[发明专利]一种菠萝蛋白酶的高效提取方法在审

专利信息
申请号: 201810577249.7 申请日: 2018-06-07
公开(公告)号: CN108504646A 公开(公告)日: 2018-09-07
发明(设计)人: 杨沣;杨公正;杨洲 申请(专利权)人: 贵州沣稷生物科技有限公司
主分类号: C12N9/50 分类号: C12N9/50
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 551600 贵州省六盘水市毕*** 国省代码: 贵州;52
权利要求书: 查看更多 说明书: 查看更多
摘要: 发明提供一种菠萝蛋白酶的高效提取方法,包括如下步骤:S1菠萝汁的获取;S2上清液的获取:向所述菠萝汁中加入茶多酚和乙二胺四乙酸二钠,混匀后再加入茶皂素和壳寡糖,先快速搅拌再慢速搅拌,然后离心收集上清液;S3上清液的超滤:对所述上清液进行超滤浓缩,得到超滤浓缩液;S4超滤浓缩液的真空冷冻干燥。本发明属于酶提取技术领域,本发明提供的高效提取方法在超滤前有效去除了菠萝蛋白酶以外的杂蛋白和大颗粒物质,减少了后续超滤的堵塞和污染发生,提高了超滤效率,超滤的酶活截留率高达90%以上,得到的菠萝蛋白酶中的杂蛋白含量较少,纯度较高。
搜索关键词: 超滤 菠萝蛋白酶 上清液 高效提取 超滤浓缩液 菠萝汁 杂蛋白 乙二胺四乙酸二钠 真空冷冻干燥 大颗粒物质 超滤浓缩 快速搅拌 离心收集 慢速搅拌 茶多酚 茶皂素 截留率 壳寡糖 酶提取 混匀 酶活 堵塞 污染
【主权项】:
1.一种菠萝蛋白酶的高效提取方法,其特征在于:包括如下步骤:S1菠萝汁的获取:收集菠萝原料,预冷冻后,经破碎或捣碎后压榨,收集菠萝汁;S2上清液的获取:向所述菠萝汁中加入茶多酚和乙二胺四乙酸二钠,混匀后再加入茶皂素和壳寡糖,先快速搅拌再慢速搅拌,然后于2~10℃、3000~5000rpm条件下离心5~10min,收集上清液;茶多酚的加入量为菠萝汁重量的0.01~0.05%,乙二胺四乙酸二钠的加入量为菠萝汁重量的0.01~0.1%,茶皂素的加入量为菠萝汁重量的0.01~0.1%,壳寡糖的加入量为菠萝汁重量的0.05~0.2%;S3上清液的超滤:对所述上清液先采用截留分子量为50KD的超滤膜进行超滤浓缩,然后再采用截留分子量为20KD的超滤膜进行超滤浓缩至所述上清液体积的18~25%,超滤温度为2~10℃,超滤压力为0.02~0.15MPa,得到超滤浓缩液;S4超滤浓缩液的真空冷冻干燥:将所述超滤浓缩液进行真空冷冻干燥,得到菠萝蛋白酶。
下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。

该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于贵州沣稷生物科技有限公司,未经贵州沣稷生物科技有限公司许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服

