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[发明专利]一种PolyA检测方法-CN202310747506.8在审
发明人：贾明明;陈立;朱伟萍 -专利权人：北京立康生命科技有限公司
申请日： 2023-06-25 - 公布日： 2023-08-08 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明公开了一种PolyA检测方法，包括以下步骤：在PolyA聚合酶反应体系中对待测靶mRNA进行加尾反应；将加尾后的mRNA加入反转录反应体系，以特异性反转引物进行反转录形成cDNA；于待测PolyA上游位置设计的特异性正向引物和反向引物对反转录形成的cDNA进行聚合酶链式反应得到聚合酶链式反应产物；对所述聚合酶链式反应产物进行分离及大小分析，得到PolyA尾长。本发明解决了现有技术中PolyA检测操作过程繁复、准确性不高等缺陷，提供了准确检测不同mRNA PolyA尾长及占比的方法，能够适用模板编码polyT转录PolyA尾长检测，有效定义IVT mRNA的理论PolyA长度的占比。
一种 polya 检测方法

[发明专利]快速构建多聚腺苷酸polyA质粒的方法及相应质粒-CN202310974073.X在审
发明人：钱莉春;姜伟;赵碧玉;吴昕;杨熹;黎建军;李定华 -专利权人：苏州左旋星生物科技有限公司
申请日： 2023-08-04 - 公布日： 2023-09-08 - 主分类号： C12N15/66 文献下载
摘要：本发明涉及快速构建多聚腺苷酸polyA质粒的方法及相应质粒。该方法包括构建质粒骨架pLevoB1，合成目的mRNA基因片段并添加酶切位点，将目的mRNA基因片段插入质粒骨架pLevoB1中，即得到多聚腺苷酸polyA质粒成品，用作目标mRNA的模板质粒DNA。本发明能稳定、高效地为目的mRNA基因片段添加多聚腺苷酸polyA序列，且提高了正确克隆比例，所得多聚腺苷酸polyA质粒成品可用作目标mRNA的模板质粒DNA；还能便捷地更换线性化位点或增加多聚腺苷酸polyA序列。
快速构建腺苷酸 polya 质粒方法相应

[发明专利]检测质粒polyA尾长度的引物和方法-CN202310021154.8在审
发明人：潘有东;张琼;朱蕾;刘浩;万季;赵钊;王弈 -专利权人：深圳新合睿恩生物医疗科技有限公司;广州市新合生物医疗科技有限公司;深圳市新合生物医疗科技有限公司
申请日： 2023-01-06 - 公布日： 2023-06-02 - 主分类号： C12Q1/6876 文献下载
摘要：本发明公开了一种检测质粒polyA尾长度的引物和方法，所述引物包括：序列如SEQ ID NO.1所示的正向引物，和序列如SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4或SEQ ID在本发明中，设计了针对质粒polyA尾进行扩增的引物，可以特异性扩增质粒polyA尾；提取质粒对质粒polyA尾PCR扩增后，即可通过琼脂糖凝胶电泳检测分析polyA尾长度，其对比Sanger测序法，所需时间减少和成本均大幅度减少
检测质粒 polya 长度引物方法

[发明专利]一种直接RNA测序建库方法-CN202210250375.8在审
发明人：童希文;周立光;吕颖健;殷亮;凡石美;赵越超 -专利权人：北京惠吉圣唯生物科技有限公司
申请日： 2022-03-15 - 公布日： 2022-09-13 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明涉及一种直接RNA测序建库方法，包括PolyA+RNA的富集、无polyA尾RNA的加A反应和建库，本发明技术通过对无polyA尾的RNA进行加A反应，进而对不同样品添加不同的
一种直接 rna 测序建库方法

[发明专利]人工合成的polyA、哺乳动物细胞重组表达载体、哺乳动物宿主细胞、表达方法及应用-CN201811394238.1在审
发明人：王天云;王小引;徐丹华;赵春澎;姚朝阳;牛敬媛;宋超;李琴;杨献军 -专利权人：新乡医学院;河南普诺易生物制品研究院有限公司
申请日： 2018-11-21 - 公布日： 2019-03-19 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明涉及一种人工合成的polyA、哺乳动物细胞重组表达载体、哺乳动物宿主细胞、表达方法及应用，属于生物技术领域。本发明polyA可用于哺乳动物细胞重组表达载体，polyA可以通过控制mRNA的稳定性，提高mRNA的翻译效率来增强哺乳动物或者其他来源蛋白质的分泌表达，能有效提高哺乳动物细胞中蛋白质的产量并降低生产成本
哺乳动物细胞重组表达载体哺乳动物宿主细胞生物技术领域来源蛋白质分泌表达哺乳动物可用蛋白质应用翻译

