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[实用新型]用于波浪式生物反应器的翻转机构及波浪式生物反应器-CN202321168733.7有效
发明人：刘伟;鄢晓君;隗功业;吴亮 -专利权人： 北京华龛生物科技有限公司
申请日： 2023-05-15 - 公布日： 2023-10-27 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本实用新型提供一种用于波浪式生物反应器的翻转机构及波浪式生物反应器，该翻转机构包括基座、翻转平台、水平动力模组和顶升件，水平动力模组设置于基座上，翻转平台具有相对的第一侧和第二侧，翻转平台的第一侧与基座枢转连接，水平动力模组通过顶升件与翻转平台的第二侧连接，水平动力模组设置为能够输出水平驱动力以使顶升件进行升降运动进而带动翻转平台进行翻转。采用上述技术方案，可以实现将位于翻转平台上的培养袋翻起，进而可以通过出液管路对培养袋内部较低位置的液体进行抽取，且取样管路等其它管路位置由于翻转平台翻转前倾，操作变得更加方便简洁，有效解决了现有技术中培养袋液体收获时液体残留较多、取样或出液等操作麻烦的问题。
用于波浪式生物反应器翻转机构

[发明专利]基于三维多孔微载体的病毒载体生产方法-CN202380009311.1在审
发明人：鄢晓君;刘伟;赵红莉;张元元;徐环叶;刘少丹 -专利权人： 北京华龛生物科技有限公司
申请日： 2023-04-28 - 公布日： 2023-10-20 - 主分类号： C12N5/07 文献下载
摘要：一种基于三维多孔微载体的病毒载体生产方法，具体涉及一种在三维多孔微载体上进行培养的细胞中实现基因载体，例如慢病毒质粒、腺病毒质粒、腺相关病毒(AAV)质粒，转染并生产病毒的方法。
基于三维多孔载体病毒生产方法

[发明专利]间充质干细胞无血清培养基及其应用-CN202310674353.9有效
发明人：鄢晓君;刘伟;张志华;张元元 -专利权人： 北京华龛生物科技有限公司
申请日： 2023-06-08 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及一种间充质干细胞无血清培养基，具体地，该无血清培养基包括基础培养基、血小板裂解物和其他培养用组分例如但不限于L‑谷氨酰胺、氢化可的松和生长因子等。本发明的干细胞无血清培养基在适用于间充质干细胞二维培养的同时还特别地适用于间充质干细胞的三维培养，具有干细胞扩增质量高、数量大、安全性高等优点。
间充质干细胞血清培养基及其应用

[发明专利]间充质干细胞无血清培养基及其应用-CN202310674350.5有效
发明人：鄢晓君;刘伟;张元元;张志华 -专利权人： 北京华龛生物科技有限公司
申请日： 2023-06-08 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及一种间充质干细胞无血清培养基，具体地，该无血清培养基包括基础培养基、血小板裂解物、植物蛋白水解物和其他培养用组分例如但不限于L‑谷氨酰胺、氢化可的松和生长因子等。本发明的干细胞无血清培养基在适用于间充质干细胞二维培养的同时还特别地适用于间充质干细胞的三维培养，具有干细胞扩增质量高、数量大、安全性高等优点。
间充质干细胞血清培养基及其应用

[发明专利]外泌体分离方法和分离系统-CN202111302243.7在审
发明人：刘伟;鄢晓君;张志华;张元元 -专利权人： 北京华龛生物科技有限公司
申请日： 2021-11-04 - 公布日： 2023-05-05 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本文提供了一种分离外泌体的方法，包括1)采用死端过滤从包括所述外泌体的细胞培养上清液中除去粒径大于所述外泌体的粒径的细胞组分；以及2)采用切向流过滤对步骤1)获得的滤出液进行循环浓缩，同时除去粒径小于所述外泌体的粒径的细胞组分。本文还提供了外泌体分离系统。本文提供的外泌体分离方法和分离系统可用于外泌体大规模分离，解决了现有技术中外泌体分离操作复杂、样本量小、重复性差的问题。
外泌体分离方法系统