本文链接:http://www.vipzhuanli.com/patent/201810577249.7/,转载请声明来源钻瓜专利网。

同类专利
  • 一种木瓜酶制剂的产业化制备方法及其应用-201710042430.3
  • 吴新良;林影;张锟 - 东莞市华琪生物科技有限公司
  • 2017-01-20 - 2019-10-25 - C12N9/50
  • 本发明公开了一种木瓜酶制剂的产业化制备方法,通过板框过滤与喷雾干燥两步法分离制备木瓜脂肪酶和木瓜蛋白酶,工艺科学、过程易控、材料利用率高,与通过缓冲液反复洗涤去除木瓜乳中的水溶性蛋白酶类的木瓜脂肪酶制备方法相比,产率高,酶活力回收率高,且可以同时提取木瓜脂肪酶和木瓜蛋白酶,水电消耗大大减小,非常适合工业产业化制备。本发明还公开了一种将制得的木瓜脂肪酶应用于酶解奶味香基制备的方法,将一定比例的稀奶油、PBS缓冲液、单硬脂酸甘油酯混合,在60‑80℃下充分搅拌乳化后,加入木瓜脂肪酶在30‑60℃下进行酶解,最后升温至85‑90℃灭酶30min后既得木瓜脂肪酶酶解奶味香基,其具有风味独特,可以用于调制独特风味的奶味产品。
  • 一种利用春雷霉素和多抗霉素菌渣生产生物氮素的方法-201910702863.6
  • 王卫富;潘忠成;马文艳;翁婧;李蒲民 - 陕西麦可罗生物科技有限公司
  • 2019-07-31 - 2019-10-08 - C12N9/50
  • 本发明涉及一种利用春雷霉素和多抗霉素菌渣生产生物氮素的方法,所述的微生物混合发酵由春雷霉素菌渣、多抗霉素菌渣、豆饼粉、碳酸钙、酸性蛋白酶、溶菌酶、淀粉酶、纤维素酶等组成。本发明将生产春雷霉素和多抗霉素过程产生的菌渣、浓缩母液经过多重酶解后,得到的含多种氨基酸、短肽、核苷及其他小分子物质,酶解过程分解了菌渣中残留的淀粉、豆饼纤维素和链霉菌菌丝,解决了春雷霉素和多抗霉素生产过程中菌渣固废利用价值低、处理周期长等问题,能够达到污染不扩散、就地解决,发酵原料的循环利用问题,提高了春雷霉素和多抗霉素菌渣作为生产固废的经济价值,具有很大的经济价值和社会价值。
  • 含碱性或中性蛋白酶的稳定酶制剂及其制备工艺和应用-201910481004.9
  • 张剑;徐淑宜;白晶 - 山西勇宁记科技有限公司;山西大学
  • 2019-06-04 - 2019-09-13 - C12N9/50
  • 本发明公开了一种含碱性或中性蛋白酶的稳定酶制剂及其制备工艺和应用。所述稳定酶制剂是通过如下方法和工艺制得。利用有机/无机聚合物和无机盐配制而成的复合絮凝剂将碱性或中性蛋白酶粗发酵液进行絮凝处理,经过过滤、抽滤或者板框压滤获得清澈的碱性或中性蛋白酶液,再向其中加入复合稳定剂,经超滤或过离子交换柱精制得到含复合稳定剂的精制碱性或中性蛋白酶液;然后将含有复合稳定剂精制碱性或中性蛋白酶液与复合抗氧化剂和巯基保护剂混合配制成含碱性或中性蛋白酶的稳定酶制剂。所述稳定酶制剂应用于洗涤剂产品中。本发明将高耗能的离心步骤省去,达到节能的目标,加入复合稳定剂、复合抗氧化剂和巯基保护剂可以使酶活力能得到长效保存。
  • 含2709碱性蛋白酶的稳定酶制剂及其制备工艺和应用-201910481097.5
  • 张剑;徐淑宜;白晶 - 山西大学;山西勇宁记科技有限公司
  • 2019-06-04 - 2019-09-06 - C12N9/50
  • 本发明公开了一种含2709碱性蛋白酶的稳定酶制剂及其制备工艺和应用。所述稳定酶制剂含有2709碱性蛋白酶、复合稳定剂、复合抗氧化剂和巯基保护剂,所述2709碱性蛋白酶、复合稳定剂、复合抗氧化剂和巯基保护剂的重量百分比为:25%~97.9%的2709碱性蛋白酶,0.04%~28.57%%的复合稳定剂,0.1%~5%的复合抗氧化剂,余量为巯基保护剂。工艺是利用复合絮凝剂将2709碱性蛋白酶粗发酵液进行絮凝处理,过滤后加入复合稳定剂,再经超滤或者过离子交换柱精制后加入复合抗氧化剂和巯基保护剂得到含2709碱性蛋白酶的稳定酶制剂,其应用于洗涤剂产品中。本发明可以将高耗能的离心步骤省去,达到节能的目标,加入复合稳定剂、复合抗氧化剂和巯基保护剂可以使酶活力能得到长效保存。
