[发明专利]一种大肠杆菌调节蛋白AraC突变体蛋白AraCm及其应用有效

专利信息
申请号: 202310177211.1 申请日: 2023-02-28
公开(公告)号: CN116284276B 公开(公告)日: 2023-10-03
发明(设计)人: 周正雄;汪仁;高萌;李洁;孙彬 申请(专利权)人: 江苏省中国科学院植物研究所
主分类号: C07K14/245 分类号: C07K14/245;C12N15/31;C12N15/70;C12N1/21;C12Q1/02;G01N21/64;C12N15/65;C12R1/19
代理公司: 南京智转慧移知识产权代理有限公司 32649 代理人: 王伟
地址: 210014 江*** 国省代码: 江苏;32
权利要求书: 查看更多 说明书: 查看更多
摘要: 发明公开了一种大肠杆菌调节蛋白AraC突变体蛋白AraCm及其应用,属于生物医药技术领域。本申请通过随机突变,获得能与戊基二乙酸内酯相结合的突变体AraCm。在此基础上,对突变体AraCm序列进行表征,通过串联BAD启动子介导的抗性基因表达框,得到戊基二乙酸内酯浓度与大肠杆菌菌株生长的关系;或者通过结果表明,通过串联BAD启动子介导的荧光蛋白基因表达框,得到戊基二乙酸内酯浓度与荧光蛋白强度的关系。AraCm的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,AraCm的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。这对检测聚酮合酶突变体催化过程合成副产物戊基二乙酸内酯水平的高通量检测具有重要的应用价值。
搜索关键词: 一种 大肠杆菌 调节 蛋白 arac 突变体 aracm 及其 应用
【主权项】:
暂无信息
下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。

该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于江苏省中国科学院植物研究所,未经江苏省中国科学院植物研究所许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服

