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[发明专利]黄瓜强单性结实性状多位点选择的分子标记辅助选择育种方法-CN202210086004.0有效
发明人：李季;侯雨潇;朱拼玉;陈劲枫;孟永娇 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2022-01-25 - 公布日： 2023-09-26 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明公开了黄瓜强单性结实性状多位点选择的分子标记辅助选择育种方法。本发明通过进一步构建BC3S1等具有单性结实性状的次级分离群体，完成了关键微效位点Parth3.1和Parth7.1的精细定位，开发出了4个紧密连锁的分子标记，并在自然群体中对这4个分子标记进行了选择效率的验证，建立了强单性结实性状多位点选择(Parth2.1、Parth3.1和Parth7.1)的分子标记辅助选择育种技术体系，并利用该技术育成了具有强单性结实性的新品种，该强单性结实的黄瓜新品种是华北型黄瓜自交系品种，有较高的产量和优良的果实品质，可直接作为改良其他品种单性结实性的骨干亲本。
黄瓜单性结实性状多位点选择分子标记辅助育种方法

[发明专利]一种混合授粉种间杂交拓宽甜瓜遗传变异的方法-CN202310057882.4在审
发明人：钱春桃;郑莉娜;安露西;李季;王瑜晖;程春燕;娄群峰;陈劲枫 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2023-01-18 - 公布日： 2023-05-16 - 主分类号： A01H1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种混合授粉种间杂交拓宽甜瓜遗传变异的方法，以甜瓜商品种“海蜜五号”为母本，以野生种西印度瓜和黄瓜自交系品种“黄瓜PE50”同时作为父本，进行人工混合授粉杂交，获得种间杂交植株后代。本发明过程中获得杂交后代材料，不需要进行组织培养，且获得的材料在种间杂交应用中可简化人工去雄工序，简便方法，为进一步扩大甜瓜的种质资源库奠定良好基础。
一种混合授粉间杂拓宽甜瓜遗传变异方法

[发明专利]一种与黄瓜果实不规则条纹性状紧密连锁的SNP标记及其应用-CN201910315402.3有效
发明人：娄群峰;宋蒙飞;程凤;陈劲枫 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2019-04-18 - 公布日： 2023-04-11 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明提供的一种与黄瓜果实不规则条纹性状紧密连锁的SNP标记的特征在于：该SNP标记与黄瓜果实不规则条纹基因紧密连锁，该标记正反向引物序列分别为：5′GACCTCCCAACCCCTGATTTTTT 3′和5′ATCGTTCGCCGTCTTACCTGACT 3′。标记扩增长度为675bp，所述SNP位点位于正向扩增第440bp位点，存在A/G多态性。GG基因型为有不规则条纹黄瓜，AA及AG基因型为无不规则条纹黄瓜。本发明公开的与黄瓜果实不规则条纹性状基因紧密连锁的SNP分子标记属于共显性标记，可靠且检测快捷，可用于黄瓜果实表皮相关性状的定向遗传育种。对于加快黄瓜品种的遗传改良进程，提高育种选择效率具有重要的理论和实践指导意义。
一种黄瓜果实不规则条纹性状紧密连锁 snp 标记及其应用

[发明专利]一个与黄瓜矮化株型性状相关CAPS标记及其应用-CN202210483259.0在审
发明人：娄群峰;张孟茹;陈劲枫 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2022-05-05 - 公布日： 2023-04-07 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明提供了一个与黄瓜矮化株型性状相关CAPS标记及其应用，属于植物分子育种领域。首次公开了与黄瓜矮化株型性状紧密连锁的分子标记CAPS1，标记正向、反向引物序列分别为：5′TTGGACTGTACTACGCACC3′和5′TTTCTTACGGCATTCTTCAT 3′。在矮化与野生型株型材料构建的F2群体中，引物CAPS1在矮化材料的扩增产物能酶切出123bp和68bp两条带，野生型株系中只能跑出一条191bp条带，杂合植株可同时跑出191bp，123bp和68bp三条带。另外，利用实验室现有的86个正常株型品种材料也验证了该标记与矮化表型的连锁。本发明公开的与黄瓜矮化株型性状紧密连锁的分子标记，可用于黄瓜矮化株型基因定位和分子标记辅助育种。对于加快黄瓜品种的遗传改良进程，提高育种选择效率具有重要的理论和实践指导意义。
一个黄瓜矮化株型性状相关 caps 标记及其应用