  • 一种定点标记的泛素特异性蛋白酶7及其制备方法和应用-201711436434.6
  • 金宗文;杨偲;袁静;罗擎颖;刘琳 - 深圳先进技术研究院
  • 2017-12-26 - 2019-07-02 - C12N9/50
  • 本发明公开了一种定点标记的泛素特异性蛋白酶7及其制备方法和应用,所述泛素特异性蛋白酶7进行定点突变后,采用带有标记基团的非天然氨基酸进行定点标记,其中,所述带有标记基团的非天然氨基酸通过tRNA合成酶/tRNA对引入;本发明通过优化蛋白表达流程,选择特定的标签及表达载体,并通过tRNA合成酶和tRNA对引入非天然氨基酸,各步骤各条件协同增效,提高了蛋白的表达量并完成了定点标记,操作简便,易于推广,不影响蛋白酶7的结构和活性,具有广阔的应用前景和巨大的市场价值。
  • 热稳定角蛋白酶及其用途-201480042450.5
  • 何孟樵;吴世雄;吴婉玲 - 中央研究院
  • 2014-07-17 - 2019-05-28 - C12N9/50
  • 本发明揭示一编码台湾嗜热菌WR‑220角蛋白酶的融合基因。该融合包含:(a)编码一蛋白分泌信号肽的第一DNA序列,其位于该融合基因的N端;(b)编码一台湾嗜热菌(M.taiwanensis)WR‑220角蛋白酶抑制域(inhibitory domain)的第二DNA序列,其与第一DNA序列以可转译框架(translation frame)连结;及(c)编码一台湾嗜热菌WR‑220角蛋白酶催化域(catalytic domain)的第三DNA序列,其与第二DNA序列以可转译框架连结,其中该融合基因为一种非自然存在的嵌合型DNA。此外,本发明亦揭示一种制备台湾嗜热菌WR‑220角蛋白酶的催化域的方法,及台湾嗜热菌WR‑220角蛋白酶的用途。
  • 一种热稳定性和比酶活提高的角蛋白酶突变体及其应用-201610908126.8
  • 张娟;陈坚;方真;堵国成;任春慧 - 江南大学
  • 2016-10-18 - 2019-05-17 - C12N9/50
  • 本发明公开了一种热稳定性和比酶活提高的角蛋白酶突变体及其应用,属于基因工程和酶工程技术领域。本发明的片段融合突变体DDFD在50到70℃温度范围内,比酶活大于出发型突变体DDF,最大提升值接近20%。此外,突变体DDFD比酶活提升明显,达到6050U/mg,比出发型突变体DDF增加了2000多个酶活单位。因此本发明的角蛋白酶突变体具有显著提高的热稳定性和比酶活,比野生型角蛋白酶更具有应用的价值和潜力。
  • 近平滑假丝酵母酸性蛋白酶SAPP1及表达、纯化方法-201910063465.4
  • 罗晓春;邓俊劲;李志伟;史丹;茅和花;梁爽 - 华南理工大学
  • 2019-01-23 - 2019-04-26 - C12N9/50
  • 本发明公开了近平滑假丝酵母酸性蛋白酶SAPP1及表达、纯化方法。所述的近平滑假丝酵母酸性蛋白酶SAPP1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述的酸性蛋白酶的酶活可达176.9U/mL,比酶活达1478.3U/mg,远高于现有的假丝酵母酸性蛋白酶;其水解效果也优于商业木瓜蛋白酶及酸性蛋白酶。本发明还提供了所述酸性蛋白酶SAPP1及表达、纯化方法,首次在毕赤酵母上成功表达纯化了近平滑假丝酵母酸性蛋白酶SAPP1,大幅度提高了SAPP1蛋白酶的产量,产量可高达312.5mg/L发酵液,具有广阔的推广应用价值。
