[发明专利]基因重组表达G蛋白偶联受体方法有效
| 申请号： | 201610755793.7 | 申请日： | 2013-11-18 |
| 公开（公告）号： | CN106397604B | 公开（公告）日： | 2019-01-04 |
| 发明（设计）人： | 沈坚;蔡建华;姜帆;李娜;魏文韬;曾秀红;苏晓燕;韩敏;任德林;毛晨 | 申请（专利权）人： | 维亚生物科技（上海）有限公司 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12N15/62 |
| 代理公司： | 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 | 代理人： | 杜蔚琼 |
| 地址： | 201203 上海市浦东新区中*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种G蛋白偶联受体融合表达蛋白，其特征在于：来源于真核生物，其中，所述G蛋白偶联受体融合表达蛋白选自APC蛋白片段或与该片段序列同源性大于90％的蛋白；或RGS16蛋白片段或与该片段序列同源性大于90％的蛋白；或DNJ蛋白片段或与该片段序列同源性大于90％的蛋白。本发明涉及的G蛋白偶联受体融合表达蛋白，通过把这些融合表达蛋白与G蛋白偶联受体进行融合表达从而达到增加G蛋白偶联受体表达产率及G蛋白偶联受体的体外稳定性，本发明所涉及的G蛋白偶联受体融合表达蛋白可广泛应用于G蛋白偶联受体的研究。 | ||
| 搜索关键词： | 蛋白 受体 融合 表达 | ||
【主权项】：
1.一种采用G蛋白偶联受体融合表达蛋白构建的融合蛋白，其特征在于：所述G蛋白偶联受体融合表达蛋白来源于真核生物；其中，所述G蛋白偶联受体融合表达蛋白选自DNJ蛋白片段，其编码基因序列如SEQ ID NO.6所示，其氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示；所述融合表达的方法为：在G蛋白偶联受体的N‑末端、C‑末端或膜内环区3插入所述DNJ蛋白片段构建融合蛋白；所述G蛋白偶联受体为腺苷A2a蛋白；所述腺苷A2a蛋白与所述DNJ蛋白进行融合表达，所得到的融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.9所示。
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- 汤书兵;周伟;袁伟明 - 广州市妇女儿童医疗中心
- 2019-05-21 - 2019-09-24 - C07K19/00
- 本发明公开了一种基于内含肽介导纳米载体及其应用，旨在提供一种综合使用基因工程技术和内含肽介导的蛋白编辑剪切技术，完美解决encapsulin的C端亚稳定性这一不利因素，提供一种通用的纳米载体，可在encapsulin的表面特异、高效递送不同的货物分子的载体，该纳米载体是通过下述步骤构建的：encapsulin蛋白的C端通过基因融合的方法引入intN、gb1和halo共3个串联蛋白形成重组蛋白encapsulin‑intN‑gb1‑halo；60个重组蛋白单体自装配成纳米颗粒，其暴露的intN‑gb1‑halo作为通用“适配器”，与货物重组蛋白gb1‑intC和cargo混合后，在DTT的帮助下发生分子重组；内含肽intein自我切除，形成副产物intN‑gb1‑halo和gb1‑intC，而encapsulin与cargo共价偶联，生产目的产物encapsulin‑cargo；属于纳米载体技术领域。
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