[发明专利]一种驼乳乳清抗肿瘤活性蛋白及其制备方法和应用在审

专利信息
申请号: 201910222766.7 申请日: 2019-03-22
公开(公告)号: CN110041424A 公开(公告)日: 2019-07-23
发明(设计)人: 杨洁;张兆肖;高杨;豆智华;王红娟 申请(专利权)人: 新疆大学
主分类号: C07K14/76 分类号: C07K14/76;C07K1/34;A61K38/38;A61K45/06;A61P35/00
代理公司: 西安亚信智佳知识产权代理事务所(普通合伙) 61241 代理人: 段国刚
地址: 830046 新疆维吾*** 国省代码: 新疆;65
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摘要: 发明提供一种驼乳乳清抗肿瘤活性蛋白及其制备方法和应用,通过分离乳清蛋白采用超滤的方法获得,以新疆双峰驼乳清蛋白为研究对象,通过组分CM‑1,含有188种已知蛋白质,含有糖基化依赖性细胞粘附分子1、α‑乳白蛋白、肽聚糖识别蛋白1、维生素D结合蛋白、乳过氧化物酶、IgG‑Fc片段结合蛋白、14‑3‑3蛋白质、Igγ‑3C、乳铁蛋白、肌动蛋白、胺氧化酶、核连蛋白、泛素‑60s核糖体蛋白L4、RAS致癌基因家族成员等多种与肿瘤发生发展密切相关的蛋白质。实验表明,CM‑1对肿瘤细胞有明显抑制增殖作用,与化疗药物联合给药,抑制肿瘤细胞增殖的效果明显优于化疗药物单独给药,为肿瘤治疗提供一种多药联合方案,具有广泛的开发价值。
搜索关键词: 蛋白质 抗肿瘤活性蛋白 制备方法和应用 乳乳清 给药 蛋白 抑制肿瘤细胞增殖 维生素D结合蛋白 肽聚糖识别蛋白 分离乳清蛋白 化疗药物联合 乳过氧化物酶 依赖性细胞 胺氧化酶 化疗药物 肌动蛋白 结合蛋白 乳清蛋白 乳铁蛋白 研究对象 抑制增殖 粘附分子 肿瘤发生 肿瘤细胞 肿瘤治疗 糖基化 超滤 泛素 联合 开发
【主权项】:
1.一种驼乳乳清抗肿瘤活性蛋白CM‑1,其特征在于,所述的抗肿瘤活性蛋白CM‑1具体制备方法如下:(1)驼乳样品过滤除杂,脱脂,收集脱脂乳,调节pH至4.6,于30‑80℃水浴加热10‑45min或放置过夜后,离心去除沉淀,收集上清液,调节pH至初始值,分离乳清蛋白,其中超滤法经截留分子量10KDa‑100KDa滤膜过滤,盐析法采用硫酸铵饱和度20%‑70%进行分级沉淀,经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,得到分子量大小在10KDa‑100KDa范围的抗肿瘤活性蛋白组分CM‑1,冻干备用;(2)聚丙烯酰胺凝胶电泳检测蛋白组分CM‑1蛋白质多态性将步骤(1)获得的冻干组分用12‑15%分离胶与5%浓缩胶进行聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,考马斯亮蓝R‑250染色,通过与已知分子量的蛋白质标准品比对,测定其分子量,保证每批样本蛋白质多态性一致。
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