  • 用于分离单细胞的含酶组合物及其制备方法和应用-201811595506.6
  • 吴文铭;彭俊雅;陈澔;黄丹;刘路路;洪夏飞;丛林;李冬晶;赵玉沛 - 中国医学科学院北京协和医院
  • 2018-12-25 - 2019-04-16 - C12N9/50
  • 本发明涉及酶工程领域,公开了用于分离单细胞的含酶组合物及其制备方法和应用。所述组合物含有VIII型胶原酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶抑制剂和脱氧核糖核酸酶,其中,所述VIII型胶原酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶抑制剂和脱氧核糖核酸酶的酶活力单位之间的比值为50‑90:0.5‑1:2000‑5000:1。本发明公开的制备用于分离单细胞的含酶组合物的方法包括:混合VIII型胶原酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶抑制剂和脱氧核糖核酸酶。本发明还公开了如上所述的组合物在从胰腺样品中分离单细胞中的应用。本发明能够实现单细胞的高收率和高活率提取,特别是胰腺组织,攻克了现有胰腺组织单细胞收率和活率较低的难题。
  • 一种促进蛋白酶高效分泌的方法-201811395739.1
  • 张国军;何球山;邓希 - 湖南汇升生物科技有限公司
  • 2018-11-22 - 2019-03-19 - C12N9/50
  • 本发明公开了一种促进蛋白酶高效分泌的方法,属于基因工程技术领域以及酶工程技术领域。此方法通过将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的碱性蛋白酶的第69位丙氨酸突变为精氨酸或在将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的碱性蛋白酶的第69位丙氨酸突变为精氨酸的基础上,进一步将第376位苏氨酸突变为异亮氨酸,大大提高了碱性蛋白酶的活性,对于进一步推动碱性蛋白酶的大规模工业化应用、降低产业成本具有重大的意义。
  • 一种供药学应用的蛋白酶变体-201811510324.4
  • 付信宝 - 淄博职业学院
  • 2018-12-11 - 2019-03-19 - C12N9/50
  • 本发明公开了一种供药学应用的蛋白酶变体,涉及生物工程技术技术领域,其包含序列表中的SEQ ID NO.1氨基酸序列,所述氨基酸序列去除原基因N端前25个氨基酸酶原激活肽段中的前20个氨基酸,N端激活肽剩余序列为肠激酶识别位点。该供药学应用的蛋白酶变体,以及以糖基化识别序列Asn‑Xaa‑Ser/Thr为模板,选取距离活性位点氨基酸Asp89较近的82位Asn作为拟糖基化位点,直接采用双酶切并插入pPIC9K相应的单克隆位点进行标记酶切,从而在根本上提高了蛋白酶变体在氨基酸层面的酶切处理效率,副产物更少,使之在药学上经过适配性连接之后的应用更加广泛,并且使得所得蛋白酶变体的适应性更高。
  • 一种蛋白酶及其制备低镉大米多肽的方法-201811218294.X
  • 谢艳萍;何球山;谭启程;张国军 - 湖南汇升生物科技有限公司
  • 2018-10-19 - 2019-03-01 - C12N9/50
  • 本发明公开了一种蛋白酶及其制备低镉大米多肽的方法,属于生物酶技术领域。本发明提供的一种适用于工业化生产的中性蛋白酶,其酶活可达5898.5U/mL,并具有镉离子吸附能力,该酶的酶解反应条件温和,反应周期短,能够实现一步法水解和吸附,应用该蛋白酶制备获得的大米蛋白肽含量达97.2%,镉含量仅为0.078mg/kg,镉吸附率达90%以上,能够有效降低工业生产成本,实现安全食品的绿色生产。