[发明专利]MOF荧光传感器的制备方法及其检测单碱基错配的应用-CN202210661936.3在审
发明人：陈丽华;杨文杰;李栋 -专利权人：青岛科技大学
申请日： 2022-06-13 - 公布日： 2022-09-13 - 主分类号： C12Q1/6825 文献下载
摘要：首先将polyA和polyC的冻干粉末分别用NaAc‑HAc缓冲液稀释至5×10‑6M‑2×10‑5M；随后，将该溶液加热以使二级结构变性，然后迅速置于室温缓慢复性；接下来，按照摩尔比3：2取polyC和polyA溶液，并与MOF充分混合，在37±3℃下孵育24±4h；洗涤并离心，去除游离或松散吸附在MOF@polyA/polyC上的polyC和polyA。
mof 荧光传感器制备方法及其检测碱基应用

[发明专利]一种用于mRNA疫苗中polyA尾检测的方法及应用-CN202310475157.9在审
发明人：黄卓;王红丽;刘志勇;李昊哲;郭钧 -专利权人：上海微谱检测科技集团股份有限公司
申请日： 2023-04-27 - 公布日： 2023-09-12 - 主分类号： G01N30/02 文献下载
摘要：本发明涉及药物分析技术领域，尤其涉及IPC G01N30，更具体地涉及，一种用于mRNA疫苗中polyA尾检测的方法及应用。本发明提供了一种省时、省力、分辨率高的用于mRNA疫苗中polyA尾检测的方法，包括以下步骤：S1：对mRNA疫苗溶液中的mRNA进行酶切、磁珠纯化、洗脱回收，得到polyA尾片段；S2：利用液相色谱质谱联用仪LC‑MS对Poly A尾片段进行检测；本发明中的检测方法可实现单个核苷酸的检测，可检测多个寡核苷酸序列，进而准确地确定polyA分布范围，分辨率高；且前处理方法简单，检测时间短，大大提高稳定性，节省时间
一种用于 mrna 疫苗 polya 检测方法应用

[发明专利]一种二级信号放大的microRNA检测方法和应用-CN202311202461.2在审
发明人：胡瑞彬;张博 -专利权人：南方科技大学
申请日： 2023-09-18 - 公布日： 2023-10-24 - 主分类号： C12Q1/682 文献下载
摘要：本申请的第一方面，提供一种核酸分子的检测组合物，该检测组合物包括：核酸探针，核酸探针用于特异性结合核酸分子；加尾酶和ATP，加尾酶用于催化ATP在核酸分子的3'端形成polyA尾；polyT和检测标记，polyT用于特异性结合polyA尾，并在polyA尾上引入多个检测标记，检测标记修饰于polyT或能够修饰于polyT。本申请利用核酸分子在聚合酶的作用下末端修饰polyA的特性，与生物素化的短片段polyT杂交，通过链霉亲和素‑生物素的方式引入多个荧光分子作为信号放大，开发出一种不依赖PCR扩增技术就能够实现高灵敏检测的方法
一种二级信号放大 microrna 检测方法应用

[发明专利]利用高通量测序同时测定基因表达量和多聚腺苷酸加尾的方法-CN201210213994.6有效
发明人：倪挺;魏刚 -专利权人：复旦大学
申请日： 2012-08-01 - 公布日： 2012-10-17 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本方法在逆转录时引入可被切除的特殊碱基，从而去除多余的腺苷酸，达到直接测定PolyA位点的目的。本方法无需信使RNA的纯化，直接进行逆转录，因此更简单；由于采用双端测序，因此更精确；本方法既能精确测定PolyA位点，又能可靠确定基因表达量，因此更省钱。该文库经高通量测序后获得基因表达及PolyA加尾的基础数据，再经过生物信息学分析获得基因的表达量和PolyA加尾的详细信息，为人类重要疾病的早期诊断和预后预测提供分析依据。
利用通量同时测定基因表达腺苷酸方法

[发明专利]利用家蚕后部丝腺体外表达系统合成蛋白质的方法-CN200810120477.8无效
发明人：张耀洲;夏佳音;陈健;吕正兵;陈琴;聂作明;盛清 -专利权人：浙江理工大学
申请日： 2008-08-29 - 公布日： 2009-02-04 - 主分类号： C12N15/79 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用家蚕后部丝腺体外表达系统合成蛋白质的方法，在家蚕后部丝腺组织提取液中加入pUC19－FL－GFP－PolyA重组质粒或插有外源基因的pUC19－FL－GFP－PolyA重组质粒或pUC19－FL－PolyA质粒或插有外源基因的pUC19－FL－PolyA质粒及蛋白酶抑制剂，25℃～29℃水浴，即得目的蛋白的表达。
利用家蚕后部腺体外表系统合成蛋白质方法

