[发明专利]鸽蛋清中卵白蛋白的提取及其在伤口修复、抗衰老方面的应用在审

专利信息
申请号: 202310334539.X 申请日: 2023-03-31
公开(公告)号: CN116421708A 公开(公告)日: 2023-07-14
发明(设计)人: 续晓琪;肖宇;徐虹;卢鹏;孟俊;李莎 申请(专利权)人: 南京工业大学
主分类号: A61K38/38 分类号: A61K38/38;C07K1/14;C07K1/30;A61P17/02;A61P17/18;A61K8/64;A61Q19/08;A61Q17/04;A23L33/17;C07K14/77;A61P17/16;A61Q19/00
代理公司: 无锡迅牛知识产权代理事务所(普通合伙) 32731 代理人: 彭素琴
地址: 211816 江苏*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 鸽蛋 卵白 蛋白 提取 及其 伤口 修复 衰老 方面 应用
【说明书】:

发明公开了鸽蛋清中卵白蛋白的提取及其在伤口修复、保湿抗衰老方面的应用,属于生物、医药和食品技术加工领域。本发明方法通过采用聚乙二醇分级沉淀预分离,双水相系统纯化的技术路线,实现了一种针对鸽蛋清的全新的卵白蛋白提取方法,具有高度生物相容性且条件温和、盐的用量明显低于盐析法、操作简单等优点;所得卵白蛋白纯度高,色泽和复水溶解性好,极大程度上保留了蛋白的结构和生物活性,易于放大,所需设备成本较低,适用于大规模工业化生产,具有促进伤口修复、保湿抗衰老功效,可添加至化妆品、保健食品和特殊医学用途食品。

技术领域

本发明涉及鸽蛋清中卵白蛋白的提取及其在伤口修复、抗衰老方面的应用,属于生物、医药和食品技术加工领域。

背景技术

鸽蛋被称作“动物人参”,含有大量优质蛋白质和少量脂肪,并含少量总糖、磷脂,以及铁、钙、维他命A、维他命B、维他命D等微量元素和营养成分,易于人体消化吸收。随着鸽蛋产品得到了广大消费者的认可,肉鸽养殖在全国范围内普遍兴起,但其蛋壳薄易碎、保鲜时间短等问题,限制其流通。同时,鸽蛋深加工技术较为落后,其作为优质蛋白质来源的潜力未被挖掘,因此,提供一种鸽蛋清新型卵白蛋白的提取方法及其应用,对于鸽蛋产品深加工具有重要意义。

卵白蛋白是蛋清蛋白的主要组成部分,由于其具有发泡和凝胶特性,在食品工业中应用广泛。此外,研究发现卵白蛋白具有抗氧化、降血压、免疫调节、血管紧张抑制等生物生理功能,能够作为生化试剂、营养补充剂和药物等,在生物与医药领域有很高的应用价值。卵白蛋白具有两种旁系同源物,即卵白蛋白伴随Y蛋白(分子量约44kDa)和卵白蛋白伴随X蛋白(分子量约43kDa),两种组分蛋白的氨基酸组成和分子量差异,必然导致蛋白生理功能有所差异。卵白蛋白伴随Y蛋白但在鸡蛋中含量非常少,却是鸽蛋清中最主要的蛋白,含量占50%以上。与此同时,鸽蛋清和鸡蛋清中的卵白蛋白均通过共价键结合糖链,以糖蛋白的结构存在,导致其整体分子量大于单一蛋白的分子量;其中已有报道(Isolation andCharacterization ofMajor Glycoproteins ofPigeon Egg White)显示,卵白蛋白伴随Y蛋白和卵白蛋白伴随X蛋白结合糖链后的糖蛋白分子量分别在44~65kDa和43~55kDa。目前一些研究已报道过卵白蛋白伴随Y蛋白的结构参数,但其生理功能尚不明确。作为鸽蛋清中含量较高的蛋白,对其生物活性的研究是十分重要的。

鸡蛋作为产量高,应用广泛的禽蛋,卵白蛋白作为最早从蛋清中分离出来的蛋白之一,目前大多采用盐析法提取,大量的硫酸铵会导致蛋白质变性,一定程度上损害卵白蛋白的生理活性。其他常见的提取方法如离子交换色谱、凝胶色谱、超滤、吸附等,大多操作繁琐,同时设备成本高昂。双水相体系是一种液-液萃取技术,体系主要由水、聚合物与盐组成,由于聚合物与盐之间的不相容性而形成两相,借助蛋白质在两相中的分配系数不同从而实现样品的分离。Matheus M.Pereira等人就成功使用双水相体系提取鸡蛋清中的卵白蛋白。

本发明前期研究发现,由于鸡蛋清和鸽蛋清中卵白蛋白的组成和结构均不相同,导致鸡蛋蛋清中卵白蛋白的分离工艺不适用于鸽蛋,包括Matheus M.Pereira等人提取鸡蛋清卵白蛋白的方法。因此,开发针对于鸽蛋中卵白蛋白分离工艺是十分必要的。

此外,如果能发现更多的鸽蛋清中卵白蛋白的功能,开发相关的应用产品,将提高鸽蛋清中卵白蛋白的附加值、对鸽蛋产品深加工具有重大意义。

发明内容

为了解决上述至少一个问题,本发明发现通过采用改进的双水相体系萃取的方法从鸽蛋清中提取到了分子量分别为44~65kDa和43~55kDa的卵白蛋白,该方法所用工艺操作简单快捷、无需复杂设备、适用于工业化生产、产品纯度高且生物活性完好。本发明进一步发现,鸽蛋清来源的卵白蛋白伴随Y蛋白(NCBI上登录号为PKK33949.1,ovalbumin-related protein Y,或称卵清蛋白关联蛋白Y基因),具有促进伤口修复、保湿抗衰老功效,可添加至化妆品、保健食品和特殊医学用途食品,有利于提高鸽蛋清中卵白蛋白的附加值。

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