本文链接:http://www.vipzhuanli.com/patent/202310177211.1/,转载请声明来源钻瓜专利网。

同类专利
  • 一种大肠杆菌全局调控因子环腺苷酸受体蛋白突变体、基因工程菌及应用-202210632917.8
  • 吴绵斌;袁东旭;冯磊磊 - 浙江大学
  • 2022-06-01 - 2023-10-24 - C07K14/245
  • 本发明涉及基因工程技术领域,具体涉及一种大肠杆菌全局调控因子环腺苷酸受体蛋白突变体、基因工程菌及应用。本发明对大肠杆菌全局调控因子CRP蛋白进行改造,对野生型CRP结合口袋的五个关键位点144,112,127,128,83位氨基酸进行组合突变,将112位氨基酸I突变为L、127位T突变为I、144位A突变为T,83位氨基酸S突变为H、128位S突变为P时,有效提高了木糖转运速率和木糖醇生产速率,突变株进行20L发酵罐发酵,41h生产的木糖醇浓度为175.01g/L,木糖醇时空产率4.32g/L/h,木糖转化率100%。本发明还通过CRP蛋白的全局调控,提高了菌株对半纤维素水解液中主要毒性物质,尤其是大分子色素和乙酸盐的耐受性,突变株利用水解液发酵的最大OD600可达140。
  • 一种大肠杆菌调节蛋白AraC突变体蛋白AraCm及其应用-202310177211.1
  • 周正雄;汪仁;高萌;李洁;孙彬 - 江苏省中国科学院植物研究所
  • 2023-02-28 - 2023-10-03 - C07K14/245
  • 本发明公开了一种大肠杆菌调节蛋白AraC突变体蛋白AraCm及其应用,属于生物医药技术领域。本申请通过随机突变,获得能与戊基二乙酸内酯相结合的突变体AraCm。在此基础上,对突变体AraCm序列进行表征,通过串联BAD启动子介导的抗性基因表达框,得到戊基二乙酸内酯浓度与大肠杆菌菌株生长的关系;或者通过结果表明,通过串联BAD启动子介导的荧光蛋白基因表达框,得到戊基二乙酸内酯浓度与荧光蛋白强度的关系。AraCm的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,AraCm的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。这对检测聚酮合酶突变体催化过程合成副产物戊基二乙酸内酯水平的高通量检测具有重要的应用价值。
  • 基于AmpR蛋白突变的转录因子、启动子及构建方法-202310808525.7
  • 徐逸龙;余泓彬 - 四川大学华西医院
  • 2023-07-04 - 2023-09-15 - C07K14/245
  • 本发明涉及生物技术领域,本发明提供基于AmpR蛋白突变的转录因子、启动子及构建方法,本发明所述的转录因子改造于一种源于大肠杆菌的肽聚糖代谢相关蛋白AmpR,通过在原始AmpR序列蛋白中引入G102E突变后获得,其能够高效二聚化并结合特定的DNA序列。当把上述特定DNA序列置于启动子区域时,会阻碍RNA聚合酶的工作从而抑制该基因的表达。本发明所述工程化转录因子及其对应的启动子在基因调控及小分子响应方面表现出显著效果,为合成生物学基因路线设计提供了新的工具。
  • 一种赖氨酸外排蛋白及其应用-202210065236.8
  • 朱蕾蕾;聂志华 - 中国科学院天津工业生物技术研究所
  • 2022-01-20 - 2023-08-01 - C07K14/245
  • 本发明公开了一种赖氨酸外排蛋白及其应用。本发明所提供的赖氨酸外排蛋白为精氨酸外排蛋白突变体,具体为将ArgO精氨酸外排蛋白进行点突变后所得,突变位点含有如下中的部分或全部:自N端起第3位、28位、58位、75位、78位、105位、116位、121位、145位、168位、188位、196位和205位。本发明通过定向进化的方法获得了提高赖氨酸外排量的精氨酸外排蛋白突变体。相比于野生型几乎不外排赖氨酸,突变体外排赖氨酸的能力明显提升。本发明所得精氨酸外排蛋白突变体更有利于提高赖氨酸的产量,对获得新的外排赖氨酸的外排蛋白奠定了基础。
  • 一种大肠杆菌lipid A结合基元PCK及其制备方法与应用-202110992989.9
  • 王秀敏;戴小枫;李秀梅;刘魏魏 - 中国农业科学院饲料研究所
  • 2021-08-27 - 2023-07-21 - C07K14/245