  • 一种大豆肽清洁生产用酶制剂-201810794769.3
  • 孙丽媛;孙绪春;孙文静;李芳 - 山东瑞芝生物科技有限公司
  • 2018-07-19 - 2019-01-29 - C12N9/50
  • 本发明公开了一种大豆肽清洁生产用酶制剂,按照质量百分比计,由以下组分配制而成:碱性蛋白酶39.2‑40%,酶活80000u/g;风味蛋白酶25.2‑25.6%,酶活127LAPu/g;中性蛋白酶34.8‑35.2%,酶活35000u/g,其中碱性蛋白酶、风味蛋白酶和中性蛋白酶的载体均采用精制硅藻土。本发明由碱性蛋白酶、风味蛋白酶和中性蛋白酶按照对应的质量比例进行配置而成,另外碱性蛋白酶、风味蛋白酶和中性蛋白酶的载体均采用精制硅藻土,极大的降低了大豆肽的生产成本、灰度含量和色度。
  • 一种鱿鱼内脏蛋白酶快速分离一体机-201820473252.X
  • 王家星;宋茹;韦荣编 - 浙江海洋大学
  • 2018-03-30 - 2019-01-08 - C12N9/50
  • 本实用新型公开一种鱿鱼内脏蛋白酶快速分离一体机,属于食品加工设备技术领域,包括箱体分为上下两层,上层为搅拌区,下层为打浆区,箱体外侧上方设有进料斗,进料斗右侧设有水箱,水箱左侧中部连接有进水支管,进水支管的出水端位于箱体内部,位于水箱内部的进水支管上安装有喷头,喷头与进水支管的连接处设有球体,球体上端开设有凹槽,球体下端设有喷水管,本装置缩短了鱿鱼内脏的混合搅拌时间,可将搅拌好的鱿鱼内脏打浆,便于蛋白酶的快速分离。
  • 一种复合空气净化复合生物酶及其制备方法-201810914093.7
  • 卢海平;唐仕晟;张莲莲 - 康墅(上海)环保科技有限公司
  • 2018-08-16 - 2018-12-25 - C12N9/50
  • 本发明涉及一种复合空气净化复合生物酶,其是由生物酶与蛋白酶、葡糖糖氧化酶、木质素酶、脂肪酶、填料组成的混合物;针对新装修办公室、新装修学校、新装修的家庭、家具、学校、宾馆酒店、商城等公共场所,厨房、洗手间、淋浴间,以及工厂车间空气净化除味等不同环境组合全谱的最优酶种,可以在多种污染源存在时发挥作用,生物活性高,其通过生物酶催化降解功能降解发气味以及抑制气味转化,实现去除味的目的,还提供了一种复合空气净化复合生物酶的制备方法。
  • 高转化率富硒花生芽纳豆激酶生产方法-201810760521.5
  • 刘荣甫 - 刘荣甫
  • 2018-07-03 - 2018-11-23 - C12N9/50
  • 本发明公开了高转化率富硒花生芽纳豆激酶生产方法,优点在于,高转化率的富硒花生芽其抗癌与抗心脑血管疾病的作用大大优于普通的硒花生芽,白藜芦醇的含量比花生或者葡萄高出几十倍,在硒花生芽上面分步接入纳豆菌种又成倍提高了效果,同时提高了有机硒的转化率,具体是分步在硒花生芽中加入15%‑50%的大豆,提高了纳豆菌的繁殖速度,解决了未转化的亚硒酸钠对纳豆菌有抑制繁殖的问题,硒花生芽本身具有优异的抗衰老作用,经过纳豆菌对无机硒进一步的吸收和有机转化,使得无机硒的含量降低了大约5倍,安全性和综合保健效果也成倍提高,用植物生长素920结合发酵的麦麸取代动物粪便解决了花生芽发臭的问题,是预防和治疗心血管、抗肿瘤、增强免疫的优异食品。
  • 复合木瓜蛋白酶及其应用-201410493227.4
  • 龙晓鹏;庞作雄;赖德杰 - 蒋东光
  • 2014-09-24 - 2018-11-13 - C12N9/50