[发明专利]一个与黄瓜果实多心室性状紧密连锁的分子标记Indel-LNT-36-CN202110073448.6有效
发明人：李季;王慧;田真;陈劲枫 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2021-01-20 - 公布日： 2023-02-28 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明提供了一个与黄瓜果实多心室性状紧密连锁的分子标记，属于生物技术领域。黄瓜果实多心皮性状具有重要的育种价值。本发明通过研究开发了一个与黄瓜果实多心室性状紧密连锁的分子标记Indel‑LNT‑36。Indel‑LNT‑36标记引物在多心室黄瓜材料的基因组DNA中能扩增出105bp的PCR产物，而在三心室黄瓜材料的基因组DNA中能扩增出128bp的PCR产物。本发明公开的与黄瓜果实多心室性状紧密连锁的分子标记Indel‑LNT‑36，可用于黄瓜果实多心室性状的鉴定和分子标记辅助育种。
一个黄瓜果实多心性状紧密连锁分子标记 indel lnt 36

[发明专利]CsSH1基因在提高黄瓜苗期耐徒长中的应用和方法-CN202110299392.6在审
发明人：李季;陈劲枫;伍若彤 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2021-03-19 - 公布日： 2022-09-30 - 主分类号： C12N15/29 文献下载
摘要：本发明涉及CsSH1基因在提高黄瓜苗期耐徒长中的应用，通过CRISPR/Cas9系统编辑CsSH1基因，使CsSH1基因功能失活来提高黄瓜苗期的耐徒长性。本发明的有益效果在于：(1)利用基因编辑技术获得耐徒长的黄瓜植株，较传统的育种方法更经济、有效，是一种创建抗性材料的好方法，大大缩短了育种年限；(2)提供了耐徒长的黄瓜基因编辑植株，为选育苗期耐徒长黄瓜杂交种提供了新的育种材料。
cssh1 基因提高黄瓜苗期徒长中的应用方法

[发明专利]一种提取黄瓜线粒体及其DNA的有效方法-CN201910431970.X有效
发明人： 陈劲枫;孟雅;翟于菲;虞夏清 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2019-05-22 - 公布日： 2022-07-05 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种提取黄瓜线粒体及其DNA的方法，属于植物生物技术领域。以黄瓜黄化苗为材料，调整提取过程组织匀浆缓冲液成分和差速离心力组合，结合percoll密度梯度离心分离得到线粒体，并使用3％CTAB裂解线粒体，后续用氯仿‑异戊醇抽提得到高质量mtDNA。最终所提取线粒体完整性好，纯化后mtDNA浓度为158ng·μL‑1，每20g叶片可得7.9μg mtDNA。其中A260/A280约1.87，说明本方法提取分离得到的mtDNA纯度高。本发明首次建立一套适用于黄瓜mtDNA提取纯化的有效体系，对于其他物种构建mtDNA提取纯化体系具有参考意义。
一种提取黄瓜线粒体及其 dna 有效方法

[发明专利]一种甜瓜属野生种与栽培种部分种间杂种的创制方法-CN202111625705.9有效
发明人：钱春桃;郑莉娜;孙博文;孙亚亭;颜乐龙;刘爽;李季;娄群峰;陈劲枫 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2021-12-28 - 公布日： 2022-07-01 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种甜瓜属野生种与栽培种部分种间杂种的创制方法，以野生种西印度瓜为母本，栽培种‘新红瑞’为父本，进行人工杂交，包括：步骤1、取母本雌花与父本雄花进行授粉，授粉后喷施氯吡脲水溶液和噻苯隆溶液并套袋隔离；步骤2、取授粉后14～21d的幼嫩果实，先清洗表面，然后对果皮表面消毒，取出幼胚；步骤3、将幼胚置于培养基中进行黑暗培养，所述培养基为：MS+6‑BA+蔗糖+植物凝胶混合培养基；步骤4、所述黑暗培养的28～32d后转入继代培养基中继代培养，所述继代培养基为MS培养基，直接诱导幼胚分化成苗。本发明制得了甜瓜属野生种与栽培种部分种间杂种，解决了栽培甜瓜资源遗传基础狭窄，抗病抗逆能力弱的问题。
一种甜瓜野生栽培部分间杂创制方法