[发明专利]单载体双向启动的Tet-on诱导表达系统及其构建方法和应用-CN201210300572.2有效
发明人：夏海滨;陈皓 -专利权人：陕西师范大学
申请日： 2012-08-22 - 公布日： 2012-12-12 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：一种单载体双向启动的Tet-on诱导表达系统，元件的连接顺序为5-’CMV-TetR-KRAB-SV40polyA-rtTA2S-M2-EB-PminCMV-KB-TRE-Tight-PminCMV-EcoR Ⅰ-Spe Ⅰ-SV40polyA-3’，Tight-PminCMV左侧的复合元件rtTA2S-M2-EB-PminCMV-KB-TRE的连接方式为3’-rtTA2S-M2-EB-PminCMV-KB-TRE-5’-5’-Tight-PminCMV-3’，其余元件均按与该系统相同方向5’-3’顺序连接；两个酶切位点EcoR Ⅰ和Spe Ⅰ位于元件Tight-PminCMV和元件SV40polyA之间。
载体双向启动 tet on 诱导表达系统及其构建方法应用

[发明专利]蛋白质介导的mRNA靶向分子及其制备方法和应用-CN202210762863.7在审
发明人：胡勇;张昊 -专利权人：武汉瑞佶生物科技有限公司
申请日： 2022-06-30 - 公布日： 2022-09-06 - 主分类号： C07K14/145 文献下载
摘要：所述蛋白质介导的mRNA靶向分子由mRNA通过其3’端的PolyA与靶向蛋白基团连接而成，其中，mRNA的结构从5’端至3’端依次包含5’帽子结构、带有Kozak序列的5’UTR、目的基因序列、3’UTR以及PolyA。可通过将表达目的基因的mRNA直接与偶联有蛋白的PolyA序列进行连接，合成出3’端带有蛋白的mRNA分子，从而达到靶向性药物递送的目的。
蛋白质 mrna 靶向分子及其制备方法应用

[发明专利]IL-24和OSM双基因共表达重组质粒和重组腺病毒以及应用-CN201110433101.4无效
发明人：杨吉成;缪竞诚;刘济生;盛伟华 -专利权人：苏州大学
申请日： 2011-12-21 - 公布日： 2012-07-11 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明涉及生物领域，公开了保藏编号为CCTCC NO：M 2011378的双基因共表达重组质粒pAdTrack-CMV-IL-24-polyA-promoter-OSM，以及由该质粒制备的重组腺病毒Ad-IL-24-polyA-promoter-OSM。本发明通过在Ad-polyA-promoter空载体间亚克隆入IL-24基因和OSM基因构建IL-24和OSM双基因共表达重组质粒，并与腺病毒pAdEasy-1同源重组在QBI-293A细胞中包装产生重组腺病毒
il 24 osm 基因表达重组质粒病毒以及应用

[发明专利]通过适体介导的多腺苷酸化调节来外源性控制哺乳动物基因表达-CN201680066010.2在审
发明人：严来兴;罗立明;赵佩雯 -专利权人：贝勒医学院
申请日： 2016-11-11 - 公布日： 2018-07-31 - 主分类号： C12N15/09 文献下载
摘要：本公开的实施方案涉及表达构建体的用途，其中至少一个polyA信号嵌入可表达的转录物的上游，例如，诸如在转录物的5'UTR内。在某些实施方案中，polyA信号包含在配体‑结合适体内，并且配体与适体的结合或其缺乏指示可表达的转录物的结果。在特定的实施方案中，配体的不存在导致在其5'UTR中具有polyA的表达的转录物被表达，但然后被降解，而配体的存在导致可表达的转录物在表达后的降解被抑制。
转录物配体适体表达构建体降解哺乳动物基因外源性腺苷酸介导嵌入上游

[发明专利]使用POLY(A)聚合酶对RNA的尺寸选择-CN201980063415.4在审
发明人： K·艾伦 -专利权人： BIOO科技公司
申请日： 2019-08-20 - 公布日： 2021-11-05 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：在一些实施方案中，所述方法可包括通过将RNA片段群体与polyA聚合酶温育，将polyA尾添加至样品中的较长RNA片段而不是较短RNA片段，其中使用的反应条件优选地仅对较长片段而非较短片段进行加尾。
使用 poly 聚合 rna 尺寸选择

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