[发明专利]复合生物活性因子脂质体及其制备方法有效
| 申请号： | 201410608454.7 | 申请日： | 2014-10-31 |
| 公开（公告）号： | CN105543161B | 公开（公告）日： | 2019-08-02 |
| 发明（设计）人： | 南艳萍;张青;刘莹;张琪;张爱兵 | 申请（专利权）人： | 陕西艾美雅生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/07 | 分类号： | C12N5/07;A61K9/127;A61K38/18;A61K38/30;A61K8/64;A61K8/14 |
| 代理公司： | 北京中博世达专利商标代理有限公司 11274 | 代理人： | 张娜 |
| 地址： | 710077 陕西省西*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明涉及生物领域，尤其涉及一种复合生物活性因子脂质体及其制备方法。能够提高复合生物活性因子脂质体的生物活性和稳定性，且所得复合生物活性因子脂质体能够在冷藏下保存较长时间。本发明实施例提供的复合生物活性因子脂质体包括：1‑5份的磷脂，0.02‑0.2份胆固醇，0.005‑0.01份复合生物活性因子，其中，所述磷脂和胆固醇形成脂质体，部分所述复合生物活性因子包封在所述脂质体内，形成复合生物活性因子脂质体，该复合生物活性因子脂质体的其余部分为纯净水。 | ||
| 搜索关键词： | 复合 生物 活性 因子 脂质体 及其 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.一种复合生物活性因子脂质体的制备方法，其特征在于，包括：用有机溶剂溶解1‑5份磷脂和0.02‑0.2份胆固醇，减压旋转蒸发，挥尽有机溶剂，形成均匀脂膜，其中，所述磷脂由1:1的饱和磷脂和不饱和磷脂组成；将含0.005‑0.01份复合生物活性因子的溶液与所述均匀脂膜旋转水合脱膜，形成复合生物活性因子粗脂质体；其中，所述复合生物活性因子至少包含：人表皮生长因子hEGF、血管内皮生长因子VEGF、成纤维细胞生长因子FGF、转化生长因子‑β1 TGF‑β1、转化生长因子‑β2 TGF‑β2、类胰岛素一号增长因子IGF‑1、类胰岛素二号增长因子IGF‑2、角质细胞生长因子KGF和血小板衍生生长因子PDGF；将所得复合生物活性因子粗脂质体整粒成粒径为50‑100nm的复合生物活性因子脂质体；其中，所述旋转蒸发的转速为70‑100rpm；所述旋转水合脱膜的转速为40‑70rpm，所述旋转水合脱膜的温度为20‑25℃。
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- 本发明属于细胞生物学领域，具体涉及一种分离萤火虫发光囊细胞的方法。可用于筛选萤火虫发光器细胞，建立细胞系供于研究。本发明提供的一种分离萤火虫发光囊细胞的方法，包括以下步骤：(1)将发光囊组织置于80～120ul胰酶中，剪碎；(2)在CO2恒温箱中消化3～7min；(3)在含8％～12％FBS的Sf‑900TMIII SFM培养液终止消化。本发明提供的一种分离萤火虫发光囊细胞的方法，可用于筛选萤火虫发光器细胞，建立细胞系，以用于研究萤火虫发光原理、细胞生物学、发育生物学及分子生物学等。
- 一种由病毒细胞制备具有治病效果的珍珠的方法-201810412890.5
- 张秀平 - 苏州高新区建金建智能科技有限公司
- 2018-05-03 - 2018-10-12 - C12N5/07