[发明专利]一种与黄瓜多表皮毛性状相关的SNP分子标记及其应用-CN202011301724.1有效
发明人：娄群峰;杨志歌;宋蒙飞;陈劲枫 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2020-11-19 - 公布日： 2022-02-18 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明公开了一种与黄瓜多表皮毛性状相关的SNP分子标记及其应用，所述SNP分子标记是以‘Chinese Long v2’黄瓜基因组数据库中的Chr6:27397366位点前后各400bp的DNA序列为模板设计引物，扩增得出的基因组序列如SEQ ID NO:1所示，自5’端起，在该序列的第401位存在A/C多态性，即SNP位点。本发明分子标记与黄瓜多表皮毛基因紧密连锁，可靠且检测快捷，可用于黄瓜多表皮毛相关性状的定向遗传育种。对于加快黄瓜品种的遗传改良进程，提高育种选择效率具有重要的理论和实践指导意义。
一种黄瓜表皮性状相关 snp 分子标记及其应用

[发明专利]一种远缘杂交诱导胚发育直接创制甜瓜双单倍体的方法-CN202110480062.7有效
发明人：钱春桃;黄耀;刘麒;陈静;张春静;孙博文;孙亚亭;娄群峰;李季;陈劲枫 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2021-04-30 - 公布日： 2022-01-14 - 主分类号： A01H1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种远缘杂交诱导胚发育直接创制甜瓜双单倍体的方法，包括包括以下步骤：步骤1、取黄瓜雄花与甜瓜雌花进行授粉，授粉后对雌花进行套袋隔离，同时在果柄处喷施氯吡脲水溶液；步骤2、授粉后的4～5h，在子房基部喷施噻苯隆溶液；步骤3、收获种瓜后取相对饱满种子在培养基中进行胚拯救获得再生植株；步骤4、对再生植株进行炼苗、移栽，随后正常管理。本发明将氯吡脲和噻苯隆联合用于远缘杂交诱导，降低了基因型对单倍体诱导地限制，保证了稳定发育，解决了甜瓜利用雌核诱导单倍体效率低的问题，适用于国内的甜瓜品种。
一种远缘杂交诱导发育直接创制甜瓜单倍体方法

[实用新型]一种甜瓜种间杂种组培苗驯化装置-CN202120926493.7有效
发明人：钱春桃;郑莉娜;孙亚亭;孙博文;黄耀;程春燕;娄群峰;李季;王瑜晖;陈劲枫 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2021-04-30 - 公布日： 2021-12-17 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种甜瓜种间杂种组培苗驯化装置，包括保湿透光罩、营养液杯体和基质容器，所述保湿透光罩的底部开口，所述营养液杯体的顶部开口，所述基质容器为敞口容器，所述基质容器的上部外周设有支撑凸缘，所述支撑凸缘支撑于所述营养液杯体的开口，所述基质容器部分设置于所述营养液杯体之内，所述基质容器的敞口设有向内缩径的调节环，所述调节环设有若干通孔，所述基质容器的底部设有由所述基质容器内部向下延伸的虹吸条，所述保湿透光罩的底部开口与所述调节环的内沿卡接。本实用新型结构可控性较强，结构轻巧，操作简单，适用于数量稀少、长势弱、较难存活的种间杂种组培苗的驯化。
一种甜瓜间杂种组培苗驯化装置