[发明专利]一种基于仿生微载体的规模化扩增人造血干细胞方法-CN202211665720.0在审
发明人：高瀛岱;杜亚楠;李迎辉;刘伟;杨铭;张文姗;梁海威 -专利权人：中国医学科学院血液病医院（中国医学科学院血液学研究所）;北京华龛生物科技有限公司
申请日： 2022-12-23 - 公布日： 2023-05-02 - 主分类号： C12N5/0789 文献下载
摘要：本发明提供了一种基于仿生微载体的规模化扩增人造血干细胞方法，该规模化培养一方面能够获得足够数量的具有功能的造血干细胞，另一方面该规模化培养能长期维持造血干细胞的干性，并增强其向巨核系分化的潜能，克服了现有技术体外培养获得的绝对细胞数量不足以治疗的缺陷，同时该方法可以直接培养人单核细胞，将人单核细胞直接采集培养，避免了分选造血干祖细胞过程带来的未知风险。本发明提供的方法且兼顾效率和经济的原则具有广阔的实验、临床应用前景。本发明还提供基于所述大规模培养方法在制备血液病治疗制剂方面的应用，以及基于该大规模培养方法获得的细胞制品制备血液病治疗剂方面的应用。
一种基于仿生载体规模化扩增人造干细胞方法

[发明专利]功能性造血干细胞及其增殖的方法-CN202211663370.4在审
发明人：高瀛岱;杜亚楠;李迎辉;刘伟;杨铭;张文姗;梁海威 -专利权人：中国医学科学院血液病医院（中国医学科学院血液学研究所）;清华大学;北京华龛生物科技有限公司
申请日： 2022-12-23 - 公布日： 2023-05-02 - 主分类号： C12N5/0789 文献下载
摘要：本发明提供基于人造三维微载体体外培养人造血干细胞的方法，该方法可以培养不同来源的骨髓、脐带血、外周血单核细胞；本发明的培养方法培养体系简单，不仅促进短期造血干细胞集落形成且培养后细胞向多谱系分化的潜能得以保持，而且能促进人造血干细胞具有长周期造血能力的鹅卵石样造血区的形成，提高长期培养起始细胞(LTC‑IC)的频率；经本发明方法在体外培养的人造血干细胞可以较长期地维持其干性，并促进了巨核谱系的偏向，促进巨核干细胞绝对数量上的扩增，基于此开发对人巨核偏向造血干细胞亚群的扩增方法，使用该培养方法制备细胞治疗制剂的用途，本发明在科研、临床方面均具有广阔的应用前景和巨大的改进。
功能造血干细胞及其增殖方法

[发明专利]一种检测新型微载体裂解液在细胞中的残留的方法-CN202110150486.7在审
发明人：鄢晓君;刘伟;徐环叶 -专利权人： 北京华龛生物科技有限公司
申请日： 2021-02-03 - 公布日： 2022-12-06 - 主分类号： C12Q1/37 文献下载
摘要：本发明公开了一种检测新型微载体裂解液在细胞中的残留的方法。该方法包括检测样品中的所述微载体裂解液的组成成分，确定所述微载体裂解液在细胞中的残留量；所述样品为采用微载体培养细胞后，使用微载体裂解液裂解微载体后所收获的细胞。该方法能够定性或者定量检测可降解三维微载体培养后，裂解微载体收获细胞中微载体裂解液残留量。
一种检测新型载体裂解细胞中的残留方法

[发明专利]一种检测新型微载体在细胞中的残留的方法-CN202110150691.3在审
发明人：鄢晓君;刘伟;徐环叶 -专利权人： 北京华龛生物科技有限公司
申请日： 2021-02-03 - 公布日： 2022-12-06 - 主分类号： G01N21/31 文献下载
摘要：本发明公开了一种检测新型微载体在细胞中的残留的方法。该方法包括检测样品中所述微载体的组成成分或所述组成成分的水解产物，确定所述微载体在细胞中的残留量；所述样品为采用所述微载体培养细胞后，使用微载体裂解液裂解所述微载体后所收获的细胞。该方法能够定性或者定量检测三维微载体培养后，裂解微载体收获细胞中微载体残留量，可以应用该方法对于收获的细胞进行微载体残留检测，从而保障了细胞制剂的安全性。
一种检测新型载体细胞中的残留方法

[实用新型]-CN202220324676.6有效
发明人： -专利权人： 北京华龛生物科技有限公司
申请日： 2022-02-17 - 公布日： 2022-07-08 - 主分类号：文献下载
摘要：

[发明专利]一种收获三维微载体上的细胞的方法-CN201910101736.0有效
发明人：鄢晓君;刘伟 -专利权人： 北京华龛生物科技有限公司
申请日： 2019-01-31 - 公布日： 2022-05-31 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种收获三维微载体上的细胞的方法。它包括如下步骤：1)吸附培养细胞的三维微载体自然沉降或离心，去除上清，得到含有细胞的三维微载体；2)将含有细胞的三维微载体中加入裂解液，孵育，裂解其中三维微载体；3)将步骤2)中三维微载体裂解完全后，加入终止液终止裂解过程或直接进行步骤4)终止裂解；4)将步骤3)得到的体系离心，弃去上清，即可收获三维微载体上的细胞。本发明能更温和地收获该载体上的细胞用于后续应用；本发明针对微载体进行裂解，使微载体从固态溶解为液态，从而将载体上的细胞释放到溶液中，通过离心的方式，将溶液与细胞分离，从而获得细胞。
一种收获三维载体细胞方法

