灵敏。
标记 dna 荧光探针及其制备方法

[发明专利]一种用于检测碱性磷酸酶的荧光化学方法与应用-CN201811390869.6有效
发明人：邢曦雯;王媛媛;姚盛中 -专利权人：暨南大学
申请日： 2018-11-21 - 公布日： 2022-03-29 - 主分类号： C12Q1/44 文献下载
摘要：该方法包括如下步骤：首先，设计一条3'端被磷酸化的单链DNA作为DNA探针，在ALP存在时，DNA探针的3'末端去磷酸化暴露出3'‑OH末端；然后，TdT在DNA探针的3'‑OH末端催化加成dTTPs使其延伸生成富含poly‑T序列的单链探针DNA，其与汞离子形成T‑HgII‑T结构介导的双链DNA，加入核酸染料后根据检测到的荧光强度信号与ALP的浓度绘制出检测曲线；最后将待测样品替换
一种用于检测碱性磷酸酶荧光化学方法应用

[发明专利]标记信号放大探针的制备方法-CN00116306.X无效
发明人：缪晓辉;孔宪涛;戚中田 -专利权人：上海长征医院
申请日： 2000-06-02 - 公布日： 2000-11-29 - 主分类号： G01N33/53 文献下载
摘要：一种标记信号放大探针的制备方法,步骤包括“探针－引物”的设计与合成,“探针”由16～30个核苷酸(nt)组成,位于5′端;“引物”位于3′端,长为16～30nt;“探针”和“引物”由“连接臂”连接;“探针－引物”作上游引物,以一种基因为模板,与下游引物一起作聚合酶链反应,获得一端为单链,其余部分为双链的DNA片段,且通过PCR,在双链中掺入标记物,获得标记信号放大探针。利用该放大探针可建立各种基因的体外杂交检测技术。本发明制备方法简单、易行,信号放大倍数可在一定范围内调整。用于检测乙肝病毒基因组,灵敏度高、特异性强、操作简便、省时、省材,实用性很强。
标记信号放大探针制备方法

[发明专利]基于多重扩增和探针捕获的组合对单链DNA序列富集测序的方法及在突变检测中的应用-CN202110882685.7在审
发明人：王伟伟;刘萌;刘星宇;张利利;田埂 -专利权人：元码基因科技（北京）股份有限公司
申请日： 2021-08-02 - 公布日： 2021-10-01 - 主分类号： C12Q1/6858 文献下载
摘要：本发明公开基于多重扩增和探针捕获的组合对单链DNA序列富集测序的方法及在突变检测中的应用。本发明的方法首先对DNA进行单链化，在随后的单链建库过程中有效地将双链DNA和单链DNA被建库保留进入下一个实验环节。本发明的方法能够克服单链建库单链ctDNA漏检的问题，提供了一种极大改善低质量和微量DNA样本建库效果的技术方案。
基于多重扩增探针捕获组合 dna 序列富集方法突变检测中的应用

[发明专利]一种用于前列腺癌标志物miRNA-21检测的晶体管传感器的制备-CN202210322202.2在审
发明人：李金华;邓明华;王贤保 -专利权人：湖北大学
申请日： 2022-03-30 - 公布日： 2023-10-24 - 主分类号： G01N27/414 文献下载
摘要：本发明提出一种液栅石墨烯晶体传感器实现对一种前列腺癌标志物miRNA‑21的实时检测，所述方法采用单链DNA作为探针，实现对一种前列腺癌标志物miRNA‑21的实时检测。本发明探针单链DNA固定在液栅石墨烯晶体管金栅电极表面，单链DNA探针能够与电解质溶液中的miRNA‑21进行碱基互补配对杂化，由于miRNA‑21的磷酸骨架带负电，当单链探针DNA与目标miRNA‑21
一种用于前列腺癌标志 mirna 21 检测晶体管传感器制备

[发明专利]生物探针及其应用-CN201380062825.X在审
发明人：卡梅伦·亚历山大·弗雷林;巴纳比·巴姆福思;布鲁诺·弗拉维奥·诺盖拉·德·索萨·苏亚雷斯;托马斯·亨利·艾萨克;鲍里斯·布赖纳;亚历山德拉·纳塔莱;米歇尔·阿马西奥 -专利权人：贝斯4创新公司
申请日： 2013-10-04 - 公布日： 2015-09-02 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了生物探针，其特征在于包含末端连接两个不同寡核苷酸区的单链核苷酸区其中寡核苷酸区中至少一个包含具有特征性检测特性的可检测元件且其中可检测元件被布置在寡核苷酸区上以致可检测特性的可检测性低于当相同数量的可检测元件结合到相应数量的单个核苷酸时该生物探针尤其可用于捕获单个核苷酸或单链核苷酸以产生可由限制酶和外切核酸酶降解的占用探针从而产生携带可检测形式的可检测元件的单个核苷酸。典型地可检测元件是荧光团且通过如使用多个相邻的荧光团或荧光团和与其连接的猝灭剂的混合物使探针中相应的特征性荧光不可检测。优选地单链核苷酸区由单个核苷酸组成，其关联的核苷酸碱基是DNA或RNA中发现的特征性核苷酸碱基之一。
生物探针及其应用