  • 本发明公开了与大肠杆菌脂质A特异性结合的多肽及其在抑制革兰氏阴性菌中的应用。该多肽的氨基酸序列为序列表中的SEQIDNo.1。本发明的多肽能够通过与脂质A结合从而特异性抑制革兰氏阴性菌,达到抗革兰氏阴性菌感染的效应,该多肽具有低或无溶血性,在128μg/mL浓度时,其溶血率为0.4%。针对大肠杆菌,本发明的多肽与小檗碱联合用药的FIC指数值为0.34,具有协同抑菌效应,且联合用药时无溶血性和低细胞毒性。本发明的多肽或其药用盐及其衍生物可以作为新的抑菌制剂,尤其可与小檗碱联合用药,可应用于开发抑菌药物。
  • 一种基于MCR-1蛋白的新型抗菌肽及其应用-202310228588.5
  • 田国宝;梁露洁;冯思源;徐霖 - 中山大学
  • 2023-03-09 - 2023-07-04 - C07K14/245
  • 本发明公开了一种基于MCR‑1蛋白的新型抗菌肽及其应用。所述抗菌肽的序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示。本发明的抗菌肽的合成长度较短,不但可以大大缩减生产成本,同时也能有效降低抗菌肽的免疫原性和细胞毒性。通过实验也证实两种小分子肽均可结合并破坏细菌细胞膜起作用,在体内和体外均具有广谱的抗菌活性。而且本发明的抗菌短肽可以与黏菌素协同作用,显著提高黏菌素的抑菌活性,可以联合用药,为耐黏菌素的耐药菌感染的治疗提供了新的治疗方案。
  • 高丝氨酸转运蛋白突变体及其制备方法和应用-202310223882.7
  • 刘君;徐宁 - 中国科学院天津工业生物技术研究所
  • 2023-03-09 - 2023-06-30 - C07K14/245
  • 本发明利用体内连续定向进化方法,筛选获得了多种高丝氨酸外排能力增强的转运蛋白RhtA突变体,能够赋予宿主菌具有增强的高丝氨酸胁迫耐受能力,所述突变体相对于大肠杆菌野生型RhtA转运蛋白,存在A22V、P119L、T235I中一个或多个突变。实验表明分别过表达上述RhtA突变体,生产底盘菌的L‑高丝氨酸发酵产量可提升约48%‑108%。因此,本发明提供的有益突变体可以为工业化高效生产L‑高丝氨酸及下游代谢产物奠定了良好的基础。
  • LacI突变体及其应用-202310234277.X
  • 梁朝宁;吴结缘;唐双焱 - 中国科学院微生物研究所
  • 2023-03-13 - 2023-06-30 - C07K14/245
  • 本发明公开了LacI突变体及其应用,属于生物技术领域。本发明中所述LacI突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.2、3或4所示。本发明在LacIQ突变体基础上,通过定向进化筛选获得LacI调控蛋白突变体,该突变体可增强与DNA序列结合能力,从而降低本底渗漏表达(低于野生型渗漏表达的5%),同时将上述突变体用于制备高效生物传感器同样也能取得较好的效果。
  • 内含肽Ssp tau、编码基因及其在制备四肽-5中的应用-202310109787.4
  • 王海梅;张志乾;江翱;吴奕瑞;王帆;崔华;邱益;郭羽;傅玮;王嘉鹏 - 广州市乾相生物科技有限公司
  • 2023-02-10 - 2023-06-23 - C07K14/245
  • 本发明公开了一种内含肽Ssp tau,其特征在于其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。还公开了其编码基因以及在制备四肽‑5中的应用。还公开了内含肽Ssp tau‑四肽‑5重组蛋白、相应的编码基因、表达载体及表达宿主菌。本发明公开了一种全新的内含肽Ssp tau及内含肽Ssp tau介导的四肽‑5表达和分离纯化技术。将Ssp tau与四肽‑5组成融合蛋白,将融合蛋白基因序列构建到PET‑28a(+)上,获得四肽‑5的重组表达载体。再经过诱导表达、细胞破碎、超滤、内含肽自切割、二次超滤和旋蒸冻干等简单的步骤,可以高效地获得高纯度的四肽‑5。这种生物合成方法适用于四肽‑5的工业化生产,具有较大的市场价值。
  • 一种CRP突变型基因及其应用-202310234936.X
  • 梁朝宁;吴结缘;张旋旋;唐双焱 - 中国科学院微生物研究所
  • 2023-03-13 - 2023-06-23 - C07K14/245
  • 本发明公开了一种CRP突变型基因及其应用,属于基因工程技术领域。该CRP突变型基因的氨基酸序列如SEQ ID NO.7或SEQ ID NO.8或SEQ ID NO.9所示,其可以显著解除“葡萄糖抑制”效应,同时在以葡萄糖为碳源的基本培养基中,激活糖酵解和TCA循环,强化葡萄糖的利用和生物合成,促进菌株生长,其中氨基酸序列如SEQ ID NO.7、8、9所示的CRP突变型基因还具有提高菌株香草醛或柚皮素表达量的作用。