  • 本发明涉及一种复合木瓜蛋白酶及其应用,所述复合木瓜蛋白酶,由下述重量份原料组成:木瓜蛋白酶50‑70份,生姜蛋白酶20‑40份,菠萝蛋白酶5‑15份。本发明还提供了所述复合木瓜蛋白酶在医药、保健工业、食品工业、美容工业、日化品工业、饲料工业及皮革工业中的应用。
  • 蛋白酶K在皮肤保健和化妆品领域中的应用-201410286055.3
  • 安海谦;鲁刚伟;冉波;任玉珍;张贵财 - 金普诺安蛋白质工程技术(北京)有限公司
  • 2014-06-24 - 2018-10-12 - C12N9/50
  • 本发明涉及蛋白酶K在美容化妆品行业的应用。更具体而言,本发明涉及天然蛋白酶K及其突变体在用于去除老化角质细胞的美容、化妆品行业中的应用。本发明利用培养的人造皮肤3D模型验证了蛋白酶K在去除皮肤老化角质层细胞、使皮肤恢复细嫩和光泽方面的用途,并显示出蛋白酶K具有很高的安全性,能够根据需要选择性地去除老化角质层,保留部分角质层及全部基底层,不会伤及剩余的皮肤表皮层和真皮层;本发明还验证了在实验用量范围内,蛋白酶K处理不诱导细胞因子IL‑1α产生,显示蛋白酶K对培养的人造皮肤3D模型中的活细胞没有刺激作用,而仅去除了表皮死细胞。
  • 一种菠萝蛋白酶的高效提取方法-201810577249.7
  • 杨沣;杨公正;杨洲 - 贵州沣稷生物科技有限公司
  • 2018-06-07 - 2018-09-07 - C12N9/50
  • 本发明提供一种菠萝蛋白酶的高效提取方法,包括如下步骤:S1菠萝汁的获取;S2上清液的获取:向所述菠萝汁中加入茶多酚和乙二胺四乙酸二钠,混匀后再加入茶皂素和壳寡糖,先快速搅拌再慢速搅拌,然后离心收集上清液;S3上清液的超滤:对所述上清液进行超滤浓缩,得到超滤浓缩液;S4超滤浓缩液的真空冷冻干燥。本发明属于酶提取技术领域,本发明提供的高效提取方法在超滤前有效去除了菠萝蛋白酶以外的杂蛋白和大颗粒物质,减少了后续超滤的堵塞和污染发生,提高了超滤效率,超滤的酶活截留率高达90%以上,得到的菠萝蛋白酶中的杂蛋白含量较少,纯度较高。
  • 食品级肉类蛋白水解酶及咸味香精和肉类水解处理方法-201810154888.2
  • 曹忠洋;焦国宝;崔红健;何景阳;张永钦 - 河南仰韶生化工程有限公司
  • 2018-02-23 - 2018-08-03 - C12N9/50
  • 本发明提供了一种食品级肉类蛋白水解酶及咸味香精和肉类水解处理方法,涉及肉类水解技术领域。该肉类蛋白水解酶主要包括碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、酸性蛋白酶、脂肪酶和载体等主要原料,该肉类蛋白水解酶根据不同肉类原料蛋白结构科学复配而成,可以对牛肉、猪肉、鸡肉等各种肉类进行水解,水解收率高,且酶解产物无苦味、涩味、腥味,且风味浓郁、肉味突出,改善了现有的酶解产物有苦味、涩味且口感一般的问题;本发明还提供了肉类水解处理方法,采用上述食品级肉类蛋白水解酶,该处理方法条件温和、能耗低,可实现对各种肉类的全面酶解,蛋白质利用率高,所得到的酶解产物无苦味、涩味、腥味,且风味浓郁、肉味突出。本发明还提供一种咸味香精。
专利分类
×

专利文献下载

说明:

1、专利原文基于中国国家知识产权局专利说明书;

2、支持发明专利 、实用新型专利、外观设计专利(升级中);

3、专利数据每周两次同步更新,支持Adobe PDF格式;

4、内容包括专利技术的结构示意图流程工艺图技术构造图

5、已全新升级为极速版,下载速度显著提升!欢迎使用!

请您登陆后,进行下载,点击【登陆】 【注册】

关于我们 寻求报道 投稿须知 广告合作 版权声明 网站地图 友情链接 企业标识 联系我们

钻瓜专利网在线咨询

400-8765-105周一至周五 9:00-18:00

咨询在线客服咨询在线客服
tel code back_top