[实用新型]外泌体分离系统-CN202122689849.2有效
发明人：刘伟;鄢晓君;张志华;张元元 -专利权人： 北京华龛生物科技有限公司
申请日： 2021-11-04 - 公布日： 2022-05-13 - 主分类号： C12M1/12 文献下载
摘要：本实用新型提供了一种外泌体分离系统，包括1)第一死端过滤装置，用于从包括所述外泌体的细胞培养上清液中除去粒径大于所述外泌体的粒径的细胞组分；2)与所述第一死端过滤装置连接的第一容器，其容纳经所述死端过滤装置过滤后的滤出液；以及3)切向流过滤装置，用于对所述第一容器中的所述滤出液进行循环浓缩，同时除去粒径小于所述外泌体的粒径的细胞组分。本实用新型外泌体分离系统可用于外泌体大规模分离，解决了现有技术中外泌体分离操作复杂、样本量小、重复性差的问题。
外泌体分离系统

[发明专利]一种保存细胞制剂的方法-CN202111258581.5有效
发明人：鄢晓君;刘伟;张元元;张昆 -专利权人： 北京华龛生物科技有限公司
申请日： 2021-10-28 - 公布日： 2022-03-22 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种保存细胞制剂的方法。该保存细胞制剂的方法包括将微组织悬液进行离心，弃上清，获得微组织；采用氯化钠水溶液清洗所述微组织；采用氯化钠水溶液、1%人白蛋白或5%葡萄糖溶液将清洗后的微组织在氯化钠水溶液中在4℃‑25℃保存；所述微组织悬液为采用微载体培养细胞获得的。该方法利用多孔结构微载体的空间结构优势对细胞进行保护，在较长保存时间(＞6h)保持细胞活性不低于80%。
一种保存细胞制剂方法

[发明专利]一种使微载体聚集体保留吸水分散特性的辐照灭菌方法-CN202010411242.5有效
发明人：鄢晓君;刘伟;侯堃 -专利权人： 北京华龛生物科技有限公司;天津华龛生物科技有限公司
申请日： 2020-05-15 - 公布日： 2022-03-04 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种使微载体聚集体保留吸水分散特性的辐照灭菌方法。它包括如下步骤：将微载体聚集体密封包装后采用辐照灭菌，即能使灭菌后的所述微载体聚集体保留吸水分散特性。本发明对微载体聚集体采用辐照灭菌后仍具有吸水分散，且细胞培养效果良好，无菌。本发明为达到无菌并保留吸水分散特性和细胞培养效果所选取的射线种类及对应剂量进行辐照灭菌。辐照灭菌前，为保留吸水分散特性，而对微载体聚集体中微载体颗粒的密度及厚度控制。辐照灭菌前，为保留细胞培养效果，对微载体聚集体的包装方式的改变。聚集体辐照灭菌后具有吸水分散，细胞培养效果良好，无菌。辐照灭菌后，并无有害物质残留。
一种载体聚集体保留吸水分散特性辐照灭菌方法

[发明专利]一种三维微载体细胞吸附培养的方法-CN201910098003.6有效
发明人：鄢晓君;刘伟 -专利权人： 北京华龛生物科技有限公司
申请日： 2019-01-31 - 公布日： 2022-02-11 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种三维微载体细胞吸附培养的方法。它包括如下步骤：1)接种细胞：将细胞悬液与干燥的三维微载体混合，得到混合细胞悬液的微载体；2)细胞吸附：将步骤1)中得到的所述混合细胞悬液的微载体采用旋转动态吸附方法孵育，使细胞粘附于所述三维微载体上；3)细胞培养：步骤2)中待所述细胞粘附后，加入完全培养基，培养。本发明为细胞提供更多的生长面积，简化了细胞接种于微载体的操作，避免了染菌的风险；适用于大规模生物反应器的培养；三维微载体独特的吸胀性，可以是大量的细胞进入载体连通的孔径内部，更好的形成仿生的三维立体生长模式，促进体外细胞培养过程中的功能发挥。
一种三维载体细胞吸附培养方法

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