[发明专利]一个与黄瓜圆形果顶性状紧密连锁的分子标记InDel-RT-CN201711081119.6有效
发明人： 陈劲枫;李季 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2017-11-01 - 公布日： 2021-06-11 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明公开了与黄瓜圆形果顶性状主效QTL RT6.1连锁的分子标记方法，属于生物技术领域。首先公开了与QTL RT6.1紧密连锁的分子标记Indel‑RT，同时公开了该标记的引物Indel‑RT‑F/Indel‑RT‑R。在含有RT6.1的分离群体和含有RT6.1的自交系材料中，标记引物Indel‑RT‑F/Indel‑RT‑R在圆形果顶株系中均能扩增出165bp产物，在不含有RT6.1的尖角形果顶株系中扩增出156bp产物。本发明公开的与RT6.1紧密连锁分子标记，可用于黄瓜圆形果顶性状的分子标记辅助育种。
一个黄瓜圆形性状紧密连锁分子标记 indel rt

[发明专利]一对用于黄瓜微型化性状鉴定的SNP标记的引物、试剂盒、应用和方法-CN202110263761.6在审
发明人：娄群峰;宋蒙飞;付文苑;陈劲枫 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2021-03-11 - 公布日： 2021-06-08 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明提供了一对用于黄瓜微型化性状鉴定的SNP标记的引物、试剂盒、应用和方法，属于分子生物学技术领域。本发明提供的用于黄瓜微型化性状鉴定的SNP标记的引物，包括正向引物F和反向引物R；所述正向引物F的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示；所述反向引物R的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。本发明提供的用于黄瓜微型化性状鉴定的SNP标记的引物可快速对黄瓜微型化性状进行鉴定，能够有效解决表型鉴定结果可靠性低、费时、成本高、难度大等问题。
一对用于黄瓜微型化性鉴定 snp 标记引物试剂盒应用方法

[发明专利]一种调控黄瓜圆叶性状相关蛋白及其编码基因与应用-CN201810061681.0有效
发明人：娄群峰;宋蒙飞;程凤;陈劲枫 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2018-01-17 - 公布日： 2020-12-15 - 主分类号： C12N9/12 文献下载
摘要：本发明公开了一种调控黄瓜圆叶性状相关蛋白及其编码基因与应用，该蛋白的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO：2所示，PID基因编码丝氨酸/苏氨酸的蛋白激酶，属于AGC激酶家族，该蛋白的编码基因如序列表SEQ ID NO：1所示的碱基序列，该碱基序列在1092bp位的鸟嘌呤(G)被腺嘌呤(A)取代，编码的氨基酸残基序列的346位的Val(缬氨酸)突变为Met(甲硫氨酸)，该蛋白抑制生长素极性运输，导致生长素运输极性缺陷，具体植株表型为叶边缘平滑，锯齿突出不明显，叶片呈近圆形；主根不发达，主侧根没有明显区别；雌雄花无花萼，雌花不育等。该基因及蛋白的发现，可以为黄瓜叶型改良、产量增加以及理想株型培育和生长素信号通路分子调控机制的研究提供基础。
一种调控黄瓜性状相关蛋白及其编码基因应用

[发明专利]黄瓜幼叶黄化基因的分子标记方法-CN201610017929.4有效
发明人：娄群峰;王晶;李子昂;魏庆镇;陈劲枫 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2016-01-12 - 公布日： 2020-12-08 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明公开了黄瓜幼叶黄化基因连锁的分子标记方法，属于生物技术领域。首次公开了与黄瓜幼叶黄化基因紧密连锁的分子标记SSR63，该标记正反向引物序列分别为：5′GCCTTCATCCTGTGGCGT 3′和5′CCAGTCATGGGTTTGTTGGA 3′。在幼叶黄化与绿叶黄瓜构建的F2中，引物SSR63F/SSR63R在幼叶黄化株系中均能扩增出226bp产物，在绿叶株系中均能扩增出204bp产物或同时含有204bp和226bp两条带的产物，与vyl紧密连锁。本发明公开的与黄瓜幼叶黄化基因vyl紧密连锁分子标记，可用于黄瓜幼叶黄化基因定位或分子标记辅助育种。
黄瓜黄化基因分子标记方法

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