- 本发明涉及一种由病毒细胞制备具有治病效果的珍珠的方法；将新的珠蚌细胞至于消毒液和抗生素中浸泡，起到一定的消毒除菌的效果，有利于后续的新珠蚌细胞的培养；在新珠蚌细胞的培养和繁殖过程中向其中加入培养基、缓冲溶液和钙离子溶液，其中培养基能为新珠蚌细胞的繁殖提供充足的营养物质，缓冲溶液能使整个培养基的pH维持在6.8左右，为新珠蚌细胞繁殖提供最合适的生长环境；另外，钙离子溶液的使用能提高新珠蚌细胞的增殖活力，加速新珠蚌细胞的繁殖；本发明所制备的珍珠能将病毒细胞牢牢地禁锢在珍珠囊细胞内，使其与外界隔绝，无法通过外界获得营养物质，最终在珍珠囊细胞内死亡，这一理念可以应用于现代医学，达到治病的目的。
- 一种新型改性蛋清细胞培养支架材料的制备方法及应用-201510440046.X
- 张天柱;郭振超;杨新明;房坤;田吉来;刘培党;顾宁 - 东南大学
- 2015-07-23 - 2018-09-18 - C12N5/07
- 本发明涉及一种新型改性蛋清细胞培养支架材料的制备方法及应用，包括以下步骤：第一步，将京尼平加入到无菌超纯水中，搅拌，超声振荡充分，放入25～40℃充分溶解，将0.2mL京尼平溶液加入含有2mL新鲜鸡蛋清的反应容器中，搅拌混匀；第二步，将加入交联剂京尼平的鸡蛋清放入恒温箱充分交联完全；第三步，将第二步得到的改性蛋清培养支架材料用移液枪逐滴滴入PBS溶液，保证能浸过材料但不溢出，静止12h以上，使其中的多余京尼平分子吸出去除，重复若干次；第四步，反应后，得到的改性蛋清细胞培养支架材料置于细胞超净工作台，紫外照射杀菌后，即得。本发明的材料硬度梯度容易控制，安全无毒副作用。
- 一种曲面蛋白微图案化制作方法-201810045289.7
- 孙艳;樊瑜波;浑婷婷;王玮;刘姚萍 - 北京航空航天大学
- 2018-01-17 - 2018-08-10 - C12N5/07
- 本发明涉及一种曲面蛋白微图案化制作方法，属于材料与组织工程领域，涉及曲面及管腔的内表面复杂图案化以及后续细胞的规定性排列。本发明方法包括：PDMS曲面或管腔基底的制作及表面处理，Parylene C多孔膜与管腔紧密性贴合，曲面上孵育FN蛋白经过渗透得到复杂蛋白图案，接种一定密度细胞样品使细胞规定性排布与生长。本实验可高度模拟细胞在体内复杂曲面结构及器官上的生存环境且操作简单、价格低廉，可为特殊组织及器官表面上细胞的研究提供新思路。
- 使用脐带组织来源的细胞治疗外周血管疾病-201180074075.9
- C.S.布恩苏塞索;A.J.基姆;S.德哈纳拉;R.阿拉斯;I.努尔;R.梅德勒;L.巴尔 - 德普伊新特斯产品公司
- 2011-08-10 - 2018-08-07 - C12N5/07
- 本发明公开了在外周血管疾病患者中使用来源于脐带组织的细胞来刺激和支持血管生成，改善血流，再生、修复和改善由外周局部缺血性事件引起的骨骼肌损伤，以及保护骨骼肌免受局部缺血性损伤的组合物和方法。具体地，公开了用脐来源的细胞和纤维蛋白胶来治疗患有外周血管疾病的患者的方法。
- 一种冻存细胞复苏的方法-201810128819.4
- 李杰;刘振云;徐华栋;王维;程丰伟 - 安徽古一生物科技有限公司
- 2018-02-08 - 2018-07-27 - C12N5/07
- 本发明提供一种冻存细胞复苏的方法，包括以下步骤：(1)清洗液的准备：准备第一离心管，加入DMEM无血清培养基和胎牛血清(FBS)，混匀后，放入水浴锅中预热；(2)冻存细胞的融化：从液氮中迅速取出细胞冻存管，迅速转移至水浴锅中使完全融化；(3)转移：将细胞冷冻液从冻存管中吸出，转移至第二离心管中，然后吸取适量清洗液逐滴加入到细胞冷冻液中，前期每次一滴，轻摇管身，使清洗液缓慢融入冷冻液中，加入1‑2ml清洗液后，可逐渐加快加液速度；(4)离心：将加入清洗液后的细胞冷冻液进行离心；(5)孵育：转移至T‑175培养瓶，温度为35‑40℃，CO2为3‑7％环境下孵育。本发明的优点在于：显著提高细胞的活率。
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