[发明专利]一种快速筛选微生物培养基的方法无效
申请号: | 201210230004.X | 申请日: | 2012-07-04 |
公开(公告)号: | CN102747131A | 公开(公告)日: | 2012-10-24 |
发明(设计)人: | 伍长华;吴强;罗力心;陈庚;关晓峰;杨永华 | 申请(专利权)人: | 成都欧林生物科技股份有限公司 |
主分类号: | C12Q1/02 | 分类号: | C12Q1/02;G01N21/31 |
代理公司: | 成都金英专利代理事务所(普通合伙) 51218 | 代理人: | 袁英 |
地址: | 610000 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | 本发明公开了一种快速筛选微生物培养基的方法,它包括以下步骤:制备菌悬液及各待筛选的培养基;培养基移液至微孔板;菌悬液接种移液至微孔板;微孔板封口、振荡培养8~10h;每隔1~2h,采用酶标仪检测各小孔内发酵液的吸光值OD;作生长曲线、对比、完成筛选。本发明的有益效果是:将被测菌种菌悬液及不同配方的待筛选培养基分别加入微孔板中的各小孔内同时进行发酵培养,实现筛选的步骤简单、操作方便、所得菌体生长曲线准确度高、筛选结果可靠性高且筛选速度快、减轻了工作人员的工作量,降低了培养基筛选成本,可适用于大量的培养基筛选实验。 | ||
搜索关键词: | 一种 快速 筛选 微生物 培养基 方法 | ||
【主权项】:
一种快速筛选微生物培养基的方法,其特征在于:它包括以下步骤:(1)准备设备器材:准备实验所需用到的设备器材,包括生物安全柜、移液器、微孔板、微发酵透气膜封口膜、恒温培养振荡器和酶标仪;(2)制备菌悬液及各待筛选的培养基:S1:制备菌悬液,它包括以下步骤:S11:用固体培养基培养被测增殖菌种;S12:用生理盐水将菌体洗脱下来,得到被测菌种菌悬液;S2:制备各待筛选的培养基,它包括以下步骤:S21:分别根据各待筛选培养基的不同配方配制被测菌种的培养基:S22:在生物安全柜中用无菌滤膜进行除菌过滤,得到各待筛选的培养基;(3)接种被测菌种菌悬液,它包括以下步骤:S3:培养基移液至微孔板:采用移液器将步骤S2所得的各培养基分别加入微孔板的小孔中,每个小孔内分别加入一种待筛选的培养基,并记录每个小孔内所加入的培养基的配方及其配方比例,其中,每个小孔内加入的培养基的量为200~250μl;S4:菌悬液移液至微孔板:采用移液器将步骤S1所得的菌悬液接种到已加有培养基的微孔板小孔中,其中,每个小孔内加入的菌悬液的量为50~60μl;(4)振荡培养:用微发酵透气膜封口膜将微孔板的各小孔封好,将整个微孔板置于恒温培养振荡器中缓慢振荡培养8~10h;(5)检测吸光值:每隔1~2h,取出微孔板并揭开微发酵透气膜封口膜,采用酶标仪检测各小孔内发酵液对可见光的吸光值OD;(6)作生长曲线、对比筛选:根据单个小孔内不同时段的吸光值OD作出菌体的生长曲线,结合步骤S3所记录的各小孔内所加入的培养基的配方及其配方比例,筛选出适合该菌种使用的培养基。
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- 2019-02-28 - 2019-07-19 - C12Q1/02
- 本发明涉及3D细胞培养技术在离体药物测试方法中的使用,特别是涉及一种测试药物对源自患者的肿瘤细胞的增殖反应的方法,其可以通过预测性增殖测定能够可靠的筛选候选药物,用于功效和/或作用机制;包括以下步骤:(1)从活组织检查或肿瘤切除材料中获得细胞;(2)在3D细胞外基质上培养获得的细胞;(3)用药物治疗处理在3D细胞外基质上培养的肿瘤细胞;(4)将步骤处理过的肿瘤细胞经受高含量成像;(5)评估处理过的肿瘤细胞的高含量成像,从而测试药物对源自患者的肿瘤细胞的增殖反应。
- 基于罗丹明B和氨乙基硫醚的化合物在活细胞成像中的应用-201610335655.3
- 徐冬梅;洪苗苗 - 苏州大学
- 2016-05-19 - 2019-07-16 - C12Q1/02
- 本发明公开了基于罗丹明B和氨乙基硫醚的化合物在活细胞成像中的应用,该化合物原料易得,合成方法简单,分子结构简单;对Hg2+选择性好、灵敏度高;可以检测接近中性的几乎纯水缓冲溶液中的Hg2+;可以检测HgCl2中的Hg2+;特别是对活细胞毒性低,可以用于活细胞成像,检测活细胞中的Hg2+浓度。
- 基于HCN4双报告基因获得多能干细胞衍生的高度纯化传导细胞的方法-201711495969.0
- 徐秀琴;林瑜;刘靖 - 厦门大学
- 2017-12-31 - 2019-07-09 - C12Q1/02
- 基于HCN4双报告基因获得多能干细胞衍生的高度纯化传导细胞的方法,用puromycin筛选分化细胞;根据GFP表达流式检测传导细胞比例。一种带有双报告系统的多能干细胞,多能干细胞包括诱导多能干细胞和胚胎干细胞。hPSC含有荧光筛选标记和抗生素筛选标记。hPSC通过抗生素筛选和荧光分选分析验证传导细胞比例的方法。传导细胞包括窦房结、前结间束、后结间束、上房间束、房室结、希氏束、左束支、右束支和蒲氏纤维细胞。传导细胞用以筛选小分子促进传导细胞分化的用途。传导细胞用以研究促进传导细胞分化过程中信号通路的用途。传导细胞用以传导细胞药物毒理研究的用途。传导细胞用以临床细胞移植的用途。
- 一种香梨枝条离体水培法测定梨火疫病菌致病力的方法-201910210753.8
- 罗明;袁英哲;韩剑;李洪涛;张静文;张祥林 - 新疆农业大学
- 2019-03-20 - 2019-07-09 - C12Q1/02
- 本发明涉及植物保护技术领域,具体公开了一种香梨枝条离体水培法测定梨火疫病菌致病力的方法,包括以下步骤:(1)梨火疫病菌接种液的制备;(2)离体枝条制备;(3)接种;(4)接种结果观察与致病力评价。本发明方法简便易行,病原菌致病性表现稳定,重复性好,结果可靠,可准确地反映梨火疫病菌的致病力及其致病强度;在实际操作中,可批量进行,具有占用空间小、节约劳动成本、缩短实验周期的优点。因此,本发明方法适合推广应用。
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