本发明公开了一种脱氢酶突变体及利用其制备甲泼尼龙脱氢物的方法。所述脱氢酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示;所述脱氢酶突变体为在如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列上具有选自以下一个或多个位点的氨基酸残基的差异:第315位、第330位或第452‑463位。利用所述脱氢酶突变体制备甲泼尼龙脱氢物的方法包括以下一种或多种步骤:将包含所述脱氢酶突变体的酶液或纯酶与甲泼尼龙格氏物混合;pH 7.5,35℃中反应,并搅拌。本发明提供的方法具有反应体系简单,转化周期短,副反应少,成本低等优点。
本发明公开了一种表达11β‑HSD1酶突变体的大肠杆菌基因工程菌及其应用。其中,所述11β‑HSD1酶突变体的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明公开了一种利用11β‑HSD1酶突变体制备醋酸氢化可的松的方法。本发明通过定向进化得到11β‑HSD1酶突变体,用于制备醋酸氢化可的松时活性好,产物产量较高,达到88.2%。