  • 大肠杆菌重组外膜蛋白A包涵体蛋白的复性纯化方法-202010854423.5
  • 崔玉东;肖雪 - 黑龙江八一农垦大学
  • 2020-08-24 - 2023-05-26 - C07K14/245
  • 本发明涉及一种大肠杆菌重组外膜蛋白A包涵体蛋白的复性纯化方法,该方法包括以下步骤:(1)诱导表达的rOmpA包涵体蛋白沉淀的收集;(2)rOmpA包涵体蛋白用8M尿素溶液变性;(3)用含15mMβ‑环糊精、pH8.5的100mM Tris‑HCl缓冲液进行5倍稀释复性;(4)复性的rOmpA亲和层析纯化;(5)纯化的rOmpA置透析袋中,于pH7.6的PBS缓冲液中4℃透析12h以上,离心后收集上清,即获得纯化的复性rOmpA蛋白。本发明对表达的rOmpA包涵体蛋白进行复性和纯化,可获得纯度高达95%的可溶性rOmpA蛋白;本发明使用的复性方法简便快捷,有效解决了大肠杆菌rOmpA包涵体蛋白的复性纯化问题,为大规模生产利用rOmpA降低成本。
  • 活性聚集肽及其应用-202210984387.3
  • 李爽;马佳媛;朱晁谊;刘佩伶 - 华南理工大学
  • 2022-08-17 - 2023-05-12 - C07K14/245
  • 本发明公开了活性聚集肽及其应用,属于生物工程技术领域。该类活性聚集肽来源于大肠杆菌Escherichia coli CFT073的α‑溶血素HlyA,共包含五个序列,分别为HlyA218、HlyA60、H12、H1和H2。通过将该类活性聚集肽与目的蛋白融合表达,可介导目的蛋白在宿主细胞内形成活性包涵体,且该类短肽诱导蛋白活性聚集率高、具有刺激重组菌快速生长的潜力。该类活性聚集肽可应用于重组蛋白的无柱化纯化和原位固定化,生产成本低,步骤简便。
  • 氨基酸产量相关蛋白编码基因rplP及其生物材料和应用-202211221461.2
  • 魏爱英;孟刚;苏厚波;赵春光;贾慧萍;田斌 - 宁夏伊品生物科技股份有限公司
  • 2022-10-08 - 2023-04-14 - C07K14/245
  • 本发明公开了氨基酸产量相关蛋白rplP及其生物材料和应用,属于生物技术领域。本申请所要解决的问题是调控微生物氨基酸产量,氨基酸具体可为L‑苏氨酸、L‑色氨酸、L‑精氨酸和L‑缬氨酸。所述蛋白质为如下任一种蛋白质:A1)氨基酸序列是序列2第73位异亮氨酸突变为亮氨酸、苯丙氨酸、缬氨酸、天冬氨酸、丙氨酸或甘氨酸所示序列的蛋白质;A2)将A1)的氨基酸序列经过氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与A1)所示的蛋白质具有80%以上的同一性且具有调控微生物氨基酸产量的蛋白质;A3)在A1)或A2)的N端和/或C端连接标签得到的具有相同功能的融合蛋白质。调控rplP蛋白基因表达的物质可用于调控微生物的氨基酸产量或氨基酸产量菌株的育种。
  • L-酪氨酸产量相关蛋白yccE及其生物材料和应用-202211590632.9
  • 孟刚;赵春光;魏爱英;米杰;贾慧萍;田斌;毕国东 - 宁夏伊品生物科技股份有限公司
  • 2022-12-12 - 2023-04-11 - C07K14/245
  • 本发明公开了L‑酪氨酸产量相关蛋白yccE及其生物材料和应用,属于生物技术领域。本申请所要解决的问题是调控微生物L‑酪氨酸产量。所述蛋白质为如下任一种蛋白质:所述蛋白质为下述任一种:A1)蛋白质,所述蛋白为yccE蛋白或将所述yccE蛋白的氨基酸序列的第415位精氨酸残基替换为下述任一种:苯丙氨酸残基、亮氨酸残基、异亮氨酸、甲硫氨酸残基、缬氨酸残基、丝氨酸残基、脯氨酸残基、苏氨酸残基、丙氨酸残基、酪氨酸残基、组氨酸残基、谷氨酰胺残基、天冬酰胺残基、赖氨酸残基、天冬氨酸残基、谷氨酸残基、半胱氨酸残基、色氨酸残基、丝氨酸残基或甘氨酸残基;所述yccE蛋白是氨基酸序列为序列2的蛋白质;A2)将A1)的蛋白质经过氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与A1)所示的蛋白质具有80%以上的同一性且具有调控微生物的L‑酪氨酸产量的蛋白质;A3)在A1)或A2)的N端和/或C端连接标签得到的具有相同功能的融合蛋白质。调控yccE蛋白基因表达的物质可用于调控微生物的L‑酪氨酸产量或L‑酪氨酸产量菌株的育种。
  • 氨基酸产量相关蛋白编码基因pyrG及其相关菌株、生物材料和应用-202211220887.6
