[发明专利]细菌检测试剂在制备宫颈癌早期诊断或筛查的试剂或试剂盒中的应用

说明书

本发明公开了细菌检测试剂在制备宫颈癌早期诊断或筛查的试剂或试剂盒中的应用所述细菌包括普雷沃氏菌。本发明首次发现并提出普雷沃氏菌属在宫颈癌患者中明显升高且相对丰度最高，通过检测普雷沃氏菌属的丰度，为宫颈癌的早期诊断提供了分子手段，同时对宫颈癌的预防和治疗也有着重要的应用价值，亦为寻找早期发现宫颈癌高特异性和高敏感的非侵入性生物标志物提供了新的思路和理论基础。

技术领域

本发明涉及生物医学技术领域，具体涉及细菌检测试剂在制备宫颈癌诊断或筛查的试剂或试剂盒中的应用。

背景技术

宫颈癌(CC)是世界上第四大最常见的癌症，也是妇女癌症死亡的第四大原因。由于宫颈癌发病率和死亡率都很高，仍然是严重威胁妇女健康的主要疾病之一。大量研究证实，人乳头瘤病毒(HPV)，特别是高危人乳头瘤病毒(HR-HPV)的持续感染，是宫颈癌的主要原因。但并不是所有的HR-HPV感染的患者都会进展为癌症，大量研究表明：大部分HPV感染者可以自我清除病毒，约5％～10％的患者无法自我清除，进展为HPV持续性感染，其中可能仅有不到1％的持续感染者可发展为宫颈癌。这表明一定还存在着其它协同因素与HPV病毒共同作用于宫颈，促进宫颈癌的发展。

通过宫颈癌筛查，医疗人员可以及时实施适当的治疗方式，从而使宫颈癌死亡率大幅度降低。按照目前常规的宫颈癌筛查技术，如细胞学检测、HPV检测、目视检查，不能达到高特异度和高灵敏度的理想筛查标准。

因此，寻找协同HPV感染促进宫颈癌发展的因素，开发一种高特异度和高灵敏度的筛查宫颈癌的检测方法，对于宫颈癌患者的早期诊断和治疗至关重要。

近年来，许多研究表明，阴道微生物群在HPV的持续感染和宫颈癌的发生发展中起着关键作用。HPV感染可导致阴道微生物群的紊乱，阴道微生物群的紊乱又会导致阴道及宫颈更易感染HPV，同时影响病毒清除，增加宫颈癌的风险。因此，研究阴道微生物群在宫颈癌发生发展过程中的作用，为寻找协同HPV感染促进宫颈癌发展的因素，开发一种高特异度和高灵敏度的筛查宫颈癌的检测方法提供了科学依据，并宫颈癌的防治提供新的理论基础。

普雷沃氏菌属(Prevotella)是正常寄生于人体的条件致病菌，一般情况下只引起寄生部位的感染，偶尔可迁移到身体其他部位引起感染。普雷沃氏菌是从拟杆菌属分出的新菌属，呈革兰阴性短球杆菌，专性厌氧菌。至今已有50多个种，包括洛氏普雷沃氏菌、产黑普雷沃氏菌、中间普雷沃氏菌和双路普雷沃氏菌等。常定植于人的口腔、直肠和生殖道黏膜，当机体抵抗力下降，尤其在接受侵袭性操作后或长期处于免疫抑制状态下，内源性感染概率会显著增加。普雷沃氏菌主要引起口腔感染，如牙龈炎、牙周炎等；女性生殖道炎症，如阴道炎、前庭腺炎、尿道旁腺炎、外阴阴道脓肿等，还可逆行感染引起子宫内膜炎和子宫积脓等；阴囊脓肿亦有报道。普雷沃氏菌过度生长会导致阴道微生态失衡，会引起细菌性阴道炎。

发明内容

发明人在临床研究中发现细菌在宫颈癌的发生发展中起着至关重要的作用，经研究证实通过检测普雷沃氏菌对宫颈癌的诊断有着重要的应用价值。基于此，本发明保护如下技术方案：

细菌检测试剂在制备宫颈癌早期诊断或筛查的试剂或试剂盒中的应用，所述细菌包括普雷沃氏菌。

优选地，所述细菌还包括加德纳菌。

优选地，所述细菌的检测试剂包括涂片检测试剂、细菌核酸检测试剂。

进一步优选地，所述细菌核酸检测试剂为微生物16S rDNA测序检测试剂。

进一步优选地，所述微生物16S rDNA测序检测试剂为针对细菌16S rRNA基因V3-V4区域的测序文库构建检测试剂。

进一步优选地，所述微生物16S rDNA测序检测试剂包括PCR扩增引物：

上游引物序列：341F：5′-CCTACGGGNGGCWGCAG-3′，