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[发明专利]细胞高活性分选及改造的原位电穿孔芯片、装置及方法-CN202111059743.2在审
发明人：王玮;浑婷婷;刘姚萍;黄东 -专利权人：北京大学
申请日： 2021-09-10 - 公布日： 2021-12-24 - 主分类号： C12M3/06 文献下载
摘要：本发明实施例提供了一种细胞高活性分选及改造的原位电穿孔芯片、装置及方法，在本发明中，可同时实现对液基样本中的目标细胞进行高通量分选，对分选得到的目标细胞进行原位电穿孔改造，对改造后的细胞进行原位观察及统计分析。本发明可在15min内实现大规模背景细胞下痕量目标细胞的分选及改造，其中分选效率大于85％，改造效率大于75％，并且可以保证整套流程下细胞的活性大于80％。本发明提供的细胞高活性分选及改造的方法，一方面通过原位一体化的操作可以减少各步骤间的细胞损失及损伤，保证细胞活性；另一方面通过权衡不同孔径下细胞通过滤孔时的剪切应力和电穿孔过程中的电场强度来设计并优化滤膜孔径，进一步保证细胞的高活性。
细胞活性分选改造原位穿孔芯片装置方法

[发明专利]一种细胞高活性染色方法-CN202111059744.7在审
发明人：王玮;浑婷婷;刘姚萍 -专利权人：北京大学
申请日： 2021-09-10 - 公布日： 2021-12-17 - 主分类号： G01N1/30 文献下载
摘要：本发明实施例提供了一种细胞高活性染色方法，所述方法包括：将包含目标细胞的样本和特异性的直标抗体混合；通过电极对样本中的目标细胞进行电穿孔标记，在电穿孔过程中，特异性的直标抗体进入目标细胞，完成特异性标记；对完成特异性标记的目标细胞进行静置，以使目标细胞的细胞膜复原。在本发明中，利用电穿孔方法将特异性的直标抗体导入目标细胞的过程中，不会对细胞造成不可逆的破坏，在完成电穿孔操作之后，目标细胞的细胞膜在10分钟内即可复原，恢复高活性且标记特异性接近100％。
一种细胞活性染色方法

[发明专利]活体动物循环肿瘤细胞体外功能化仪器-CN201910159937.6有效
发明人：王玮;王琪;刘姚萍;浑婷婷;徐明鑫 -专利权人：北京大学;大连医科大学附属第二医院
申请日： 2019-03-04 - 公布日： 2021-01-29 - 主分类号： A61M1/38 文献下载
摘要：本发明涉及一种活体动物循环肿瘤细胞体外功能化仪器，是基于生物微机电系统实现的活体动物全血中循环肿瘤细胞及其聚集体的高俘获率分离、高选择性标记、高活性再回输的一体化仪器。本仪器包括：CTC分离模块，用于小动物全身血液中所有循环肿瘤细胞及其聚集体的分离；CTC标记模块，用于循环肿瘤细胞的标记；CTC回输模块：用于可视化循环肿瘤细胞的快速再回输；机电控制模块：用于整个仪器的自动化控制与信号处理。本发明可用来可视化研究CTC及其聚集体在肿瘤发生、发展、转移、放/化疗术后等不同阶段的时空异质性特征，为肿瘤发生发展机制研究提供关键技术途径，为肿瘤的精准诊治提供高效能手段。
活体动物循环肿瘤细胞体外功能仪器

[发明专利]一种高通量单细胞捕获和排列芯片及方法-CN201810044663.1有效
发明人：孙艳;浑婷婷;樊瑜波;王玮;刘姚萍 -专利权人：北京航空航天大学
申请日： 2018-01-17 - 公布日： 2019-12-31 - 主分类号： C12M1/12 文献下载
摘要：本发明涉及一种高通量单细胞捕获和排列芯片及方法，属于材料与组织工程领域，涉及高通量单细胞的捕获和排列，包括：蛋白渗透作用进行基底表面微图案的制作，膜孔限制作用来高通量捕获和排列单细胞，细胞在复杂微图案上的排布与铺展。本发明可以实现85％以上的单细胞捕获率，实现细胞在规定蛋白图案上的整齐排列和铺展。发明克服了大细胞群体研究时细胞异质性带来的影响，并且方法简单、单细胞捕获率高、拥有适宜的后续培养环境，决定其可应用于单细胞水平上的细胞连接、细胞间相互作用及细胞信号转导等的研究，在细胞工程与组织工程研究中都有着十分重要的作用。
单细胞捕获高通量微图案细胞铺展捕获蛋白芯片组织工程领域单细胞水平细胞异质性基底表面培养环境群体研究渗透作用细胞工程细胞连接细胞信号整齐排列组织工程大细胞膜孔排布转导图案研究制作应用