  • 孟刚;赵春光;魏爱英;米杰;贾慧萍;田斌;毕国东 - 黑龙江伊品生物科技有限公司
  • 2022-10-08 - 2023-04-07 - C07K14/245
  • 本发明公开了氨基酸产量相关蛋白pyrG及其生物材料和应用,属于生物技术领域。本申请所要解决的问题是调控微生物氨基酸产量,氨基酸具体可为L‑苏氨酸、L‑色氨酸、L‑精氨酸和L‑缬氨酸。所述蛋白质为如下任一种蛋白质:A1)氨基酸序列是序列2第450位天冬氨酸替换为为组氨酸、丝氨酸、甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸或苯丙氨酸所示序列的蛋白质;A2)将A1)的氨基酸序列经过氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与A1)所示的蛋白质具有80%以上的同一性且具有调控微生物氨基酸产量的蛋白质;A3)在A1)或A2)的N端和/或C端连接标签得到的具有相同功能的融合蛋白质。调控pyrG蛋白基因表达的物质可用于调控微生物的氨基酸产量或氨基酸产量菌株的育种。
  • L-酪氨酸产量相关蛋白yedZ及其生物材料和应用-202211622967.4
  • 魏爱英;孟刚;苏厚波;赵春光;贾慧萍;田斌 - 宁夏伊品生物科技股份有限公司
  • 2022-12-16 - 2023-03-28 - C07K14/245
  • 本发明公开了L‑酪氨酸产量相关蛋白yedZ及其生物材料和应用,属于生物技术领域。本申请所要解决的问题是调控微生物L‑酪氨酸产量。所述蛋白质为如下任一种蛋白质:所述蛋白质为下述任一种:A1)蛋白质,所述蛋白为yedZ蛋白或将所述yedZ蛋白的氨基酸序列的第180位丙氨酸残基缬氨酸残基,所述yedZ蛋白是氨基酸序列为序列2的蛋白质;A2)将A1)的蛋白质经过氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与A1)所示的蛋白质具有80%以上的同一性且具有调控微生物L‑酪氨酸产量的蛋白质;A3)在A1)或A2)的N端和/或C端连接标签得到的具有调控微生物L‑酪氨酸产量得融合蛋白质。调控yedZ蛋白基因表达的物质可用于调控微生物的L‑酪氨酸产量或L‑酪氨酸产量菌株的育种。
  • 纤维寡糖转运蛋白LacY的突变位点、突变转运蛋白LacY及其制备方法和应用-201910075523.5
  • 李小明;崔金明;刘陈立 - 广州中国科学院先进技术研究所
  • 2019-01-25 - 2023-03-28 - C07K14/245
  • 本发明属于基因工程领域,具体涉及纤维寡糖转运蛋白LacY的突变位点、突变转运蛋白LacY及其制备方法和应用。本发明的高效转运纤维寡糖的突变转运蛋白的制备方法,包括:(1)定向进化LacY对纤维寡糖的底物特异性;(2)分析步骤(1)进化样品的氨基酸序列,获取突变位点;(3)构建突变转运蛋白LacY的表达载体,并进行表达获得突变转运蛋白LacY。本发明还提供用上述方法得到的纤维二糖、纤维三糖、纤维四糖的突变转运蛋白LacY的表达载体,含所述表达载体的微生物,以及他们在纤维质利用领域的应用方法。本发明方法制得的突变转运蛋白LacY能够高效转运纤维寡糖,提高纤维质的利用。
  • 大肠杆菌组合物及其方法-202180016281.8
  • R·G·K·唐纳德;R·帕恩 - 辉瑞公司
  • 2021-02-20 - 2023-01-13 - C07K14/245
  • 本发明提供了一种衍生自大肠杆菌的多肽或其片段,包括其组合物及方法。在一个实施方案中,该组合物包含衍生自大肠杆菌的多肽或其片段,及衍生自大肠杆菌脂多糖的经修饰的O‑多糖分子或其缀合物。在另一方面,该组合物进一步包含衍生自肺炎克雷伯氏菌的经修饰的O‑多糖分子其缀合物。
专利分类
×

专利文献下载

说明:

1、专利原文基于中国国家知识产权局专利说明书;

2、支持发明专利 、实用新型专利、外观设计专利(升级中);

3、专利数据每周两次同步更新,支持Adobe PDF格式;

4、内容包括专利技术的结构示意图流程工艺图技术构造图

5、已全新升级为极速版,下载速度显著提升!欢迎使用!

请您登陆后,进行下载,点击【登陆】 【注册】

关于我们 寻求报道 投稿须知 广告合作 版权声明 网站地图 友情链接 企业标识 联系我们

钻瓜专利网在线咨询

400-8765-105周一至周五 9:00-18:00

咨询在线客服咨询在线客服
tel code back_top