[发明专利]一种骨骼肌肌管力学测定芯片及制备方法-CN201810045736.9有效
发明人：樊瑜波;孙艳;詹悦维;张昊康;浑婷婷 -专利权人：北京航空航天大学
申请日： 2018-01-17 - 公布日： 2019-12-24 - 主分类号： A61B5/22 文献下载
摘要：本发明涉及一种骨骼肌肌管力学测定芯片及制备方法，可以用于测定骨骼肌肌管收缩时的力学强度，可在生物医学工程领域的科研中应用。本骨骼肌肌管力学测定芯片由玻璃爬片，双层聚合物材料基底和荧光标记物组成。玻璃爬片作为整个芯片的基底，起到支撑与稳固作用；聚合物材料基底在玻璃爬片上层，分为两层，下层较厚，通过匀胶机的不同转速控制在38μm以上，上层控制在10μm以内；荧光标记物作为本项发明的核心要素，夹在两层聚合物材料之间，靠近上表面，达到被表面骨骼肌肌管收缩力影响而产生位移的目的。本发明具有易于观测的特点，可大大提高肌管收缩力测定的准确性和直观性，操作难度大大降低，可在较短周期内完成肌管培养以及力学测定等实验步骤。
肌管骨骼肌力学测定芯片基底聚合物材料荧光标记物收缩力玻璃两层制备生物医学工程领域双层聚合物核心要素上层控制实验步骤稳固作用转速控制短周期上表面匀胶机直观性下层力学收缩观测上层支撑科研应用

[发明专利]一种循环肿瘤细胞的泵驱动式循环俘获系统及其控制方法-CN201910677432.9在审
发明人：王玮;浑婷婷;刘姚萍 -专利权人：北京大学
申请日： 2019-07-25 - 公布日： 2019-11-12 - 主分类号： C12M1/00 文献下载
摘要：本申请提供了一种循环肿瘤细胞的泵驱动式循环俘获系统及其控制方法，包括抗凝管、密封胶塞盖、进液管道、微量蠕动泵、过滤装置以及出液管道；进液管道的一端穿过密封胶塞盖进入抗凝管的内部，进液管道的另一端连接在微量蠕动泵的输入端；过滤装置的一端连接在微量蠕动泵的输出端，过滤装置的另一端连接在出液管道的一端，出液管道的另一端穿过密封胶塞盖进入抗凝管的内部；进液管道、微量蠕动泵、上连接头、膜负载结构、高孔隙率滤膜、下连接头以及出液管道闭合形成循环回路。本发明旨在通过循环过滤方法基于物理性质差异实现CTC的高效、高活性分离。本发明的操作简单、条件可控，可应用于生物医学工程领域，为临床应用提供了有效手段。
微量蠕动泵出液管道进液管道过滤装置密封胶塞一端连接抗凝循环肿瘤细胞泵驱动俘获生物医学工程领域物理性质差异穿过负载结构高孔隙率临床应用上连接头下连接头循环过滤循环回路有效手段闭合高活性输出端输入端可控滤膜申请应用

[发明专利]一种曲面蛋白微图案化制作方法-CN201810045289.7在审
发明人：孙艳;樊瑜波;浑婷婷;王玮;刘姚萍 -专利权人：北京航空航天大学
申请日： 2018-01-17 - 公布日： 2018-08-10 - 主分类号： C12N5/07 文献下载
摘要：本发明涉及一种曲面蛋白微图案化制作方法，属于材料与组织工程领域，涉及曲面及管腔的内表面复杂图案化以及后续细胞的规定性排列。本发明方法包括：PDMS曲面或管腔基底的制作及表面处理，Parylene C多孔膜与管腔紧密性贴合，曲面上孵育FN蛋白经过渗透得到复杂蛋白图案，接种一定密度细胞样品使细胞规定性排布与生长。本实验可高度模拟细胞在体内复杂曲面结构及器官上的生存环境且操作简单、价格低廉，可为特殊组织及器官表面上细胞的研究提供新思路。
管腔蛋白微图案细胞制作蛋白复杂曲面结构组织工程领域复杂图案密度细胞模拟细胞器官表面生存环境多孔膜紧密性内表面孵育基底排布贴合接种器官体内图案生长研究

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